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[发明专利]一种提高侏儒蛤生长速度的方法-CN202211671071.5有效
发明人：胡晓丽;孔令玲;王晨;连姗姗;王慧贞;张翔超;孔祥福;包振民 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2022-12-25 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明提供了一种提高侏儒蛤生长速度的方法，该方法通过抑制生长抑制素MSTN基因的表达。该方法具体包括下述步骤：筛查侏儒蛤中的MSTN基因，得到MSTN1和MSTN2两个基因的序列；选择RNA干扰片段；设计干扰引物；对MSTN1和MSTN2的RNA干扰片段进行扩增及测序验证；构建RNA干扰质粒：诱导表达dsRNA；通过饲喂法进行侏儒蛤MSTN基因的RNA干扰。本发明验证了侏儒蛤两个MSTN基因均具有抑制肌肉甚至整体生长的作用，并且两个MSTN基因负调控生长的作用是叠加的。因此，可通过抑制双壳贝类MSTN基因获得快速生长的个体，本发明可为速生高产贝类良种的培育提供理论支持。
一种提高侏儒生长速度方法

[发明专利]一种虹彩细胞的石蜡切片方法-CN202310987366.1在审
发明人：胡景杰;汪波;马嘉忆;王梦娅;韦存;吴绍轩;丁晖;李培宇;包振民 -专利权人：中国海洋大学三亚海洋研究院
申请日： 2023-08-07 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：本发明提出了一种虹彩细胞的石蜡切片方法，在取样固定步骤时，选用包括苯酚和甲醛作为组织固定液，所述组织固定液中苯酚的体积浓度为1～2％，甲醛的质量浓度为6～8％。本发明解决了传统固定方式获得的虹彩细胞固定不充分问题，获得了清晰形态的虹彩细胞组织切片，对虹彩细胞种类鉴定及组织学分析有重要意义。
一种虹彩细胞石蜡切片方法

[发明专利]基于CpG寡核苷酸串联分子的对虾免疫增强剂及其应用-CN202311027946.2在审
发明人：王孟强;胡峰;巩学蕊;胡景杰;包振民 -专利权人：中国海洋大学三亚海洋研究院
申请日： 2023-08-16 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： A23K20/153 文献下载
摘要：本发明提供一种基于CpG寡核苷酸串联分子的对虾免疫增强剂及其应用。本发明提供了8种CpG ODNs串联分子，研究结果表明它们在改善对虾肠道菌群结构的同时，显著上调对虾肝胰腺和肠道免疫基因表达，以及增强对虾肝胰腺和肠道抗氧化酶活性，从而增强对虾免疫力。该产品的开发对于降低对虾养殖过程中的病害率，提高经济效益，推动对虾养殖业的发展有重要意义。
基于 cpg 寡核苷酸串联分子对虾免疫增强及其应用

[发明专利]豹纹鳃棘鲈抗神经坏死病毒性状相关的SNP位点及其应用-CN202310760826.7有效
发明人：胡景杰;汪波;王靖雯;韦存;郭一兰;丁晖;王梦娅;吴绍轩;包振民 -专利权人：中国海洋大学三亚海洋研究院
申请日： 2023-06-27 - 公布日： 2023-09-15 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明提供了一种豹纹鳃棘鲈抗神经坏死病毒性状相关的SNP位点及其应用，包括6个SNP位点，各SNP位点前后碱基片段的序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.6所示。本发明提供的SNP分子标记可用于豹纹鳃棘鲈分子标记辅助育种，加快选育抗病豹纹鳃棘鲈品种，为豹纹鳃棘鲈的抗病选育工作提供参考依据。
豹纹鳃棘鲈抗神经坏死病毒性状相关 snp 及其应用

[发明专利]一种豹纹鳃棘鲈的生长相关SNP分子标记及其应用-CN202310960913.7在审
发明人：胡景杰;汪波;吴绍轩;丁晖;王梦娅;王靖雯;郭一兰;包振民 -专利权人：中国海洋大学三亚海洋研究院
申请日： 2023-08-02 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明提供了一种豹纹鳃棘鲈的生长相关SNP分子标记及其应用，包括75个SNP分子标记及一个与生长显著相关的基因型组合，其可用于豹纹鳃棘鲈分子标记辅助育种，加快选育具有优良生长性状的豹纹鳃棘鲈品种，为豹纹鳃棘鲈的选育工作提供参考依据。
一种豹纹鳃棘鲈生长相关 snp 分子标记及其应用

[发明专利]一种双壳贝类生长调控基因的功能验证方法-CN202211669631.3有效
发明人：胡晓丽;孔令玲;连姗姗;王慧贞;张翔超;孔祥福;包振民 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2022-12-25 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供了一种双壳贝类生长调控基因的功能验证方法，该方法基于RNA干扰方法，选用侏儒蛤作为验证贝类。该方法具体验证以L4440质粒为载体，利用大肠杆菌HT115表达侏儒蛤胰岛素样肽基因的双链RNA（dsRNA），通过对体型小、繁殖周期短、可在实验室条件下快速生长的模式贝类侏儒蛤饲喂饵料和细菌表达的dsRNA，检测基因表达抑制后个体的生长性状变化。结果表明，dsRNA有效降低了靶基因的表达水平，导致侏儒蛤出现显著的生长迟缓。本发明明确了适用于生长相关基因功能研究的合适侏儒蛤月龄阶段，并建立了可快速制备大量dsRNA的方法，具有低成本、高效率的优点。
一种贝类生长调控基因功能验证方法

[发明专利]一种东星斑卵原细胞的分离纯化方法及其鉴定和应用-CN202110993847.4有效
发明人：胡景杰;包振民;汪波;吴绍轩;丁晖;王梦娅;王铭翊 -专利权人：中国海洋大学三亚海洋研究院
申请日： 2021-08-27 - 公布日： 2023-08-08 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明提供一种东星斑卵原细胞的分离纯化方法及其鉴定和应用，采用本发明的分离纯化方法，可从卵原细胞占比为10％左右的卵巢细胞悬液中，分离纯化得到占比在85.6～90.3％的卵原细胞；而且该方法对细胞的损伤小，获得的细胞活力高，操作过程，简单方便，所用仪器普遍，易于推广和应用；东星斑卵原细胞的鉴定方法，采用杂交显示技术，使用Nanos2探针标记卵原细胞，可快速识别东星斑卵原细胞；本发明的东星斑卵原细胞的分离纯化方法为东星斑生殖发育研究以及后期借助生殖细胞移植技术应用卵原干细胞来扩增东星斑雄性个体提供了技术保障。
一种东星斑卵原细胞分离纯化方法及其鉴定应用

[发明专利]一种雌雄同体扇贝规模化杂交育种方法-CN202310327627.7在审
发明人：张玲玲;刘甜;位慧兰;张丽靖;王师;邢强;包振民 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2023-03-30 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： A01K61/54 文献下载
摘要：本发明提供一种雌雄同体扇贝的规模化杂交育种方法，是使用激酶抑制剂K252a来调节雌雄同体扇贝的性腺发育，实现作为母本的扇贝的规模化催产，并与父本扇贝的精子自由受精，进而提高扇贝杂交育种的效率和规模。本发明使用激酶抑制剂K252a可以显著抑制雌雄同体扇贝的精巢发育和精子活力，而卵质量不受影响，获得雄性不育或低育的扇贝群体。本发明的方法可有效降低雌雄同体扇贝精卵排放时自体受精，提高雌雄同体扇贝杂交育种的效率，从而规模化制备生长优势显著、成活率高、抗逆性强的杂交扇贝苗种。
一种雌雄同体扇贝规模化杂交育种方法

[发明专利]海洋无脊椎动物CUTTag实验测序数据分析方法-CN202310323911.7在审
发明人：叶质;史佳乐;包振民 -专利权人：中国海洋大学三亚海洋研究院;中国海洋大学
申请日： 2023-03-29 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： G16B30/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种海洋无脊椎动物CUTTag实验测序数据分析方法。本发明通过将高通量测序后的Raw Data进行质量控制，获得高质量的Clean Data，将Clean Data比对到参考基因组获得详细的比对信息，过滤片段长度，保留长度为10‑700bp的片段，评估比对上的片段大小分布，利用文件格式转化来评估重复样品再现性，利用MACS2软件进行Peak Calling，并进行可视化分析。针对杂合率高、重复序列及结构变异多的无脊椎动物基因组(以侏儒蛤和凡纳滨对虾基因组为例)，本发明提供了一整套CUTTag技术的高通量测序分析流程方法，可快速实现大样本量的CUTTag数据分析，促进海洋无脊椎动物表观遗传学领域的发展。
海洋脊椎动物 cuttag 实验序数分析方法

[发明专利]利用CUTTag技术进行海洋无脊椎动物蛋白质与基因组DNA互作研究的实验方法-CN202310295064.8在审
发明人：叶质;史佳乐;包振民 -专利权人：中国海洋大学三亚海洋研究院;中国海洋大学
申请日： 2023-03-24 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明涉及海洋无脊椎动物表观遗传学领域，尤其涉及利用CUTTag技术进行海洋无脊椎动物蛋白质与基因组DNA互作研究的实验方法，以侏儒蛤和凡纳滨对虾胚胎为例，包括以下步骤：S1、催产；S2、受精和培养受精卵；S3、配制试剂；S4、解离单细胞或提取细胞核；S5、细胞或细胞核计数；S6、处理ConA beads；S7、细胞(细胞核)和ConA beads孵育；S8、一抗孵育；S9、二抗孵育；S10、高活性PA/G‑Tn5转座酶孵育；S11、片段化；S12、DNA提取；S13、测序文库的扩增；S14、扩增产物纯化；S15、测序。本发明中，针对侏儒蛤细胞渗透压调整了单细胞解离及CUTTag实验溶液渗透压，针对凡纳滨对虾早期胚胎细胞易破裂、难以解离单细胞特点采用了提取细胞核进行CUTTag实验策略，使CUTTag技术可应用于海洋无脊椎动物，促进海洋无脊椎动物表观遗传学领域的发展，为贝类和虾类的高效生产提供理论依据。
利用 cuttag 技术进行海洋脊椎动物蛋白质基因组 dna 研究实验方法

[发明专利]一种基于ERA技术的传染性皮下及造血组织坏死病毒快速检测方法-CN202211632464.5在审
发明人：王孟强;张璐;胡景杰;包振民;王燕 -专利权人：中国海洋大学三亚海洋研究院;中国海洋大学
申请日： 2022-12-19 - 公布日： 2023-06-02 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供一种基于ERA技术的传染性皮下及造血组织坏死病毒快速检测方法，该方法包括以下步骤：(1)选取传染性皮下及造血坏死病毒的保守区域ORF1区段1936‑2244nt作为检测靶位点，设计合成引物；其中，上游引物的序列如SEQ ID NO:5所示，下游引物的序列如SEQ ID NO:6所示；(2)以待测样品的基因组DNA为模板，采用步骤(1)的引物进行基础型ERA检测或荧光型ERA检测，得到ERA扩增产物；根据ERA扩增产物荧光信号判断检测结果。本发明实验操作简单，耗时短，速度快，可特异性的检测传染性皮下及造血组织坏死病毒，且灵敏度高，灵敏度可达101copies/μL。
一种基于 era 技术传染性皮下造血组织坏死病毒快速检测方法

[发明专利]一种基于ERA技术的基因Ⅰ型和基因Ⅱ型黄头病毒多重快速检测方法及检测用引物和探针-CN202310006461.9在审
发明人：王孟强;张璐;胡景杰;包振民;王燕;刘可欣;邵烁如 -专利权人：中国海洋大学三亚海洋研究院
申请日： 2023-01-04 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供一种基于ERA技术的基因Ⅰ型和基因Ⅱ型黄头病毒多重快速检测方法及检测用引物和探针。本发明以黄头病毒的ORF1b区域作为检测靶基因，设计合成引物和探针，并进行ERA检测即可判断检测结果。本发明方法可以实现两种基因型黄头病毒的多重检测，并且摆脱了对热循环仪的依赖，实验操作步骤简单，耗时短速度快，检测灵敏度较高，灵敏度可达1.0×102copies/μL。
一种基于 era 技术基因型黄头病毒多重快速检测方法引物探针

[发明专利]一种基于ERA技术的虾偷死野田村病毒快速可视化检测方法及检测用引物和探针-CN202211732754.7在审
发明人：王孟强;徐雅进;胡景杰;包振民;王燕;刘可欣;邵烁如 -专利权人：中国海洋大学三亚海洋研究院;中国海洋大学
申请日： 2022-12-30 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提出了一种基于ERA技术的虾偷死野田村病毒快速可视化检测方法及检测用引物和探针，本发明提供基于ERA技术的虾偷死野田村病毒检测用引物和探针，基于ERA技术的虾偷死野田村病毒快速可视化检测方法，本发明采用的虾偷死野田村病毒的ERA检测方法，摆脱了PCR过程中对热循环仪的依赖，实验操作步骤简单，耗时短速度快，检测灵敏度高，且结果可视化。
一种基于 era 技术虾偷死野田村病毒快速可视化检测方法引物探针

[实用新型]一种鱼道式鱼类表型性状的图像无损采集设备-CN202222962866.3有效
发明人：刘梦然;包振民;胡景杰;汪波;豆江灵 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2022-11-08 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： G01N21/84 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种鱼类表型性状的图像采集设备，特别是一种鱼道式鱼类表型性状的图像无损采集设备，包括：工作流体管路、泵一、引射流体管路、环形射流管路、出口管路和鱼类表型性状图像获取装置；环形射流管路的一侧管口密封套接至引射流体管路的单侧管口外，并在引射流体管路的该管口的外周形成环形喷嘴，进而在该管口的前端形成吸入室；环形射流管路的另一侧管口与鱼类表型性状图像获取装置的进口相密封对接；工作流体管路的单侧管口连接至环形射流管路的管壁上，且与环形喷嘴相贯通；泵一串连接至工作流体管路上。其解决了“鱼类表型性状的图像实现高效无损采集”的技术问题，具备无损、快速、高频率的实现鱼类表型性状的图像采集的特点。
一种鱼道鱼类表型性状图像无损采集设备

[发明专利]基于ERA技术的对虾传染性肌肉坏死病毒的检测方法-CN202211704566.3在审
发明人：王孟强;周清倩;胡景杰;包振民;王燕;刘可欣;邵烁如 -专利权人：中国海洋大学三亚海洋研究院
申请日： 2022-12-29 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供一种基于ERA技术的对虾传染性肌肉坏死病毒的检测方法。本发明选取对虾传染性肌肉坏死病毒基因中MCP序列作为检测靶基因，针对靶基因设计合成ERA检测专用引物和探针，建立用于对虾传染性肌肉坏死病毒的ERA检测方法。本发明方法反应温度固定、操作程序简单、扩增速度快、检测效率高，且灵敏性和特异性良好，适用于IMNV的快速检测。
基于 era 技术对虾传染性肌肉坏死病毒检测方法

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