本发明提供一种诊断布鲁氏菌疫苗免疫与自然感染的三重荧光定量PCR检测试剂盒及其检测方法。所述试剂盒含有SEQ ID No.1～SEQ ID No.6所示的引物及SEQ ID No.7～SE Q ID No.9所示的TaqMan探针。本发明的方法能特异性区分疫苗免疫病原核酸和自然感染病原核酸，同时具有灵敏度高、特异性强、操作便捷等优点，适合对背景清楚的临床样本(鼻/肛拭子、牛奶、可能污染的饲料或饲草等)直接检测，重点用于免疫净化场临床样品的监测，为布鲁氏菌病准确诊断和及时防控提供技术支持。
本发明公开了一种小反刍兽疫病毒F蛋白(PPRV‑F)纳米抗体和纳米抗体的制备、纯化及中和试验方法，其中，所述的PPRV‑F纳米抗体包含SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。通过本发明提供的纳米抗体的制备及纯化方法，可以得到中和效价达到1:20的PPRV‑F纳米抗体。本发明制备的纳米抗体可用于小反刍兽疫的治疗、预防及PPRV的检测。
