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[发明专利]一种淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物及其应用方法-CN202310282680.X在审
发明人：杨江华;张效伟 -专利权人： 南京易基诺环保科技有限公司
申请日： 2019-04-26 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了一种淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物及其应用方法，属于生物技术领域。本发明依据常见淡水鱼类线粒体12S基因序列设计了16条宏条形码扩增引物，包括6条上游引物和10条下游引物，该引物对对鱼类群落覆盖度广、扩增效率高，引物组合可以扩增出长度为70bp至350bp的产物，兼容不同高通量测序平台，这种多引物组合的方法可以降低非特异性扩增，提高PCR成功率，可广泛用作特征条码序列进行鱼类物种鉴定、鱼类多样性分析等研究。
一种淡水鱼类线粒体 12 通用条形码扩增引物及其应用方法

[发明专利]一种淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物及其应用方法-CN201910341512.7有效
发明人：杨江华;张效伟 -专利权人： 南京易基诺环保科技有限公司
申请日： 2019-04-26 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了一种淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物及其应用方法，属于生物技术领域。本发明依据常见淡水鱼类线粒体12S基因序列设计了16条宏条形码扩增引物，包括6条上游引物和10条下游引物，该引物对对鱼类群落覆盖度广、扩增效率高，引物组合可以扩增出长度为70bp至350bp的产物，兼容不同高通量测序平台，这种多引物组合的方法可以降低非特异性扩增，提高PCR成功率，可广泛用作特征条码序列进行鱼类物种鉴定、鱼类多样性分析等研究。
一种淡水鱼类线粒体 12 通用条形码扩增引物及其应用方法

[发明专利]一种基于环境DNA的鼋现场核酸检测试剂盒及其使用方法-CN202210227842.5在审
发明人：孙晶莹;杨江华;张效伟 -专利权人： 南京易基诺环保科技有限公司
申请日： 2022-03-08 - 公布日： 2022-09-20 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：一种基于环境DNA的鼋现场核酸检测试剂盒及其使用方法，鼋现场核酸检测试剂盒包括引物组、探针、核酸检测试纸条、重组酶、聚合酶、ddH2O、PCR缓冲液及核酸抽提试剂盒，本发明是基于我国鼋全线粒体组设计，在模板浓度50Copies/μl时可以实现80％的稳定扩增，超过50Copies/μl时可以实现100％稳定扩增，具有特异性好、稳定性高的特点，等温PCR扩增中成功率高，可以很好对鼋DNA进行PCR扩增，减少其他生物DNA如鱼类DNA对结果带来的假阳性干扰。
一种基于环境 dna 现场核酸检测试剂盒及其使用方法

[实用新型]一种水生生物eDNA样品全自动采集装置-CN202220771626.2有效
发明人：付召军;杨江华;张效伟;孙晶莹 -专利权人： 南京易基诺环保科技有限公司
申请日： 2022-04-01 - 公布日： 2022-09-16 - 主分类号： G01N1/14 文献下载
摘要：本实用新型提出一种水生生物eDNA样品全自动采集装置，包括设置在采样点原位的箱体，箱体内设有用于富集环境水体中水生生物eDNA的操作单元，操作单元包括若干独立工作的富集器，箱体内设有富集管路系统，富集管路系统用于向操作单元供应环境水体，箱体上设有向富集管路系统供水的供水口和用于排出废水的排水口，箱体内设有用于切换富集器工作状态的管路切换机构，箱体上还设有用于控制的控制单元。该装置操作简单，富集效果稳定，可靠性好，易于标准化推广。
一种水生生物 edna 样品全自动采集装置

[发明专利]一种用于水环境DNA富集的滤膜组件、收集器及应用方法-CN202010521830.4有效
发明人：杨江华;张效伟 -专利权人： 南京易基诺环保科技有限公司
申请日： 2020-06-10 - 公布日： 2022-08-26 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于水环境DNA富集的滤膜组件、收集器及应用方法，属于环境DNA检测技术领域。所述滤膜组件包括：至少两层由上到下依次层叠设置的滤膜，按照由上到下的次序，各层滤膜的滤孔孔径任意选择性的呈线性减小或阶梯式减小；上下相邻的两层滤膜之间保持一定空隙，上下相邻的两层滤膜之间的滤孔呈交错状设置。利用本发明提供的滤膜组件进行水环境DNA富集，可以实现水样中生物样品的梯度过滤，避免滤膜的堵塞，进而增大滤膜的过滤量，提高水样的过滤通量和过滤效率，还能提高后续DNA的提取效率。
一种用于水环境 dna 富集滤膜组件收集应用方法

[发明专利]一种球型水环境DNA智能富集装置-CN202210228649.3在审
发明人：杨江华;付召军;孙晶莹;张效伟 -专利权人： 南京易基诺环保科技有限公司
申请日： 2022-03-08 - 公布日： 2022-06-17 - 主分类号： G01N1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种球型水环境DNA智能富集装置，涉及富集技术领域。外壳一上端设置有吊耳，外壳一外表面设置有开关和充电口，外壳二外表面设置有进水口、深度传感器和出水口，外壳一和外壳二内设置有泵，泵上端设置有流量计，泵下端设置有支架，支架内设置有电池，进水口外侧设置有富集过滤器。该球型水环境DNA智能富集装置，遥控终端智能控制能够根据预设参数自动运行所有动作实现精确采样，自动化程度高采样效率快，且节省人力和物力成本，通过水量定量设置，由流量计实时测出流速并由主控板进行累计计算处理至水量定量值时，达到流量的精确测量并控制泵的运转时间，并且结构简单易于携带，且易于实现远距离遥控操作和状态的实时监控。
一种水环境 dna 智能富集装置

[发明专利]一种水生生物eDNA样品全自动采集装置及方法-CN202210348611.X在审
发明人：付召军;杨江华;张效伟;孙晶莹 -专利权人： 南京易基诺环保科技有限公司
申请日： 2022-04-01 - 公布日： 2022-06-10 - 主分类号： G01N1/14 文献下载
摘要：本发明提出一种水生生物eDNA样品全自动采集装置，包括设置在采样点原位的箱体，箱体内设有用于富集环境水体中水生生物eDNA的操作单元，操作单元包括若干独立工作的富集器，箱体内设有富集管路系统，富集管路系统用于向操作单元供应环境水体，箱体上设有向富集管路系统供水的供水口和用于排出废水的排水口，箱体内设有用于切换富集器工作状态的管路切换机构，箱体上还设有用于控制的控制单元。该装置操作简单，富集效果稳定，可靠性好，易于标准化推广。本发明还提出一种水生生物eDNA样品全自动采集方法。
一种水生生物 edna 样品全自动采集装置方法

[实用新型]一种可用于高压富集的装置-CN202021103902.5有效
发明人：杨江华;张效伟 -专利权人： 南京易基诺环保科技有限公司
申请日： 2020-06-15 - 公布日： 2021-02-26 - 主分类号： B01D35/30 文献下载
摘要：本实用新型属于水生态系统样品采集领域，具体涉及一种可用于高压富集的装置。本实用新型包括第一卡接件、第二卡接件和第三卡接件，通过在接口处设置第一卡接件，并将设置有进水口的第二卡接件置于第一卡接件的容置腔中，同时在第二卡接件的下部对应设置有第三卡接件，第三卡接件的下部设置有出水口。本实用新型可用于高压富集过滤，耐高压，可有效提高富集效率，且采用分体式进出水口设计，可用于多管路分体过滤，同时提升了接口的密封性能。
一种用于高压富集装置

[实用新型]一种负压富集装置-CN202021103956.1有效
发明人：杨江华;张效伟;付召军 -专利权人： 南京易基诺环保科技有限公司
申请日： 2020-06-15 - 公布日： 2021-02-19 - 主分类号： C12M1/36 文献下载
摘要：本实用新型属于DNA富集装置技术领域，具体涉及一种负压富集装置。所述装置包括壳体、分别设置在壳体上的负压富集单元和控制单元，所述的负压富集单元包括液体过滤模块、负压水泵和排水口，所述负压水泵分别与液体过滤模块和排水口相连通，所述控制单元控制系统供电和负压水泵的开闭，所述液体过滤模块包括内部安装有滤膜的富集器和连接座，所述富集器可拆卸的安装在连接座上，内部形成密闭腔体管路；所述负压泵与连接座通过管路相连通，本实用新型的集样品采集和富集于一体化的装置，不仅能够连续采样，而且可以显著降低能耗，简化环境样本中的DNA富集过程。
一种富集装置

[实用新型]一种评估低毒性环境样品的原位毒性鉴别评估装置-CN202021104717.8有效
发明人：方文迪;张效伟;杨江华 -专利权人： 南京易基诺环保科技有限公司
申请日： 2020-06-15 - 公布日： 2020-12-25 - 主分类号： G01N33/18 文献下载
摘要：本实用新型具体涉及一种评估低毒性环境样品的原位毒性鉴别评估装置，属于环境毒理学领域。本实用新型包括驱动单元、吸附单元、图像采集单元和回收单元；驱动单元由控制器和驱动泵组成；吸附单元作为装置主体包括养殖杯和吸附存储杯；回收单元包括存储杯和逆流管，主要用于回收各处理组暴露液；图像采集单元用于拍摄分析鱼类行为轨迹变化。本实用新型相比传统原位毒性鉴别评估装置实现集成化，并适用于评估和识别非致死毒性环境水样的致毒物质类型，为地表水管理提供了技术支持。
一种评估毒性环境样品原位鉴别装置

[发明专利]一种水环境DNA样品的采集及常温干燥储存方法-CN202010528875.4在审
发明人：杨江华;张效伟 -专利权人： 南京易基诺环保科技有限公司
申请日： 2020-06-11 - 公布日： 2020-09-08 - 主分类号： C12Q1/24 文献下载
摘要：本发明公开了一种水环境DNA样品的采集及常温干燥储存方法，属于环境检测技术领域。所述的水环境DNA样品的常温干燥储存方法为利用滤膜进行对水体中样品进行采集，采集完成后，在负压吸附的条件下依次利用异丙醇、乙醇对滤膜进行处理，最后将滤膜进一步风干后密封储存，其中，乙醇的用量为异丙醇用量的1.2‑1.5倍。该方法能有效的延长环境样本的储存时间，降低环境水样的储存条件，实现滤膜中环境DNA样品的常温条件下的长期存储，显著降低成本，提高时效，而且不会对后续的DNA监测造成干扰。
一种水环境 dna 样品采集常温干燥储存方法

[发明专利]一种利用环境沉积物样品监测淡水底栖动物的方法-CN202010530165.5在审
发明人：金珂;杨江华;张效伟 -专利权人： 南京易基诺环保科技有限公司
申请日： 2020-06-11 - 公布日： 2020-08-28 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明属于底栖动物鉴定技术领域，公开了一种利用环境沉积物样品监测淡水底栖动物的方法，包括以下步骤：1)首先采集环境沉积物样本，清洗后保存；2)向步骤1)保存的环境沉积物样本中加入无水乙醇进行浸提处理，处理一段时间后取混合均匀的浸提液，将所述浸出液进行真空离心，弃上清液，获得干燥的组织残渣，进行DNA提取；3)利用提取得到的DNA条形码片段进行扩增，得到扩增产物；4)将扩增产物进行测序与分析。本发明的方法将样品首先采用无水乙醇浸提，使底栖动物DNA均匀释放到溶液中，达到均质的状态，通过采集含有DNA样品的乙醇溶液，离心浓缩后进行DNA提取，可实现大范围环境样品的准确监测。
一种利用环境沉积物样品监测水底动物方法

[发明专利]一种两栖动物线粒体通用宏条形码扩增引物及其应用方法-CN202010542347.4在审
发明人：张靖雯;杨江华;张效伟 -专利权人： 南京易基诺环保科技有限公司
申请日： 2020-06-15 - 公布日： 2020-08-18 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明属于基因检测技术领域，公开了一种两栖动物线粒体通用宏条形码扩增引物及其应用方法。所述的扩增引物包括至少一条上游引物和一条下游引物组合的引物对，将Am312‑F1与Am312‑R1组合，Am246‑F2与Am246‑R2组合，Am250‑F3与Am250‑R3.1组合，Am250‑F3与Am305‑R3.2组合，Am250‑F3与Am387‑R3.3组合进行PCR扩增的产物，满足二代测序要求，可用来进行两栖动物物种鉴定和多样性分析；还可通过以上几对引物的灵活组合，以达到两栖动物物种分类、系统进化关系、系统地理学等研究目的。
一种两栖动物线粒体通用条形码扩增引物及其应用方法

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