[发明专利]一种分泌胰岛素单克隆抗体杂交瘤细胞株及其单克隆抗体与应用

权利要求书

1.一种杂交瘤细胞株，其特征在于，包括保藏编号为GDMCC NO：62021的杂交瘤细胞株Mab0329.11-G9-A5、保藏编号为GDMCC NO：62085的杂交瘤细胞株Mab0329.11-G9-B7。

2.一种单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体由如权利要求1所述的杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体，所述单克隆抗体特异性识别胰岛素。

3.如权利要求2所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体可以识别胰岛素片段，所述胰岛素片段的氨基酸序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3所示。

4.一种如权利要求1所述的杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

采用胰岛素多肽偶联蛋白免疫小鼠，获得免疫后的小鼠；

提取所述免疫后的小鼠的脾脏细胞，并与小鼠骨髓瘤细胞融合，筛选，得到杂交瘤细胞株。

更优选地，所述筛选的步骤包括：采用胰岛素多肽并按照ELISA方法对融合的细胞进行筛选，得到所述杂交瘤细胞株，其中所述胰岛素多肽包括第一片段及第二片段中的至少一个，第一片段含有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸系列，第二片段含有如SEQ ID NO:3所示的氨基酸系列。

5.一种如权利要求2所述的单克隆抗体的制备方法，将如权利要求1所述的杂交瘤细胞株接种至小鼠腹腔，采集腹水后，经纯化获得单克隆抗体。

6.如权利要求1所述的杂交瘤细胞株、或者权利要求2-3任一项所述的单克隆抗体、或者如权利要求4所述杂交瘤细胞株的制备方法制备的杂交瘤细胞株在制备胰岛素体外免疫检测试剂或试剂盒中的应用。

7.一种免疫检测试剂，其特征在于，包括如权利要求2所述的单克隆抗体。

8.一种胰岛素检测试剂盒，其特征在于，包括如权利要求2所述的单克隆抗体。

9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括标准品、检测抗体和发光标记物，优选地，所述发光标记物包括吖啶衍生物标记和/或辣根过氧化物酶标记。

10.如权利要求1所述的杂交瘤细胞株或如权利要求2所述的单克隆抗体在检测胰岛素含量变化或诊断以胰岛素异常表达的试剂中的应用。