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[发明专利]测序文库的构建方法-CN202310416765.2在审
发明人：李凯;廖端芳;齐捧;曾娅玲;林丽美;肖莉;何超平;传军 -专利权人：湖南中医药大学
申请日： 2023-04-18 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明提供了一种测序文库的构建方法，该方法包括如下步骤：提供待测DNA的酶切片段；采用连接酶连接所述酶切片段和测序接头，并加入切刻酶，制备接头产物；以及以所述接头产物为模板进行PCR扩增，构建测序文库；其中，所述测序接头的核苷酸序列中包含所述切刻酶的酶切位点，所述切刻酶的酶切位点上游第一个碱基被特异性改变。采用本发明的方法，能够有效地防止测序接头之间发生自连，从而提高测序接头与待测片段的连接效率和测序数据的合格率。
序文构建方法

[发明专利]用于检测新冠病毒的荧光PCR检测试剂盒及检测方法-CN202011638028.X有效
发明人： 廖端芳;肖莉;庹勤慧;林丽美;肖正午;彭壮;李亚梅;李凯 -专利权人：湖南中医药大学
申请日： 2020-12-31 - 公布日： 2023-06-02 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于检测新冠病毒的荧光PCR检测试剂盒及检测方法，其包括新冠内参、特异性引物、内参检测探针、第一检测探针和第二检测探针，新冠内参为所述特异性引物中的一对引物的靶序列，内参荧光报告基团、所述第一荧光报告基团和所述第二荧光报告基团互不相同。本发明的用于检测新冠病毒的荧光PCR检测试剂盒中，新冠内参为特异性引物中的一对引物的靶序列，同时具有不同荧光报告基团的内参检测探针、第一检测探针和第二检测探针具有部分共用的特异性引物，通过分析内参检测探针、第一检测探针和第二检测探针的荧光信号，能够减少假阴性的结果，既能够增加单次检测的靶点数目，提高检测灵敏度，同时也可提高检测的准确性。
用于检测病毒荧光 pcr 试剂盒方法

[发明专利]用于检测EGFR的探针、试剂盒和缺失突变分析方法-CN202211031539.4在审
发明人：李凯;刘李登;齐捧;曾亚玲;肖莉;廖端芳 -专利权人：珠海艾莱博科技有限公司
申请日： 2022-08-26 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于检测EGFR的探针、试剂盒和缺失突变分析方法，用于检测EGFR的探针包括一条针对缺失区域之外的侧翼序列的探针，序列为SEQ ID NO：1；以及一条或多条针对缺失区域野生序列的探针，序列为SEQ ID NO:2。试剂盒还包括引物，所述引物包括EGFR缺失侧翼正向引物，序列为SEQ ID NO：3；以及EGFR缺失侧翼反向引物，序列为SEQ ID NO：4。缺失突变分析方法采用所述的探针针对多种缺失突变，通过比较不同针对野生序列的探针扩增曲线的Ct值，达到了对突变模板有无以及多少的相对定量分析，从而在分析EGFR缺失突变含量较少的游离核酸时，具有一定实用价值。
用于检测 egfr 探针试剂盒缺失突变分析方法

[发明专利]DNA甲基化位点测序文库的构建方法-CN202210881697.2在审
发明人：李凯;廖端芳;张佳;齐捧;肖莉;曾娅玲;传军;李玉婧;何庆;罗晶晶;常蕾 -专利权人：江门市灿明生物科技有限公司
申请日： 2022-07-26 - 公布日： 2023-03-21 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明提供一种DNA甲基化位点测序文库的构建方法，本发明采用非甲基化接头和甲基化接头进行甲基化位点的分析和构建甲基化测序文库，其中，甲基化接头利用甲基化依赖性限制性内切酶酶切产生粘性末端利用连接酶引入，识别含有甲基化的C碱基的特定位点并在识别位点侧翼进行酶切。非甲基化接头采用对碎片化核酸填平补A加接头或者利用非甲基化相关的可产生粘性末端的内切酶加接头，当使用甲基化敏感性限制性内切酶时，本发明对部分甲基化位点进行了两次识别过程。本发明提供的甲基化测序文库构建方法，样本需求量小，能够用于单一细胞水平的甲基化定性测序分析和低丰度标本的定量分析，甲基化分析所覆盖的范围广泛，甲基化富集效率高。
dna 甲基化位点测序文构建方法

[发明专利]药物组合物、培养基和诱导肿瘤细胞成脂分化的方法-CN202110838888.6在审
发明人：覃丽;廖端芳;朱能;赵谭军 -专利权人：湖南中医药大学
申请日： 2021-07-23 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： A61K38/28 文献下载
摘要：本发明涉及细胞诱导技术领域，公开了一种药物组合物、培养基和诱导肿瘤细胞成脂分化的方法。所述药物组合物含有雷公藤红素、地塞米松和胰岛素，所述雷公藤红素、所述胰岛素和所述地塞米松的摩尔比为0.25‑1:0.8‑1:1。所述培养基包括上述药物组合物，且所述雷公藤红素的浓度为0.25‑1μΜ。所述方法包括在肿瘤细胞中加入上述培养基。所述药物组合物诱导时间快且肿瘤细胞的成脂率更高。
药物组合培养基诱导肿瘤细胞分化方法

[发明专利]甲基化位点的检测方法及检测试剂盒-CN202210711630.4在审
发明人： 廖端芳;齐捧;曾娅玲;罗晶晶;肖莉;张佳;李凯 -专利权人：江门市灿明生物科技有限公司
申请日： 2022-06-22 - 公布日： 2022-09-06 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明涉及一种甲基化位点的检测方法及检测试剂盒，检测方法：提供待测DNA样本，用甲基化依赖性内切酶进行酶切；将所得酶切产物与接头片段连接，制备扩增模板；采用扩增引物对扩增模板进行扩增，收集扩增产物检测；接头片段为发夹型接头或者双链接头，接头片段为发夹型接头，扩增引物的数量为一条，且扩增引物与待测DNA样本上甲基化依赖性内切酶的酶切位点的上游序列特异性结合，接头片段为双链接头，扩增引物包括甲基化位点特异性引物和接头引物，甲基化位点特异性引物的数量为一条或者多条，接头引物的数量为一条，且双链接头的反链包含接头引物对应的片段，甲基化位点特异性引物包含接头引物对应的片段。避免了对待测DNA样本的破坏。
甲基化检测方法试剂盒

[发明专利]一种金樱根指纹图谱的建立方法及金樱根的质量检测方法-CN201910394853.0有效
发明人：张鹏;李伏君;张英帅;白璐;伍实花;廖端芳;李春 -专利权人：株洲千金药业股份有限公司
申请日： 2019-05-13 - 公布日： 2022-07-19 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种金樱根指纹图谱的建立方法及金樱根的质量检测方法。所述构建方法包括供试品溶液制备和经HPLC分析检测过程，即可得到所述金樱根指纹图谱。本发明通过大量实验摸索得到的构建方法，操作简单、供试品溶液制备耗时短、精密度好、重复性好、稳定性好、特征峰多、检测准确可靠，可用于金樱根药材的质量检测，为药品生产及检测提供了质量控制的高标准，以确保产品质量的稳定性，保证药品使用的安全有效。同时，刺梨苷、野蔷薇苷、千花木酸、蔷薇酸和委陵菜酸均为金樱根中的重要三萜类活性成分，对于金樱根的药效影响较大，可通过检测金樱根中这5种重要三萜类活性成分含量，控制其含量，从而达到控制金樱根药材的质量和药效。
一种金樱根指纹图谱建立方法质量检测

[发明专利]一种蒽醌类化合物的检测试剂及检测方法-CN201910552938.7有效
发明人：夏伯候;林丽美;廖端芳 -专利权人：湖南中医药大学
申请日： 2019-06-25 - 公布日： 2022-06-21 - 主分类号： G01N30/06 文献下载
摘要：本发明实施例提供了一种蒽醌类化合物的检测试剂及检测方法。该检测试剂包括氢键受体以及与氢键受体对应的氢键供体，氢键受体包括L‑薄荷醇，氢键供体包括乙酸。检测方法步骤包括将待测液加热后，向待测液中加入检测试剂，混匀后冰浴，得到凝固层和液体层，再将液体层倒出后，向凝固层中加入解凝剂解固后通过HPLC测定蒽醌类化合物的含量。本发明实施例提供的检测试剂及检测方法，减少了繁琐的离心和过滤，在保留离子优势的基础上，还具有成本低、环保、高效等特征，此外DESs的应用还避免了反乳化剂的使用，解决了现有技术中蒽醌类化合物通过质谱检测成本高的问题。
一种蒽醌类化合物检测试剂方法

[发明专利]川续断皂苷乙在制备防治血管疾病药物中的应用-CN202011426433.5有效
发明人：庹勤慧;霍艳杰;廖端芳 -专利权人：湖南中医药大学
申请日： 2020-12-09 - 公布日： 2022-06-21 - 主分类号： A61K31/7048 文献下载
摘要：本发明公开了川续断皂苷川续断皂苷乙在制备预防或治疗血管疾病药物中的用途，为川续断皂苷的应用提供了新的范围，同时本发明还提供了一种用于防治血管疾病的治疗药物，本发明人通过研究发现川续断皂苷乙参与细胞的增殖和血管重构过程，具有防治血管损伤后内膜增生作用，故本发明药物尤其适用于防治血管内膜增生类的血管疾病。
续断皂苷制备防治血管疾病药物中的应用

[发明专利]一种三萜类化合物和其药学上可接受的盐及制备方法和应用-CN201910394846.0有效
发明人：龚云;白璐;彭开锋;凌勇根;张鹏;李春;廖端芳 -专利权人：株洲千金药业股份有限公司
申请日： 2019-05-13 - 公布日： 2022-06-07 - 主分类号： C07J63/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种三萜类化合物和其药学上可接受的盐及制备方法和应用。所述化合物的结构式如式Ⅰ所示，所述药学上可接受的盐的结构如式Ⅱ所示；其中M为碱金属离子、碱土金属离子或铵根。本发明所述化合物结构新颖，原始来源于金樱根，从金樱根提取物中分离得到，其对抗大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、绿脓杆菌和白色念珠菌具有很好的抑菌作用，同时还具有很好的消炎作用、镇痛作用、解热作用，可制备成为抗菌药物、消炎药物、镇痛药物或解热药物进行应用；当其成盐后，所得成盐化合物同样具有与化合物相当或相同的生物活性。
一种三萜类化合物药学可接受制备方法应用

[发明专利]DNA甲基化修饰的检测方法-CN202111675154.7在审
发明人：肖莉;袁梦兮;罗晶晶;廖端芳;殷宇芳;张佳;李凯 -专利权人：湖南中医药大学
申请日： 2021-12-31 - 公布日： 2022-04-22 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明涉及一种DNA甲基化修饰的检测方法，包括如下步骤：对待测样本的DNA进行酶切；酶切后的待测样本在可视化标签反应液中发生可视化标签反应，在酶切末端添加荧光标记；对可视化的所述荧光标记的信号进行检测。本发明巧妙地将甲基化限制性内切酶和DNA聚合酶/DNA连接酶结合应用于DNA甲基化修饰的检测中，先通过甲基化限制性内切酶在样本DNA中引入切口，再利用DNA聚合酶/DNA连接酶在该切口处加入荧光标记的核苷酸，从而实现样本DNA的C位点的可视化，这样以来，通过检测待测样本的荧光强度并将其与对应的已知甲基化修饰水平的荧光强度作比较，就能够可视化地判断甲基化修饰C位点的水平。
dna 甲基化修饰检测方法

[发明专利]三萜类化合物和其药学上可接受的盐及制备方法和应用-CN201910394851.1有效
发明人：白璐;蹇顺;凌勇根;张英帅;龚云;李春;廖端芳 -专利权人：株洲千金药业股份有限公司
申请日： 2019-05-13 - 公布日： 2022-04-08 - 主分类号： C07J53/00 文献下载
摘要：本发明公开了三萜类化合物和其药学上可接受的盐及制备方法和应用。所述化合物的结构式如式Ⅰ所示，所述药学上可接受的盐的结构如式Ⅱ所示；其中M为碱金属离子、碱土金属离子或铵根。本发明所述化合物结构新颖，原始来源于金樱根，从金樱根提取物中分离得到，其对抗大肠杆菌、金黄色葡萄球菌或绿脓杆菌具有很好的抑菌作用，同时还具有很好的消炎作用、镇痛作用或解热作用，可制备成为抗菌药物、消炎药物、镇痛药物或解热药物进行应用；当其成盐后，所得成盐化合物同样具有与化合物相当或相同的生物活性。
三萜类化合物药学可接受制备方法应用

[发明专利]检测融合基因的方法-CN202111013330.0在审
发明人：肖莉;廖端芳;李凯 -专利权人： 廖端芳
申请日： 2021-08-31 - 公布日： 2022-02-08 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明利用对线性核酸片段的末端进行修复使其形成平末端，同时进行加A尾反应加高通量测序接头引物序列，对添加了一种接头的线性核酸片段采用5端带有高通量测序另一接头的针对病毒序列的引物组合进行多循环单向引物延伸，和随后采用接头一与接头二的成对引物的双向核酸扩增制备高通量测序文库，达到富集病毒基因与宿主基因所形成的融合基因片段的效果。因此，新的策略对序列未知的融合基因可以进行富集，富集后的核酸片段可以达到高通量测序的可靠性范围。
检测融合基因方法

[发明专利]三重电极电泳装置及其电泳槽-CN202110630479.7在审
发明人：肖莉;廖端芳;周翠兰;张佳;徐惠芬;李凯;肖正午 -专利权人： 廖端芳
申请日： 2021-06-07 - 公布日： 2021-10-01 - 主分类号： G01N27/447 文献下载
摘要：本发明公开了多重电极电泳装置的电泳槽，包括槽体、设置在所述槽体内的中央电泳电极A、设置在所述中央电泳电极A外侧的环形电泳电极B、以及设置在所述环形电泳电极B外侧的环形电泳电极C；所述中央电泳电极A和环形电泳电极B的电极极性相同，且两者与环形电泳电极C的电极极性相反；所述中央电泳电极A和所述环形电泳电极B之间形成聚集生物大分子的富集区域；在电泳时，生物大分子向所述富集区域内聚集，同时，所述槽体内还设有用于收集富集区域内的生物大分子的收集结构。该电极电泳装置能够用于生物大分子的富集和提取，特别适用于中等体积或者较大体积的样本；其富集和提取所用时间短，且操作简单易于自动化。
三重电极电泳装置及其电泳槽

[发明专利]含夏枯草多糖、三萜及挥发油的药物组合物及其应用-CN201710724237.8有效
发明人：林丽美;廖端芳;闫庆梓 -专利权人：湖南中医药大学
申请日： 2017-08-22 - 公布日： 2021-04-16 - 主分类号： A61K31/715 文献下载
摘要：本发明涉及药物组合物，具体公开了一种含夏枯草多糖、三萜及挥发油的药物组合物。本发明通过试验研究发现了所述夏枯草多糖、三萜及挥发油在配伍使用后，可明显提高抗增殖活性及抗肿瘤活性，并能够有效诱导和促进乳腺癌细胞的凋亡，并且增强机体的免疫功能。由于上述配伍可增强单独药物的抗肿瘤活性，因此，上述配伍还可有效的减少药物的用量，降低药物的不良反应。
夏枯草多糖挥发油药物组合及其应用

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