[发明专利]一种利用产生不同短链脂肪酸的菌株改善溃疡性结肠炎的方法在审
| 申请号： | 202211246638.4 | 申请日： | 2022-10-12 |
| 公开（公告）号： | CN115569153A | 公开（公告）日： | 2023-01-06 |
| 发明（设计）人： | 孟祥晨;杨硕;尚佳萃;段勃帆;唐宗馨 | 申请（专利权）人： | 东北农业大学 |
| 主分类号： | A61K35/745 | 分类号： | A61K35/745;A61K35/74;A61K35/742;A61K31/19;A61P1/00;A61P1/04;A61P29/00;A61K49/00;C12N1/20;C12R1/01;C12R1/145 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 150030 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 产生 不同 脂肪酸 菌株 改善 溃疡性 结肠炎 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种利用产生不同短链脂肪酸的菌株改善溃疡性结肠炎的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)菌株的培养：双歧杆菌H3-R2在补充有0.05％L-半胱氨酸盐酸盐的DeMan,Rogosa and Sharpe(mMRS)培养基中于37℃下培养16小时，将费氏丙酸杆菌B1在葡萄糖培养基中于30℃下培养24小时，丁酸梭菌C1-6在强化梭菌培养基(RCM)中于37℃培养12小时。实验前进行两次传代培养。所有菌株用PBS洗涤两次，并通过PBS再悬浮调节至109CFU/mL，用于随后的体内实验。(2)利用DSS诱导的小鼠模型评估受试菌株对UC的作用效果：使用雄性8周龄的无特定病原体(SPF)C57BL/6J小鼠，饲养温度23±3℃、湿度55±10％和12h交替光照。将48只小鼠适应喂养1周后随机分为6组：正常对照组(NC)、DSS组(DSS)、阳性对照组(PC)、双歧杆菌H3-R2组(BB)、费氏丙酸杆菌B1组(PF)和丁酸梭菌C1-6组(CB)。对不同组小鼠脾脏指数、疾病活动指数(DAI)、结肠组织状态、结肠组织髓过氧化物酶(MPO)活力、结肠中细胞因子水平、紧密连接蛋白以及炎症相关基因表达、通路蛋白表达、小鼠肠道菌群、粪便中短链脂肪酸(SCFA)进行测定，并进行统计分析。
2.根据权利要求1所述的利用产生不同短链脂肪酸的菌株改善溃疡性结肠炎的方法，其特征在于，所述的两歧双歧杆菌H3-R2、费氏丙酸杆菌B1和丁酸梭菌C1-6由实验室自行分离，保藏于东北农业大学乳品科学教育部重点实验室。
3.根据权利要求1所述的利用产生不同短链脂肪酸的菌株改善溃疡性结肠炎的方法，其特征在于，所述的小鼠脾脏指数、疾病活动指数(DAI)和结肠组织状态为：两歧双歧杆菌H3-R2、费氏丙酸杆菌B1和丁酸梭菌C1-6的使用可显著缓解小鼠由于DSS刺激引起的小鼠脾脏肿大，可显著降低疾病活动指数(DAI)。这三株菌的使用能有效缓解DSS引起的结肠炎症状，使结肠形态恢复，炎症细胞浸润减少，隐窝移位改善，杯状细胞富集。但费氏丙酸杆菌B1和丁酸梭菌C1-6在一定程度上恢复形态和隐窝深度的效果优于两歧双歧杆菌H3-R2。
4.根据权利要求1所述的利用产生不同短链脂肪酸的菌株改善溃疡性结肠炎的方法，其特征在于，所述的结肠组织髓过氧化物酶(MPO)活力和细胞因子水平为：两歧双歧杆菌H3-R2、费氏丙酸杆菌B1和丁酸梭菌C1-6的使用可显著降低DSS导致的小鼠结肠中MPO活力的升高。可使促炎因子IL-8、IL-1β和TNF-α的含量降低，抗炎因子IL-10显著升高。表明其可以通过调节炎症因子来缓解DSS诱导的小鼠结肠炎。
5.根据权利要求1所述的利用产生不同短链脂肪酸的菌株改善溃疡性结肠炎的方法，其特征在于，所述的紧密连接蛋白以及炎症相关基因表达为：两歧双歧杆菌H3-R2、费氏丙酸杆菌B1和丁酸梭菌C1-6的使用可增加结肠紧密连接蛋白表达(ZO-1，Occludin和Claudin-1)，改善肠道屏障功能。三种蛋白表达的综合结果表明，费氏丙酸杆菌B1和丁酸梭菌C1-6在保护肠道屏障方面比两歧双歧杆菌H3-R2更有效。这三株菌的使用可使TLR-2和TLR-4表达均显著降低，TLR-5表达显著升高，LGR5和Rspo3的mRNA水平均增加。费氏丙酸杆菌B1组表现出最显著的效果，表明它可能具有更大的缓解结肠炎的潜力。
6.根据权利要求1所述的利用产生不同短链脂肪酸的菌株改善溃疡性结肠炎的方法，其特征在于，所述的通路蛋白表达为：两歧双歧杆菌H3-R2、费氏丙酸杆菌B1和丁酸梭菌C1-6的使用均能下调ROCK-1和Axin2的过表达，但仅费氏丙酸杆菌B1组和两歧双歧杆菌H3-R2组与DSS组相比有显著差异(P0.05)，说明这两株菌通过ROCK-1途径调节炎症，并通过Wnt/β-catenin途径刺激受损肠上皮细胞的再生。
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- 2020-11-26 - 2023-06-06 - A61K35/745
- 本发明提供了用于调节睡眠的乳双歧杆菌BL‑99及其应用。本发明首先提供了乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)BL‑99在制备具有调节睡眠功效的组合物中的应用，所述乳双歧杆菌的保藏编号为CGMCC No.15650。本发明研究发现，该乳双歧杆菌菌株发酵乳液具有调节睡眠等方向的应用，可广泛应用于食品、医药、饲料、化工等领域。
- 两歧双歧杆菌NX-7在制备治疗或预防糖尿病药物中的应用-202310426458.2
- 郑康帝;陈涛;张召;刘彦 - 广东南芯医疗科技有限公司;广东一元兰欣生物科技有限公司
- 2023-04-20 - 2023-06-06 - A61K35/745
- 本发明公开了两歧双歧杆菌NX‑7在制备治疗或预防糖尿病药物中的应用，属于微生物技术领域。本发明公开的两歧双歧杆菌NX‑7在制备治疗或预防糖尿病药物中的应用，两歧双歧杆菌NX‑7在体外具有较强的抑制α‑葡萄糖苷酶的作用，在体内能显著降低斑马鱼高血糖模型体内葡萄糖含量，具备应用于体内调节血糖水平的潜能，此为利用两歧双歧杆菌NX‑7开发预防或治疗糖尿病的益生菌制剂提供理论参考和指导依据。
- 脑功能改善剂-202211147852.4
- 小林洋大;久原徹哉;清水金忠;佐藤拓海 - 森永乳业株式会社
- 2017-05-31 - 2023-06-02 - A61K35/745
- 本发明提供新的脑功能改善剂。本发明提供以短双歧杆菌和/或包含短双歧杆菌的培养物作为有效成分的脑功能改善剂。
- 包含绿原酸的药物组合物在制备治疗病理性黄疸的药物中的用途-202110109946.1
- 张洁;陈晓光;黄望;黄羽佳 - 四川九章生物科技有限公司
- 2021-01-27 - 2023-06-02 - A61K35/745
- 本发明提供了一种包含绿原酸的药物组合物在制备治疗病理性黄疸的药物中的用途，属于生物医药领域。在本发明的药物组合物中采用绿原酸作为主要活性成分，并且采用双歧杆菌和母乳低聚糖作为辅助成分，后者能够有效增强绿原酸治疗病理性黄疸的疗效，从而降低其用量。本发明药物组合物能够有效降低血液中总胆红素和间接胆红素的含量，为病理性黄疸，尤其是溶血性黄疸的药物治疗提供了新的手段和选择。
- 动物双歧杆菌的应用-202310277265.5
- 李悦;韩雪杰;张云;徐铭璐 - 哈尔滨医科大学
- 2023-03-21 - 2023-05-30 - A61K35/745
- 本发明涉及双歧杆菌领域，公开了动物双歧杆菌或包含动物双歧杆菌的食品、药物用于预防和/或治疗房颤的应用。本发明填补了现有技术防治妊娠期寒冷暴露所致子代房颤的空白，创新性的提出动物双歧杆菌用于防治妊娠期寒冷暴露所致的子代房颤的具体应用。
- 专利分类
