本发明公开了乳铁蛋白活性肽及其应用。本申请的第一方面,提供乳铁蛋白活性肽,该乳铁蛋白活性肽的氨基酸序列为SEQ ID No.1~3中任一种,或为SEQ ID No.1~3中任一种所示的氨基酸序列经修饰、取代、缺失或添加至少一个氨基酸获得氨基酸序列。根据本申请实施例的乳铁蛋白活性肽,至少具有如下有益效果:本申请实施例通过对蛋白酶消化的乳铁蛋白的分离、表征、稳定性鉴定以及对癌细胞特异性和细胞毒性研究,发现了具有良好稳定性和抗癌活性的乳铁蛋白活性肽。这些乳铁蛋白活性肽与全长乳铁蛋白(flHLF)相比,对人类癌症细胞系的抗癌活性有了明显提高。