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[实用新型]一种用于表皮模型3D培养的细胞培养小室-CN201720706098.1有效
发明人：李银刚;付丹丹;卢永波 -专利权人：广东博溪生物科技有限公司
申请日： 2017-06-18 - 公布日： 2018-01-19 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型实施例提供一种用于表皮模型3D培养的细胞培养小室，涉及生物工程领域，能够利用用于表皮模型3D培养的细胞培养小室完成3D表皮模型的构建，并且在细胞培养过程中方便观察表皮模型的生长状态和外观形态，同时便于实验人员对用于表皮模型3D培养的细胞培养小室进行操作。该用于表皮模型3D培养的细胞培养小室具有通透性，用于表皮模型3D培养的细胞培养小室包括细胞培养小室杯体，设置于细胞培养小室杯体底部的滤膜，与细胞培养小室杯体底部均相连接的三个支柱，以及设置在细胞培养小室杯体外侧面的至少两条长度相等的侧棱。
一种用于表皮模型培养细胞培养小室

[发明专利]一种防收缩的人工真皮构建方法-CN201710460504.5在审
发明人：李潇;卢永波 -专利权人：广东博溪生物科技有限公司
申请日： 2017-06-18 - 公布日： 2017-11-17 - 主分类号： A61L27/60 文献下载
摘要：本发明公开了一种防收缩的人工真皮构建方法，将已去除脂肪和结缔组织的皮肤组织进行消化培养，取第5~7代细胞用于真皮构建；将其不同的密度分两次接种在胶原溶液中，下层凝固后再接种上层，上层接种密度大于下层接种密度，最后放入培养箱中培养，得到人工真皮。本发明差异化接种的方式，上层细胞密度相对较大，可以满足检测需要的细胞数目；下层密度相对较小，可以减少细胞生长过程中对胶原基质的利用，从而减少下层真皮收缩。
一种收缩人工真皮构建方法

[发明专利]构建重组皮肤模型的黑素与角质形成细胞气液面培养基-CN201710460501.1在审
发明人：李芳;卢永波 -专利权人：广东博溪生物科技有限公司
申请日： 2017-06-18 - 公布日： 2017-11-07 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供涉及构建重组皮肤模型的黑素与角质形成细胞气液面培养基，涉及组织工程技术领域，通过聚集的不正常生发的黑素模型组织切片发现，主要是因为黑素生发不均匀，局部角质形成细胞生发过量导致的，本发明培养基具有促进黑素细胞均匀生发抑制角质形成细胞过量生发的特点，霍乱毒素和TPA的添加促进黑素细胞贴壁和增殖。该构建重组皮肤模型的黑素与角质形成细胞气液面培养基以500ml计包括角质无血清培养基K‑SFM 500ml，胰岛素2～30μg，氢化可的松10～800μg，牛脑垂体提取物10～200mg，上表皮生长因子20～2000μg，碱性成纤维生长因子1～1500μg，角质细胞生长因子5～80μg，12‑O‑十四烷酰佛波醇‑13‑醋酸酯TPA 20～200ng，CaCl2 10～200mg，霍乱毒素20～200nM。
构建重组皮肤模型角质形成细胞液面培养基

[发明专利]一种牙龈上皮模型及其体外构建方法-CN201710460514.9在审
发明人：何欣;李潇;卢永波 -专利权人：广东博溪生物科技有限公司
申请日： 2017-06-18 - 公布日： 2017-11-03 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开一种牙龈上皮模型及其体外构建方法，其特征是包括以下方法步骤；步骤一、牙龈上皮细胞的原代培养及扩增，步骤二、牙龈上皮细胞液下接种培养，步骤三、牙龈上皮模型气液面的增殖分化培养本发明使用人源牙龈上皮细胞的使用，使模型结构及功能更接近正常人体牙龈上皮组织，能更加真实的反应检测指标；体外构建重复性佳，可实现产业化制备；气液面分段培养法，保证了细胞在不同阶段的不同营养需求，缩短了构建时间、降低生产成本；培养基中因子的添加，保证了模型的正常复层化，这种自身结构和细胞外微环境的影响可进一步提升模型的屏障功能，最终构建的体外牙龈上皮模型与人牙龈上皮组织具有高度相似的结构及功能。
一种牙龈上皮模型及其体外构建方法

[发明专利]一种人表皮细胞的差别消化方法-CN201710460521.9在审
发明人：王丹丹;卢永波;李潇 -专利权人：广东博溪生物科技有限公司
申请日： 2017-06-18 - 公布日： 2017-10-24 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种人表皮细胞的差别消化方法，具体涉及组织细胞学领域。已去除皮下疏松结缔组织的人表皮组织经D‑H酶消化液消化；消化完成后加入血清终止液，过滤收集至离心管；倾出上清后用PBS轻柔吹打至细胞悬液完全混匀，分别取上半部分与下半部分适量悬液滴入不同的EP管，进行细胞计数并检测细胞活力；离心后接种至表皮细胞培养液，经37℃5%CO2培养箱培养获得表皮细胞。该方法简单，快速，获取细胞数量多且纯度高，可建立活力较高的人表皮细胞库，供临床移植和体外重建人体皮肤模型所需。
一种表皮细胞差别消化方法

[发明专利]一种细胞冻存方法及细胞冻存液-CN201710460512.X在审
发明人：张和平;卢永波 -专利权人：广东博溪生物科技有限公司
申请日： 2017-06-18 - 公布日： 2017-10-20 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明实施例提供一种细胞冻存方法及细胞冻存液，涉及生物技术领域，由于该细胞冻存液中不含血清，能够提高细胞复苏率，使细胞复苏后活性与性能高、可满足多种不同细胞长期冻存的需要。该细胞冻存方法具体包括以下两个步骤步骤一、将混入细胞的细胞冻存液装入容器1，再将容器1装入容器2，容器1和容器2之间形成真空；步骤二、A、利用常温风冷使容器2的温度从常温下降至4℃，温度下降的速度为每分钟下降3‑4℃；B、利用冰箱使容器2的温度从4℃下降至‑20℃，温度下降的速度为每分钟下降1‑2℃；C、利用冰箱使容器2的温度从‑20℃下降至‑80℃，温度下降的速度为每分钟下降2‑3℃；D、将容器2放入液氮罐中冻存，液氮罐的温度为‑196℃。
一种细胞方法冻存液

[发明专利]一种表皮干细胞的富集方法-CN201710460498.3在审
发明人：王丹丹;卢永波;李潇;吴迪 -专利权人：广东博溪生物科技有限公司
申请日： 2017-06-18 - 公布日： 2017-10-20 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明提供一种表皮干细胞的富集方法，涉及生物细胞技术领域，能够在短时间内获得纯度较高的表皮干细胞。表皮干细胞的富集方法包括如下几个步骤步骤一、利用无血清培养基对表皮干细胞进行富集；步骤二、利用IV型胶原对表皮干细胞进行二次富集。
一种表皮干细胞富集方法

[发明专利]一种细胞复苏方法-CN201710460513.4在审
发明人：张和平;卢永波 -专利权人：广东博溪生物科技有限公司
申请日： 2017-06-18 - 公布日： 2017-09-15 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明实施例提供一种细胞复苏方法，涉及细胞培养技术领域，能够使复苏后细胞活率高、不易老化、增殖能力好，满足多种不同细胞冻存后复苏的需要。该细胞复苏方法包括以下三个步骤步骤一、将冻存的细胞取出后，放入50℃以下的恒温水中震荡温育50‑60s；步骤二、获取经过步骤一处理后的细胞，经过1500rpm离心3分钟后去上清，加入无血清的DMEM培养基37℃孵育2分钟，其中，DMEM培养基中包括浓度为1‑15ng/mL的bFGF；步骤三、获取经过步骤二处理后的细胞，经过800rpm离心2分钟后去上清，加入无血清的DMEM/F12培养基孵育3分钟。
一种细胞复苏方法

[发明专利]一种黑素细胞均匀生长的培养方法-CN201710460517.2在审
发明人：车景敏;卢永波 -专利权人：广东博溪生物科技有限公司
申请日： 2017-06-18 - 公布日： 2017-09-15 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种黑素细胞均匀生长的培养方法，包括一、收集黑素细胞，用M254液体培养基培养收集的黑素细胞；二、制备预处理的培养板；三、将培养收集的黑素细胞制成细胞悬液加入预处理的培养板中，晃动使细胞均匀铺于培养板上，然后向培养板中加入黑素细胞预培养液，于CO2培养箱中培养1h后取出培养板；四、将取出的培养板中的培养液更换成增殖培养液，于CO2培养箱中增殖培养24h～48h。本发明的方法既可以保证黑素细胞的活性，又能使黑素细胞快速贴壁并能均匀生长，采用本发明方法培养的黑素细胞贴壁率提高了25%～40%。
一种细胞均匀生长培养方法

[发明专利]一种表皮细胞大规模培养方法-CN201710460503.0在审
发明人：张小波;卢永波 -专利权人：广东博溪生物科技有限公司
申请日： 2017-06-18 - 公布日： 2017-09-12 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种表皮细胞大规模培养方法，将扩增后的表皮种子细胞与培养液混匀重悬后，均匀接种于细胞工厂中，放入CO2培养箱，在37℃、5% CO2浓度条件下进行培养，根据传代需求培养一段时间后收获细胞；向细胞工厂加入消化液，孵育至大部分细胞不再贴壁时，立即将工厂内液体转移到装有终止液的容器中终止消化；然后向细胞工厂继续加入相同体积的消化液，孵育至所有细胞不再贴壁时，再向细胞工厂中加入相同体积的终止液终止消化；收集两次终止后的所有液体，离心除杂得到大规模培养好的表皮细胞。本发明一次培养可以获取大量状态一致性好，杂细胞含量非常少或无杂细胞，质量稳定的表皮细胞，节约培养时间，减少污染风险。
一种表皮细胞大规模培养方法

[发明专利]一种皮肤模型低温保存的固体培养基及其保存方法-CN201410418456.X有效
发明人：支旭勃;卢永波;李潇 -专利权人：广东博溪生物科技有限公司
申请日： 2014-08-22 - 公布日： 2017-01-18 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种可用于组织工程皮肤模型的低温保存用固体培养基及保存方法。通过给表皮细胞常用培养基中添加低温保护剂，制成基础培养液，然后将该基础培养液与琼脂糖凝胶混合凝固后形成可适于皮肤模型的固体培养基；组织工程皮肤模型嵌入该培养基中，在4℃～8℃保存24h～72h后，用普通的表皮细胞培养液复苏，该固体培养基，可以最大限度的减少细胞及皮肤组织在低温保存条件下产生的组织活力下降及结构损伤。
一种皮肤模型低温保存固体培养基及其方法

[实用新型]一种乒乓桌柜-CN201620352139.7有效
发明人：王强;王斐;王克建;薛英鹤;吴斌;丁军;何良政;黄琼;马律;苏小顺;吴霜;吴旭;李先瑞;臧金龙;丁也;王宇峰;朱泉;陈飞远;蔡哲杰;陈秋风;葛军;张萍;卢永波;杨伟;季爱时;费夕文;卫翠红;吴倩倩;何峥;安郁松;徐正航;朱敏;赵寒伟;张文凭;黄磊;侯天红;陈祥杰;施利利;刘菊美;张岽弘 -专利权人：上海邑通道具股份有限公司
申请日： 2016-04-25 - 公布日： 2016-12-14 - 主分类号： A47F5/00 文献下载
摘要：本实用新型提供一种乒乓桌柜，包括支承板，与所述支承板连接的支承框架，设置于所述支承框架顶部并与所述支承板连接的展板，其中：所述支承板包括上部的梯形部分和下部的长方形部分；所述支承框架包括第一桌腿，与第一桌腿平行的第二桌腿，连接所述第一桌腿和所述第二桌腿的第一横杆，连接所述第一桌腿与所述支承板的第二横杆及连接所述第二桌腿与所述支承板的第三横杆；所述展板包括底板，设置于所述底板一侧的第一挡板，设置于所述底板两端的第二挡板和第三挡板，设置于所述底板中部的隔板，所述隔板将所述展板分隔为第一展槽和第二展槽。本实用新型不仅结构简单稳固，而且外形更加时尚，在提高实用性和空间利用率的同时满足了顾客的审美需求。
一种乒乓

[发明专利]一种体外皮肤模型及角质形成细胞长效培养液-CN201610114508.3有效
发明人：支旭勃;张小波;卢永波 -专利权人：陕西博溪生物科技有限公司
申请日： 2016-03-01 - 公布日： 2016-05-25 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：一种体外皮肤模型及角质形成细胞长效培养液，其由基础培养液、胚胎干细胞培养液提取物和甘醇酸组分，基础培养液是K-SFM或MCDB153或体积比为1∶3混合的F12和DMEM三种培养液中的任意一种，其中添加了BPE，EGF，胰岛素和CaCl₂。该培养液能有效的平衡体外皮肤模型及角质形成细胞的增殖及分化速度，能有效延长构建成功的体外皮肤模型保存时间至7天、用于角质形成细胞从原代培养至第十二代。极大的满足不同检测条件的时间要求，拓展体外皮肤模型应用领域，同时为表皮细胞老化及分化等相关机理研究提供了基础条件。操作过程简便易行，使用方便，成本低廉。
一种体外皮肤模型角质形成细胞长效培养液

[发明专利]一种含黑色素的体外皮肤测试模型及其制备方法-CN201510795792.0有效
发明人：程蕊苹;卢永波;李潇 -专利权人：陕西博溪生物科技有限公司
申请日： 2015-11-18 - 公布日： 2016-02-24 - 主分类号： G01N33/50 文献下载
摘要：本发明公开了一种含黑色素的体外测试皮肤模型和制备方法及其用途。该测试模型包含真皮层和表皮层，其中所述表皮层为表皮细胞和黑色素细胞构成，真皮层为成纤维细胞及其分泌的细胞外基质形成的膜片。此皮肤模型与人体皮肤结构非常相似，构建过程模拟皮肤发育的过程，在真皮层的滋养下进行表皮层的生发并可促进黑色素的合成、分泌、转运等。本发明公开了所述皮肤模型的制备方法及其用于各种化妆品、保健品、药品的美白祛斑功效检测及相关机制探索研究等。
一种黑色素体外皮肤测试模型及其制备方法

[发明专利]一种口腔黏膜上皮模型及其体外构建方法-CN201510669717.X有效
发明人：何欣;卢永波;李潇 -专利权人：陕西博溪生物科技有限公司
申请日： 2015-10-13 - 公布日： 2016-01-20 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明提供了一种口腔黏膜上皮模型及其体外构建方法，属于组织工程学生物材料技术领域，是应用细胞生物学和工程学原理，使用口腔黏膜鳞状癌细胞株TR146、Tca8113、SCC-4、SCC-9、SCC-25、HN-6、CAL-27中的一种或两种，经体外扩增后，采用气液面培养法，在不同阶段使用不同培养体系，使其复层化，形成体外口腔黏膜上皮模型。
一种口腔黏膜上皮模型及其体外构建方法

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