[发明专利]一种与花生深红色种皮紧密连锁的分子标记AhyRscc及其应用有效
| 申请号： | 202110734528.1 | 申请日： | 2021-06-30 |
| 公开（公告）号： | CN113308564B | 公开（公告）日： | 2022-04-29 |
| 发明（设计）人： | 赵传志;王兴军;袁美;张鲲;侯蕾;厉广辉;田锐铮;夏晗;李膨呈;赵术珍;李长生;李爱芹;潘教文 | 申请（专利权）人： | 山东省农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 程小芳 |
| 地址： | 250100 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 花生 深红色 种皮 紧密 连锁 分子 标记 ahyrscc 及其 应用 | ||
1.一种鉴定花生种皮颜色的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取花生种子或者叶片DNA；
(2)采用分子标记AhyRscc的特异性引物对对所提取的DNA进行PCR扩增；
(3)经步骤(2)得到的扩增产物进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，若出现271bp大小的特征条带，则判定待测花生材料下代种子为深红色种皮；
所述分子标记AhyRscc的特异性引物对包括：
核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的引物；
核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的引物。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述PCR扩增总体积25uL：DNA模板20-30ng/uL 1uL，特异性引物对0.5pmol/uL各0.5uL，10mM dNTP mix 0.5uL，10×Taq Buffer 2.5uL，25mM MgCl2 2.0uL，Taq酶5U/uL 0.25uL，加水至25uL。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述PCR扩增反应条件：预变性95℃4min；94℃30s，58℃30s，72℃25s，35个循环；72℃延伸5min。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(3)中，采用8％非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。
5.一种与花生深红色种皮紧密连锁的分子标记AhyRscc的应用，其特征在于，所述分子标记AhyRscc位于12号染色体117.03-117.56Mb的区域内，所述分子标记AhyRscc用于鉴定深红色种皮花生；
所述分子标记AhyRscc的特异性引物对包括：
核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的引物；
核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的引物。
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