[发明专利]一种比阿培南中亚硝胺类杂质的检测方法

说明书

本申请属于药物分析技术领域。本申请提供了一种比阿培南中亚硝胺类杂质的检测方法，包括：取供试品加入内标物的甲醇溶液溶解，再加入混合溶剂混合均匀，得到样品溶液；将样品溶液和对照品溶液分别注入液相色谱串联质谱联用仪，按内标法检测亚硝胺类杂质的含量；其中，混合溶剂的组成包括甲醇、甲酸和水。本申请根据亚硝胺类化合物特点进行方法开发，能够有效降低基质效应的影响，避免待测物被抑制。本申请的检测方法从专属性、线性及范围、检测限、定量限、准确度、和稳定性等方面进行验证，确认该方法适用于同时测定比阿培南中NDEA、EIPNA、DIPNA的含量。

技术领域

本申请属于药物分析技术领域，尤其涉及一种比阿培南中亚硝胺类杂质的检测方法。

背景技术

比阿培南是一种碳青霉烯类合成抗生素，在生产过程中会产生亚硝胺类副产物，如N-亚硝基二乙胺、N-亚硝基乙基异丙胺和N-亚硝基二异丙胺。亚硝胺是强致癌物，不但长期小剂量可以使动物或人致癌，而且只要一次较高剂量的“冲击”就可引起癌症发生。

目前，亚硝胺类杂质的检测方法主要为气相色谱热能分析法、分光光度法、气质法以及液质法，然而现有的检测方法中缺少针对N-亚硝基乙基异丙胺和N-亚硝基二异丙胺的检测方法。同时，比阿培南中亚硝胺类杂质的限度（0.022ppm）极低，对检测灵敏度的要求高，现有的检测方法难以在比阿培南中实现亚硝胺类杂质定量监控的要求。

发明内容

有鉴于此，本申请提供了一种比阿培南中亚硝胺类杂质的检测方法，可实现N-亚硝基二乙胺、N-亚硝基乙基异丙胺和N-亚硝基二异丙胺的同步测定，且具有优异的灵敏度。

本申请的具体技术方案如下：

一种比阿培南中亚硝胺类杂质的检测方法，其特征在于， 包括如下步骤：

S1：取供试品加入内标物的甲醇溶液溶解，再加入混合溶剂混合均匀，得到样品溶液；

S2：将所述样品溶液和对照品溶液分别注入液相色谱串联质谱联用仪，按内标法检测亚硝胺类杂质的含量；

其中，所述混合溶剂的组成包括甲醇、甲酸和水。

优选地，所述甲醇溶液中甲醇的含量为50~80%。

优选地，所述混合溶剂中，甲酸、甲醇和水的体积比为5:10:85。

优选地，所述内标物在所述甲醇溶液中的浓度为30~60ng/ml。

优选地，所述甲醇溶液与所述混合溶剂的体积比为1:20~30。

优选地，所述样品溶液中供试品的浓度为40~80mg/ml，所述对照品溶液的浓度为3~130ng/ml。

优选地，所述亚硝胺类杂质包括N-亚硝基二乙胺、N-亚硝基乙基异丙胺和/或N-亚硝基二异丙胺。

优选地，所述液相色谱条件为：色谱柱：C18色谱柱；流动相A：0.1%甲酸，流动相B：甲醇；柱温38~42℃；流速0.27～0.33ml/min。

优选地，所述液相色谱的洗脱程序为：0~3min，A 95%，B 5%；3.5~4.5min，A 90%，B10%；5.5~6.5min，A60%，B 40%；7~8min，A 20%，B 80%；8.1~9.5min，A 0%，B 100%；9.6~12min，A 95%，B 5%。

优选地，所述质谱条件为：离子源APCI源，扫描模式MRM，离子对包括：117.1/75.1、131.1/89.1和/或103.1/47.0，碰撞能量15~29V。