[发明专利]一种与花生深红色种皮紧密连锁的分子标记AhyRscc及其应用

说明书

本发明公开了一种与花生深红色种皮紧密连锁的分子标记AhyRscc及其应用，属于农业生物技术领域，该分子标记AhyRscc的特异性引物对包括：核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的引物；本发明的分子标记可以有效的鉴定花生的深红色种皮颜色，一方面有助于基因的精细定位、分离与克隆，另一方面对于花生的分子育种和品质改良都具有重要的应用价值。

技术领域

本发明涉及农业生物技术领域，特别是涉及一种与花生深红色种皮紧 密连锁的分子标记AhyRscc及其应用。

背景技术

花生是我国重要的油料和经济作物，年种植面积7000万亩左右，产量 约1700万吨。花生富含脂肪酸、蛋白质、维生素E和钙、铁、锌、硒等微 量元素，还富含白藜芦醇等功能活性物质，具有重要的保健作用，民间称 为“长生果”。花生种皮，特别是深红色的花生种皮，富含天然色素，特别 是花青素，花青素具有抑制自由基、抗氧化等多种生物学功效(张瑜芳， 2003)。另外，花生种皮也被称为花生红衣，是一味传统中药，具有止血、 治疗血友病的作用，花生红衣色素为纯天然的色素，无毒安全，是市场上 难得的抗氧化天然色素。花生红衣色素作为抗衰老保健品功效性材料，具 有诱人的市场应用前景。然而，现有的花生品种以粉红色的为主，深红色 的花生品种较少，而且和常规品种相比产量偏低，难以大面积推广(孙奇 泽，2015；李朝霞等，2016)。因此，提高深红色花生品种的产量是满足市 场需求的根本途径。

花生的种皮也是由珠被发育而来的，和其他性状相比，种皮颜色要隔 代才能显现，这一特性使得传统育种手段培育深红色种皮花生品种受到了 很大的限制。分子标记辅助育种以基因型鉴定为主，对于深红色种皮性状 来说，通过切去种子的部分子叶，检测子叶的基因型可以提前确定下一代 收获材料的种皮颜色，能够加速深红色花生新品种培育的进程，提高育种 效率。然而，目前尚未有关于花生深红色种皮相关基因及分子标记的报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种与花生深红色种皮紧密连锁的分子标记 AhyRscc及其应用，以解决上述现有技术存在的问题，该分子标记可用于 花生分子育种及其品质改良，有利于快速得到新的种质资源。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种与花生深红色种皮紧密连锁的分子标记AhyRscc，所 述分子标记AhyRscc的特异性引物对包括：

核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的引物；

核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的引物。

SEQ ID No.1：5'-GGTAATATAATGTTAACGGCC-3'；

SEQ ID No.2：5'-GAAAAAGCAAAGTTGAAGGAA-3'。

本发明还提供利用上述的与花生深红色种皮紧密连锁的分子标记 AhyRscc鉴定花生种皮颜色的方法，包括以下步骤：

(1)提取花生种子或者叶片DNA；

(2)采用上述的特异性引物对对所提取的DNA进行PCR扩增；

(3)经步骤(2)得到的扩增产物进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检 测，若出现271bp大小的特征条带，则判定待测花生材料下代种子为深红 色种皮。

进一步地，在步骤(2)中，所述PCR扩增总体积25uL：DNA模板 20-30ng/uL 1uL，特异性引物对0.5pmol/uL各0.5uL，10mM dNTP mix 0.5 uL，10×Taq Buffer 2.5uL，25mMMgCl₂ 2.0uL，Taq酶5U/uL 0.25uL， 加水至25uL。