[发明专利]一种利用生物合成法制备曲酸的方法

权利要求书

1.一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1：选取菌种：选取产曲酸曲霉作为制备曲酸的菌种；

S2：配置种子培养基：碳源200-400g、氮源10-40g、KH₂PO₄5-15g、MgSO₄.7H₂O1-10g、KCl1-10g、FeSO₄0.1-0.5g和水10000mL，配置完毕后以待备用；

S3：配置发酵培养基：碳源800-1200g、氮源30-80g、KH₂PO₄ 10-30g、MgSO₄.7H₂O1-10g、KCl 1-5g和水10000mL，配置完毕后以待备用；

S4：灭菌培养：将S2步骤所配置的种子培养基装入发酵罐A内部，进行灭菌处理，处理完后，降温冷却备用，将S1步骤中所选取的产曲酸曲霉接入装有种子培养基的发酵罐A的内部进行培养，将发酵罐A搅拌装置开启，罐压为0.05-0.1MPa，通风量0.8-1.5vvm，发酵温度为28-33℃培养一段时间，备用；

S5：发酵培养：将部分S3步骤所配置的发酵培养基装入发酵罐B内部，并将S4步骤所培养完毕的产曲酸曲霉转接入装有发酵培养基的发酵罐B的内部进行发酵培养，后，将发酵罐B搅拌装置开启，培养一段时间，备用；

S6：发酵液提取：将S5步骤中的发酵罐B内部的发酵溶液进行过滤处理，然后再进行膜分离处理和离心分离处理，从而提取发酵液，并将发酵液装入发酵罐C中；

S7：曲酸检测：取S6步骤中的发酵罐C内部发酵液，加入FeCl₂·HCl溶液进行曲酸检测。

2.根据权利要求1所述的一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：所述S1步骤中所选取的产曲酸曲霉菌种为不产生黄曲霉毒素菌种。

3.根据权利要求1所述的一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：所述S2步骤配置种子培养基和S3步骤配置发酵培养基中所采用的碳源为玉米粉、玉米淀粉、蔗糖和葡萄糖中的一种。

4.根据权利要求1所述的一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：所述S2步骤配置种子培养基和S3步骤配置发酵培养基中所采用的氮源为NH₄NO₃、(NH4)₂SO₄、豆饼粉和蛋白陈中的一种。

5.根据权利要求1所述的一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：所述S4步骤发酵罐A在开启搅拌进行搅拌培养时搅拌装置的转速为100-200r/min，培养的温度为30-40℃，培养的时间为24h。

6.根据权利要求1所述的一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：所述S5步骤发酵罐B在开启搅拌进行搅拌培养时搅拌装置的转速为50-100r/min，培养的温度为25-35℃，培养的时间为120h。

7.根据权利要求1所述的一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：所述S5发酵培养在进行时需要在无菌空间内进行，并且在进行发酵培养前需要进行灭菌处理，且灭菌磁力要进行空消和实消两步，其中空消是在投料前，对各种设备用蒸气进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系统处于无菌状态，而实消是当发酵罐B加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌。

8.根据权利要求1所述的一种利用生物合成法制备曲酸的方法，其特征在于：所述S2步骤中所配置的种子培养基的PH为6.8-7.5，所述S3步骤中所配置的发酵培养基的PH为3.8-4.2。