本发明实施例公开了一种同时检测鸡蛋中多种多肽类药物的方法,其包括以下步骤:通过甲醇、乙腈和甲酸水的混合液与鸡蛋样品混匀,离心获得含有待测物的上清液,将所述含有待测物的上清液过Qasis PRiME HLB固相萃取柱净化,收集液体,干燥复溶后,过滤后的滤液,再经液相色谱质谱联用检测滤液中待测物的种类及含量。在本发明实施例中,检测样品采用甲醇、乙腈和1%甲酸水混合溶液作为提取剂进行提取,有效沉淀蛋白质、释放结合的残留物及提取目标药物。然后使用Qasis PRiME HLB固相萃取柱,通过式净化处理,去除脂肪和磷脂。该提取方法具有更高的提取效率,前处理时间更短,具有较好的净化效果和较高的回收率。