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[发明专利]一种延长人来源中性粒细胞体外培养存活时间的方法-CN202310960456.1在审
发明人：柴鑫雨;王婷婷;于超 -专利权人：重庆医科大学
申请日： 2023-07-31 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N5/0787 文献下载
摘要：本发明提供了一种延长人来源中性粒细胞体外培养存活时间的方法，涉及免疫学、分子生物学等技术领域。所述延长人来源中性粒细胞体外培养存活时间的方法包括：1)中性粒细胞的分离纯化；2)细胞因子的选择；3)中性粒细胞活力的验证。本发明得到了高纯度的中性粒细胞，并且成功延长中性粒细胞在体外的存活时间，对中性粒细胞的生物学研究及其临床应用等方面都具有重要的临床意义。
一种延长来源中性粒细胞体外培养存活时间方法

[发明专利]胸腺嘧啶核苷诱导成纤维细胞转分化在中性粒细胞减少症治疗中的应用-CN201910603779.9有效
发明人：范祖森;叶步青;杨柳柳;刘本宇;李慧目;杜颖;刘念;王彦英 -专利权人：中国科学院生物物理研究所
申请日： 2019-07-05 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N5/0787 文献下载
摘要：本发明提供胸腺嘧啶核苷(胸苷，Thymidine)或其前体或衍生物在诱导成纤维细胞转分化为粒细胞中的应用。本发明还提供通过本发明获得的粒细胞在治疗(中性)粒细胞减少症中的应用。
胸腺嘧啶核苷诱导纤维细胞分化中性粒细胞减少治疗中的应用

[发明专利]一种提高肥大细胞外泌体及其膜表面FcεRI的表达量的方法及其应用-CN202210452521.5有效
发明人：廖雯静;王义琰;宋丽娟;陈桂;张春意;张孝文 -专利权人：广州医科大学附属第一医院（广州呼吸中心）
申请日： 2022-04-27 - 公布日： 2023-09-26 - 主分类号： C12N5/0787 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高肥大细胞外泌体及其膜表面FcεRI的表达量的方法及其应用，涉及生物细胞技术领域。本发明提供了一种提高肥大细胞外泌体及其膜表面FcεRI的表达量的方法，包括以下步骤：(1)在培养皿中接种肥大细胞，并置于37℃、5％CO2的完全培养基中培养，当细胞密度达到75～85％后更换培养基；(2)将步骤(1)的细胞置于29～41℃的温度下培养；(3)收集步骤(2)的细胞上清进行梯度离心提取外泌体。本发明通过改变温度刺激肥大细胞，能够有效提高肥大细胞外泌体及其膜表面FcεRI的表达量；本发明采用温度刺激肥大细胞，实验条件容易实现，操作简单，适合外泌体的大量提取。
一种提高肥大细胞外泌体及其表面 fc ri 表达方法应用

[发明专利]将白细胞分类为亚集团的方法-CN202310190820.0在审
发明人：鸟家雄二 -专利权人：希森美康株式会社
申请日： 2023-02-23 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12N5/0787 文献下载
摘要：本发明旨在提供在将白细胞分类为亚集团的方法中，即使使用自采集起经过时间的受试体时，也可高精度地对嗜碱性粒细胞进行分类及计数的方法。本发明由如下方法解决所述的课题，其包括：通过将含白细胞的受试体，含表面活性剂的溶血试剂，第1荧光染料和第2荧光染料混合而调制测定试样，向测定试样中的粒子照射光，检测含基于自第1荧光染料的荧光的第1荧光信息，基于自第2荧光染料的荧光的第2荧光信息和散射光信息的光学信息，基于含第1荧光信息的光学信息而从测定试样中的粒子中筛选含嗜碱性粒细胞的细胞集团，基于第2荧光信息及散射光信息而将细胞集团中所含的白细胞分类为亚集团，亚集团之中，对分类为嗜碱性粒细胞的集团的细胞进行计数的方法，第2荧光染料是在与第1荧光染料不同的波长区域具有极大吸收的荧光染料。
白细胞分类集团方法

[发明专利]地塞米松诱导中性粒细胞产生的细胞外囊泡在制备治疗消炎药物中的应用-CN202210548483.3有效
发明人：黄振;肖琳;崔芷莹;陈江宁;张峻峰 -专利权人：南京大学
申请日： 2022-05-20 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12N5/0787 文献下载
摘要：本发明公开了地塞米松在诱导中性粒细胞产生细胞外囊泡中的应用。还公开了地塞米松诱导中性粒细胞产生的细胞外囊泡在制备治疗消炎药物中的应用。地塞米松的刺激会使中性粒细胞内的抗炎因子IL‑10和TGF‑β的表达水平显著上调；且中线粒细胞经地塞米松刺激后，囊泡制备产率较未处理中性粒细胞组至少提升10倍。可见，地塞米松具有促进中线粒细胞分泌囊泡的作用，且地塞米松刺激中性粒细胞产生的囊泡，不但IL‑10和TGF‑β含量显著提升，而且具有更好的血管内皮黏附能力和抗炎活性，有望发展成为一种新型的生物治疗技术，可用于临床难治性炎性相关疾病的治疗。
地塞米松诱导中性粒细胞产生细胞外囊泡制备治疗消炎药物中的应用

[发明专利]一种结石类疾病体外模型及动物模型的构建方法-CN202310538215.8在审
发明人：牛丽娜;焦凯;万美辰;朱轶娜;任朝阳;万千千 -专利权人：中国人民解放军空军军医大学
申请日： 2023-05-12 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N5/0787 文献下载
摘要：本发明公开了一种结石类疾病体外和动物模型的构建方法。所公开的方法包括：将NETs释放物或中性粒细胞和NETs释放物体系在矿化液中孵育后得到结石类疾病体外模型。所述动物模型是利用PADI4基因敲除动物构建的模型。本发明通过模拟结石类疾病发生的感染微环境，关注了宿主免疫与感染微生物之间的相互调控在结石的生物矿化过程中的作用。本发明的构建方法不需要特殊设备，无复杂操作，可大幅降低研究成本，可用于高通量研究。
一种结石疾病体外模型动物构建方法

[发明专利]一种修复型中性粒细胞的分类、诱导活化方法及其用途-CN202310334438.2有效
发明人：张学慧;游富平;邓旭亮;郑晓娜;郭亚茹 -专利权人：北京大学口腔医学院
申请日： 2023-03-31 - 公布日： 2023-06-20 - 主分类号： C12N5/0787 文献下载
摘要：本发明公开一种修复型中性粒细胞的诱导、分类方法及其用途。其中修复型中性粒细胞为CD45+Ly6G+CD54+CD274+GLUT1+经物理电刺激诱导的细胞亚群，该修复型免疫细胞亚群经物理电刺激的诱导后能够发挥促进组织修复功能。此外，本发明的修复型中性粒细胞制备工艺简单，操作简便，可以实现批量生产及临床上的推广应用。
一种修复中性粒细胞分类诱导活化方法及其用途

[发明专利]EBD多肽修饰外泌体、其制备方法及缓释水凝胶和用途-CN202211599853.2在审
发明人：孙炳伟;于延珍 -专利权人：苏州市立医院（北区）
申请日： 2022-12-14 - 公布日： 2023-06-13 - 主分类号： C12N5/0787 文献下载
摘要：本申请涉及一种EBD多肽修饰外泌体、其制备方法及缓释水凝胶和用途，该EBD多肽修饰外泌体包括中性粒细胞外泌体，所述中性粒细胞外泌体的膜表面上修饰有EBD多肽。本申请能实现细胞外基质对于外泌体的缓释，加快糖尿病创面的血管化、胶原沉积和重塑和创面的再上皮化，共同促进创面的快速愈合和创面中皮肤附属器类结构的再生。
ebd 多肽修饰外泌体制备方法缓释水凝胶用途

[发明专利]一种促进血管生成的中性粒细胞及其制备方法和应用-CN202310351823.8在审
发明人：张学慧;邓旭亮;游富平;郑晓娜;郭亚茹;崔群;孙晓雯 -专利权人：北京大学口腔医学院
申请日： 2023-04-04 - 公布日： 2023-06-02 - 主分类号： C12N5/0787 文献下载
摘要：本发明公开一种促进血管生成的中性粒细胞及其制备方法和应用，其中中性粒细胞为CD45+Ly6G+CD54+CD274+GLUT1+，且经物理电刺激诱导后的细胞亚群，其在物理电刺激诱导后具有优异的免疫调控作用、成血管功能。本发明通过实验证明了该中性粒细胞亚群在组织损伤修复过程中具有良好的促进血管化的作用，可用于组织修复治疗。
一种促进血管生成中性粒细胞及其制备方法应用

[发明专利]一种促进骨形成的中性粒细胞、组合物及其用途-CN202310352495.3在审
发明人：邓旭亮;张学慧;游富平;郑晓娜;郭亚茹 -专利权人：北京大学口腔医学院
申请日： 2023-04-04 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： C12N5/0787 文献下载
摘要：本发明公开一种促进骨形成的中性粒细胞亚型、组合物及其用途，其中中性粒细胞为CD45+Ly6G+CD54+CD274+GLUT1+，且经物理电刺激诱导的细胞亚群，本发明的中性粒细胞亚群在物理电刺激诱导后具有优异的免疫调控作用、促成血管功能以及促进骨再生功能。本发明提供了一种具有免疫调控作用、促成血管以及促骨再生效果优异的中性粒细胞亚群，本发明通过实验证明了该中性粒细胞亚群在组织损伤修复中具有良好的促进血管化以及骨形成的作用，可用于临床修复受损组织。
一种促进形成中性粒细胞组合及其用途

[发明专利]血液中中性粒细胞的分离方法和分离试剂盒-CN202110322415.0有效
发明人：沈怡;凡小丽;沈梦益;黄晨;杨丽 -专利权人：四川大学华西医院
申请日： 2021-03-25 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12N5/0787 文献下载
摘要：本发明涉及血液中中性粒细胞的分离方法和分离试剂盒，属于中性粒细胞分离技术领域。本发明提供了血液中中性粒细胞的分离方法，包括如下步骤：将中性粒细胞分离液、淋巴细胞分离液、全血依次加入离心管，使淋巴细胞分离液位于中性粒细胞分离液上方，全血位于淋巴细胞分离液上方，然后离心，即可分离得到中性粒细胞。本发明还提供了血液中中性粒细胞的分离试剂盒，含有分别独立包装的中性粒细胞分离液和淋巴细胞分离液。采用本发明分离方法或分离试剂盒，通过一次离心即可快速获得纯度为80％左右的中性粒细胞，而且可以实现一次离心同时分离中性粒细胞和红细胞，具有很好的实用价值。
血液中性粒细胞分离方法试剂盒

[发明专利]一种分离蜕膜低密度中性粒细胞及正常密度中性粒细胞的方法-CN202210465994.9有效
发明人：叶红霞;斯海波;贾研;东亚君;黄燕;李莉;汪雪梅 -专利权人：成都市锦江区妇幼保健院
申请日： 2022-04-26 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12N5/0787 文献下载
摘要：本发明公开了一种分离蜕膜低密度中性粒细胞及正常密度中性粒细胞的方法，首先设计一系列不同浓度梯度的percoll悬液初步将正常密度中性粒细胞及低密度中性粒细胞分离开后，再结合磁珠分选以达到纯化正常密度中性粒细胞和低密度中性粒细胞目的，本发明首次在蜕膜组织中进行不同密度中性粒细胞的分离，快速将蜕膜中的低密度中性粒细胞和正常密度中性粒细胞进行分离纯化，便于研究不同亚群中性粒细胞在早期胚胎发育中的作用。
一种分离蜕膜低密度中性粒细胞正常方法

[发明专利]一种中性粒细胞体外扩增培养基-CN202211672516.1在审
发明人：崔思远 -专利权人：无锡市第二人民医院
申请日： 2022-12-26 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C12N5/0787 文献下载
摘要：本发明提供一种中性粒细胞体外扩增培养基，涉及细胞体外培养领域。所述体外扩增培养基以RPMI1640为基础培养基，根据不同培养阶段向所述基础培养基中加入SCF、G‑CSF、Flt‑3L、IFN‑α和Q‑VD‑OPH中的一种或几种的组合；所述RPMI1640培养基中含有体积分数为10％的胎牛血清。本发明提供的培养基能够实现中性粒细胞的有效离体扩增，并且延长中性粒细胞体外环境下的存活期。
一种中性粒细胞体外扩增培养基

[发明专利]一种冷冻休克中性粒细胞及其制备方法-CN202211145358.4在审
发明人：廖玉辉;李斌;高秋霞;单智焱;赵露;雷洪伊;王伟 -专利权人：南方医科大学皮肤病医院（广东省皮肤病医院、广东省皮肤性病防治中心、中国麻风防治研究中心）;佛山市第一人民医院（中山大学附属佛山医院）;深圳市龙岗中心医院
申请日： 2022-09-20 - 公布日： 2023-01-24 - 主分类号： C12N5/0787 文献下载
摘要：本发明专利公开了一种冷冻休克中性粒细胞及其制备方法，其制备方法包括如下步骤：S1取新鲜EDTA‑K2抗凝血，以保证细胞的最优状态；S2用中性粒细胞提取试剂盒分离获得中性粒细胞。本发明制备的冷冻休克中性粒细胞制备流程是通过大量条件摸索获得，相比于向中性粒细胞中添加冻存液后立即进行液氮冻死（这种方式对细胞的损伤很大，使冷冻后的中性粒细胞脆性增加，易破碎），在本发明中，添加冻存液后，先在‑80℃降温15‑25 min后再进行液氮冻死，在保证细胞死亡的前提下通过减少细胞冷冻过程中的冰晶形成进而减少对细胞器、细胞膜的损伤，以得到细胞结构更完整的细胞，其膜受体吸附功能也得到保留。
一种冷冻休克中性粒细胞及其制备方法

[发明专利]无外源因子添加的集落培养基及其制备方法与应用-CN202211319999.7在审
发明人：张剑慧;刘东;崔光晶;盛凯;王肇光;任曼莉;董雪;李家梁;任光强 -专利权人：银丰生物工程集团有限公司
申请日： 2022-10-26 - 公布日： 2022-12-09 - 主分类号： C12N5/0787 文献下载
摘要：本发明公开了一种无外源因子添加的集落培养基，是由IMDM培养基、甲基纤维素、脐血浆浓缩液、脐带间充质外泌体和添加物组成的；其中，脐血浆浓缩液的添加量为20％～40％；脐带间充质干细胞外泌体的添加量为0.5～5μg/ml。本发明还公开了其制备方法；将甲基纤维素母液、IMDM培养基母液、脐血浆浓缩液混合，加入脐带间充质干细胞外泌体、添加物，混匀即得。所述无外源因子添加的集落培养基在培养细胞中的应用，在诱导单核细胞、粒细胞、红系细胞集落生长中的应用。本发明的无外源因子添加的集落培养基，采用脐血浆与外泌体替代了细胞因子，集落生成诱导效果明显，无需额外添加细胞因子，成本大大降低。
无外源因子添加集落培养基及其制备方法应用

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