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[发明专利]脯氨酸羟化酶传感质粒、脯氨酸羟化酶生物传感器及其应用-CN202311009910.1在审
发明人： 张志乾;谭洪群;刘丽花;吴嵩;江翱;吴奕瑞;邱益;陈西朋;何茜 -专利权人：态创生物科技（广州）有限公司
申请日： 2023-08-10 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了脯氨酸羟化酶传感质粒、脯氨酸羟化酶生物传感器及其应用。该生物传感器中含有组成型表达的的mf‑Lon蛋白酶基因和带有pdt#3标签的荧光蛋白和氨基酸羟化酶基因。该生物传感器可以快速检测菌株中脯氨酸羟化酶活性，具有高效高灵敏和可视化等优势。同时也为高活性脯氨酸羟化酶的筛选提供了有利的技术支持，从而实现包括自动化检测和微流控筛选等新领域的应用。
脯氨酸羟化酶传感质粒生物传感器及其应用

[发明专利]大肠杆菌及其在催化合成阿洛酮糖中的应用-CN202310044441.0有效
发明人： 张志乾;赖诗静;吴奕瑞;江翱;崔华;郑晓茂;谭洪群;许波;吴嵩 -专利权人：态创生物科技（广州）有限公司;广州市乾相生物科技有限公司
申请日： 2023-01-30 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于阿洛酮糖生物合成的大肠杆菌，敲除大肠杆菌的FruA基因，在大肠杆菌的基因组上插入cfa、ibpA和ibpB基因，以及DPEase重组基因，使得DPEase蛋白产物锚定在大肠杆菌细胞表面。还公开了其制备方法、CRISPR质粒A和B以及相应的转座酶体系。本发明敲除了大肠杆菌的FruA基因，降低了果糖的非目的性消耗。并插入cfa、pA和ibpB基因，然后对FruA缺失的大肠杆菌菌株进行了耐高温和耐高果糖的驯化，以提高大肠杆菌宿主在催化环境(55℃)中的稳定性。利用酶锚定技术将阿洛酮糖异构酶锚定在大肠杆菌的表面，使得阿洛酮糖异构酶在大肠杆菌表面生长，并催化外界环境中的果糖转化成阿洛酮糖。
大肠杆菌及其催化合成阿洛酮糖中的应用

[发明专利]抗菌肽SETIT、编码DNA及表达系统-CN202310944047.2在审
发明人：张豫;吴奕瑞;张志乾;刘丽花;何景涛;吴嵩;何茜;江翱;陈西朋 -专利权人：态创生物科技（广州）有限公司
申请日： 2023-07-31 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C07K14/415 文献下载
摘要：本发明公开了一种抗菌肽SETIT，来源于Paspalum vaginatum，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。还公开了其编码DNA及表达系统。本发明的抗菌肽SETIT，对革兰氏阳性、阴性菌、真菌均有着明显地抑制效果，抑菌效率高，广谱性好。利用可食用马克斯克鲁维酵母的无细胞表达系统对抗菌肽SETIT进行表达，可以获得可食用级别的谷子抗菌肽。
抗菌 setit 编码 dna 表达系统

[发明专利]一种生物酶培养用反应设备-CN202311181825.3在审
发明人： 张志乾;亓洪菊;高峰;李庆;刘超 -专利权人：山东乾肽生物科技有限公司
申请日： 2023-09-14 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本发明涉及生物酶制备技术领域，具体提出了一种生物酶培养用反应设备；包括发酵反应釜以及搅拌总成；所述搅拌总成包括装配在所述发酵反应釜中的外置搅拌机构以及装配在所述外置搅拌机构中的内置匀料机构；与现有的采用简单结构的搅拌桨式的同类设备相比，本发明中提供的设备中包含外置搅拌机构以及内置匀料机构两套混料系统的搅拌总成，对于发酵物料具有混合搅拌、搅动分散以及喷射冲击的综合混料功能，提高了多相物料之间的综合混合接触效果，进而提高了发酵物料的利用率、生物酶的生成效率以及发酵生成量。
一种生物酶培养反应设备

[发明专利]增强T7RNAP对胶原蛋白/弹力蛋白转录活性的定向进化系统和方法-CN202310944052.3在审
发明人：刘丽花;张志乾;吴奕瑞;江翱;吴嵩;许波;邱益;陈西朋;何茜;何景涛;周海银 -专利权人：态创生物科技（广州）有限公司
申请日： 2023-07-31 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N15/73 文献下载
摘要：本发明公开了一种增强T7RNAP对胶原蛋白/弹力蛋白转录活性的定向进化系统，包括：(1)M13‑T7噬菌体，所述M13‑T7噬菌体为gIII基因被T7RNAP的编码基因所替代的噬菌体M13；(2)辅助质粒，所述辅助质粒上包含T7启动子介导的胶原蛋白/弹性蛋白‑内含肽‑pIII融合蛋白的表达基因；(3)含F质粒的进化菌株，所述辅助质粒转化到进化菌株中。还公开了相应的进化方法及筛选到的T7RNAP突变体。本发明公开的菌株定向进化方法，可以获得具有高转录胶原蛋白和弹力蛋白活性的T7RNAP突变体，将T7RNAP突变体整合到宿主菌基因组后，可以获得胶原蛋白和弹性蛋白合成能力增强的菌株。
增强 t7rnap 胶原蛋白弹力转录活性定向进化系统方法

[发明专利]联产二羟基丙酮和波色因的宿主细胞及方法-CN202311008580.4在审
发明人： 张志乾;吴奕瑞;刘丽花;陈西朋;江翱;郑晓茂;闫修瑜;崔华;吴嵩 -专利权人：态创生物科技（广州）有限公司
申请日： 2023-08-11 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种联产二羟基丙酮和波色因的宿主细胞，其中所述宿主细胞进行了如下工程改造：引入了编码NADPH依赖性甲基乙二醛还原酶GRE2的基因，以及编码甘油脱氢酶GDH的基因。还公开了联产二羟基丙酮和波色因的方法。本发明的宿主菌共表达甘油脱氢酶、波色因还原酶和辅因子转化酶，并敲除sthA基因，从而实现辅因子NADPH和NAD+的循环利用。以甘油和1‑C‑(β‑D‑吡喃木糖基)‑丙酮为底物，通过控制甘油的量，最终达到同时高产二羟基丙酮和波色因的目的。这种方法合成玻色因和二羟基丙酮具有产量高、效率快、成本低和安全性好等优势，适用于玻色因和二羟基丙酮的工业化生产。
联产羟基丙酮宿主细胞方法

[发明专利]酰基转移酶MsAcT变体、融合蛋白及其固定方法和应用-CN202311008578.7在审
发明人： 张志乾;刘丽花;吴奕瑞;江翱;王海梅;许波;邱益;吴嵩;陈西朋 -专利权人：态创生物科技（广州）有限公司
申请日： 2023-08-11 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种酰基转移酶MsAcT变体，是在野生型酰基转移酶MsAcT的基础上进行S11C、T93A、F150I、F154A、T161S五位点突变。还公开了其融合蛋白、编码基因、表达质粒及宿主菌，以及其固定方法和在催化寡肽乙酰基化或棕榈酰基化中的应用。本发明对野生型酰基转移酶MsAcT改造，获得五位点突变体，并且在突变体的N端插入促溶的Spy‑GST标签，获得的酰基转移酶变体可以生物合成，且酶活明显高于野生型酰基转移酶。本发明还将酰基转移酶变体固定在SpyCather树脂上，获得稳定性更高的固定化酰基转移酶变体，使其更具有工业应用的价值。本发明的固定化酰基转移酶变体可催化寡肽乙酰基化和棕榈酰基化，催化效率高，且不产生有害副产物。
转移酶 msact 变体融合蛋白及其固定方法应用

[实用新型]一种用于建筑铝模楼梯踏步和墙板组合装置-CN202321251669.9有效
发明人：欧泽军;吴轶德;魏炳炎;张志乾;余志清 -专利权人：湖南青洲科技发展有限公司
申请日： 2023-05-23 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： E04G13/06 文献下载
摘要：本实用新型涉及铝模板施工技术领域，具体地说，涉及一种用于建筑铝模楼梯踏步和墙板组合装置，包括楼梯组件，楼梯组件的一侧通过销钉销片连接有标准狗牙，标准狗牙的上侧通过销钉销片连接有嵌补墙板，嵌补墙板的上侧通过销钉销片连接有墙板组件，墙板组件的上侧通过销钉销片连接有K板，标准狗牙为方正模板，楼梯组件、标准狗牙、嵌补墙板以及墙板组件形成闭合的铝模板组件。本实用新型，通过将标准狗牙设置为方正模板，墙板组件为标准墙板，可以通过非标的嵌补墙板对墙板组件的高度进行补差，使整个铝模板楼梯组件完美契合，进而扩了大通用件面积，减少非标件面积，提升回收翻新时模板的利用率，降低浪费和成本。
一种用于建筑楼梯踏步组合装置

[发明专利]内含肽进化系统和方法、对应的突变质粒和报告质粒-CN202211242143.4有效
发明人：刘丽花;张志乾;吴嵩;陈西朋;何茜;江翱;吴奕瑞;王帆;杨敏 -专利权人：态创生物科技（广州）有限公司;广州市乾相生物科技有限公司
申请日： 2022-10-11 - 公布日： 2023-10-03 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种内含肽进化体系，包括：包含切口酶和低保真DNA聚合酶的表达基因，以及由两个短肽组成的二聚化短肽体系的表达基因的突变质粒；包含抗生素抗性蛋白‑N和内含肽‑N基因的融合蛋白表达基因，以及内含肽‑C和抗生素抗性蛋白‑C基因的融合蛋白表达基因的报告质粒；以及突变质粒和报告质粒的表达载体。还公开了上述的突变质粒和报告质粒，以及对应的内含肽进化方法。本发明采用切口酶和DNA聚合酶对内含肽基因进行不断的突变，活性增强的内含肽基因通过内含肽的剪接作用产生更多的完整抗生素抗性蛋白，从而使得菌株获得高抗生素抗性。通读高抗性培养筛选，获得高抗性的菌株，其菌株即为含有高活性内含肽的菌株。
内含进化系统方法对应突变质粒报告

[发明专利]高产琥珀酸菌株的筛选方法-CN202311008581.9在审
发明人：吴奕瑞;张志乾;何茜;吴嵩;江翱;郑晓茂;崔华;刘丽花 -专利权人：态创生物科技（广州）有限公司
申请日： 2023-08-11 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种高产琥珀酸菌株的筛选方法，包括以下步骤：使用ARTP和微波对菌株BER308进行混合诱变；将诱变后的菌株BER308接种到琥珀酸发酵液中进行厌氧培养；厌氧培养后的菌株BER308接种到NaCl浓度在0.6M以上的LB培养基中进行培养；挑选长势好的单克隆，混合；重复步骤(1)－(4)，其中每一次诱变后，含NaCl培养基中的NaCl浓度都高于前一次诱变后含NaCl培养基中的NaCl浓度；直至NaCl培养基中的NaCl浓度达到1～2M。本发明方法可以筛选出具有琥珀酸合成效率快，产量高和菌株活性好等优点的菌株，筛选出的菌株适合工业上大规模琥珀酸发酵合成。
高产琥珀酸菌株筛选方法

[发明专利]内含肽ChiATP、内含肽ChiATP-二肽-2融合蛋白及二肽-2的表达方法-CN202310044442.5在审
发明人：王海梅;张志乾;江翱;王帆;吴奕瑞;崔华;郭羽;邱益;傅玮;王嘉鹏 -专利权人：态创生物科技（广州）有限公司;广州市乾相生物科技有限公司
申请日： 2023-01-30 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C07K14/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种内含肽ChiATP，其氨基酸序列如SEQ ID:No.2所示。还公开了内含肽ChiATP‑二肽‑2融合蛋白、表达载体和表达宿主菌。以及二肽‑2的表达方法。本发明提供了一种全新的内含肽ChiATP，可以成功将目标蛋白表达出来。本发明所提供的二肽‑2表达分离系统不限于任意一种小分子活性肽，也可以是一些大分子活性肽，通过对活性物质的表达，利用内含肽ChiATP的自切割特性，可应用于药物生产、化妆品等行业。本发明的有益效果在于：利用内含肽介导的多肽纯化系统来纯化重组蛋白，利用内含肽的自我切割功能，构成一种不需要传统分离方法中所需要的昂贵的树脂和切除标签所需要的特殊酶，此方法操作简便，快速，高效而且试用成本低。
内含 chiatp 二肽融合蛋白表达方法

[发明专利]一种利用固定化鲁氏酵母去除溶液中果糖的方法-CN202310592657.0在审
发明人：许好妹;张志乾;霍梦飞;刘汉强;崔华;吴奕瑞 -专利权人：态创生物科技（广州）有限公司;广州市乾相生物科技有限公司
申请日： 2023-05-24 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： C12N11/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用固定化鲁氏酵母去除溶液中果糖的方法。本发明以聚乙烯醇混合海藻酸钙为载体固定化酵母细胞，采用分批连续发酵法可连续多轮转化高浓度果糖溶液，基本可完全去除阿洛酮糖生产中混合糖液中的果糖。在该方法中，固定化酵母细胞可多次重复使用，工艺简单，处理过程中没有乙醇产生，避免了后续步骤中因乙醇蒸馏带来的安全隐患，大大降低了生产成本，可应用于阿洛酮糖的规模化工业生产。
一种利用固定化鲁氏酵母去除溶液果糖方法

[发明专利]一种内含肽变体及其在生物法制备蓝铜胜肽中的应用-CN202210976738.6有效
发明人：刘丽花;张志乾;吴奕瑞;江翱;罗元廷;胡玉成;王海梅;王嘉鹏 -专利权人：广州市乾相生物科技有限公司;态创生物科技（广州）有限公司
申请日： 2022-08-15 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C07K14/195 文献下载
摘要：本发明公开了一种内含肽变体及其在生物法制备蓝铜胜肽中的应用，所述内含肽变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。通过将其与GHK组成融合蛋白，在导入载体质粒后制备得到高效、稳定的蓝铜胜肽的重组表达载体，通过诱导表达能够获得高纯度的蓝铜胜肽。而且，基于该方法的蓝铜胜肽制备难度低，能够有效降低污染和有毒有害副产物的产生，产出量大，适用于蓝铜胜肽的大规模工业化量产，具有较大的市场价值。
一种内含变体及其生物法制备蓝铜胜肽中的应用

[发明专利]一种适用于连续测定金丝桃苷和槲皮素体系的HPLC分析方法-CN202310633893.2在审
发明人：王海梅;张志乾;王嘉鹏;吴奕瑞;王帆;朱家平;罗嘉雯 -专利权人：态创生物科技（广州）有限公司
申请日： 2023-05-31 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种适用于连续测定金丝桃苷和槲皮素体系的HPLC分析方法，其特征在于：第一步：设定液相色谱条件；第二步：配制分析用流动相，其中；流动相A为超纯水；流动相B为甲醇；第三步：设定分析程序为等度洗脱，洗脱浓度：流动相A：20～40％，流动相B：60～80％，流速：0.5～2mL/min；第四步：配制多个含金丝桃苷和槲皮素样品的待测溶液；等。本发明的适用于连续测定金丝桃苷和槲皮素体系的HPLC分析方法操作简单，连续测定金丝桃苷和槲皮素时，节约大量的时间成本和经济成本，大大简化了操作的复杂性，同时有着很好的分析效果。另外，能够对同时含有上述两种物质的样品进行测定并可以同时准确标定两种物质的浓度。
一种适用于连续测定金丝槲皮素体系 hplc 分析方法

[发明专利]一种适用于连续分析玻色因和糖类物质的HPLC-ELSD分析方法-CN202310470523.1在审
发明人：王海梅;张志乾;吴奕瑞;朱家平;王嘉鹏;罗嘉雯 -专利权人：态创生物科技（广州）有限公司
申请日： 2023-04-27 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种适用于连续分析玻色因和糖类物质的HPLC‑ELSD分析方法，其特征在于：第一步：配制多个待测样品溶液，所述待测样品为包含玻色因和糖类物质中的一种或多种的样品；第二步：设定液相色谱条件；第三步：准备分析用流动相；第四步：清洗色谱柱；第五步：采用分析程序对其中一个待测样品进行测定，记录色谱图；第六步：任意地根据各物质的标准曲线计算对应的含量；等。本发明的适用于连续分析玻色因和糖类物质的HPLC‑ELSD分析方法操作简单，连续分析测定多个样品时，节约大量的时间成本和经济成本，大大简化了操作的复杂性。
一种适用于连续分析糖类物质 hplc elsd 方法

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