[发明专利]具备抗甲型流感病毒活性的热变性溶菌酶的制备方法及应用

说明书

本发明涉及医药技术领域，提供了具备抗甲型流感病毒活性的热变性溶菌酶的制备方法及应用，热变性溶菌酶的制备方法包括如下步骤：A、溶液配制：配制质量体积比至少为2％的溶菌酶溶液，并调节pH在4～8的范围内；B、加热变性：将溶菌酶溶液过滤除菌后在75～100℃的条件下加热2～3小时后，立即取出置于冰上降温，并低温密封保存。进一步，提供了热变性溶菌酶在制备抗甲型流感病毒药物组合物中的用途，以及以该热变性溶菌酶为活性组分的抗甲型流感病毒药物组合物。结果显示，根据本发明方法对溶菌酶进行热变性后明显具备抗甲型流感病毒活性。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及具备抗甲型流感病毒活性的热变性溶菌酶的制备方法及应用。

背景技术

溶菌酶(lysozyme，LZ)又称N-乙酰胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramideglycanohydrase)或胞壁质酶(Muramidase)，由英国细菌学家弗莱明1922年在人体分泌物中首次发现(Fleming,A.,Lysozyme:President's Address.Proc R Soc Med,1932.26(2):p.71-84.)，它作用于细菌细胞壁肽聚糖层的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4-糖苷键，导致细菌细胞壁破裂，最终导致细菌溶解死亡(Phillips,D.C.,The three-dimensional structure of an enzyme molecule.Sci Am,1966.215(5):p.78-90.)。

早有文献报道了溶菌酶的抗病毒活性(Lee-Huang,S.,et al.,Lysozyme andRNases as anti-HIV components in beta-core preparations of human chorionicgonadotropin.Proc Natl Acad Sci USA,1999.96(6):p.2678-81.Jin,Q.,et al.,TheEffects ofthe Recombinant CCR5 T4 Lysozyme Fusion Protein on HIV-1Infection.PLoS One,2015.10(7):p.e0131894.)，并有研究提出溶菌酶是碱性蛋白，在中性溶液带正电，可以与带负电荷的病毒蛋白、RNA和DNA形成复盐，使病毒失活(Ferrari,R.,C.Callerio,and G.Podio,Antiviral activity of lysozyme.Nature,1959.183(4660):p.548.Jolles,P.and J.Jolles,What's new in lysozyme research？Always a modelsystem,today as yesterday.Mol Cell Biochem,1984.63(2):p.165-89.)。