[发明专利]一种真菌菌种保存方法有效
申请号: | 202110366715.9 | 申请日: | 2021-04-06 |
公开(公告)号: | CN112899166B | 公开(公告)日: | 2023-06-06 |
发明(设计)人: | 尹良芬 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N1/04 | 分类号: | C12N1/04 |
代理公司: | 上海德悦知识产权代理事务所(普通合伙) 31344 | 代理人: | 董党红 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 真菌 菌种 保存 方法 | ||
1.一种真菌菌种保存方法,其特征在于:将干热灭菌的变色硅胶颗粒和干燥的长满真菌菌丝和/或真菌孢子的小滤纸片放入透明或半透明的无菌微量离心管或无菌指形管中,微量离心管或指形管使用PARAFILM封口膜封口,存放在透明或半透明的微量离心管冷冻盒中,放置于﹣20℃冰箱保存;所述变色硅胶颗粒的灭菌条件为160℃干热灭菌2小时;所述长满真菌菌丝和/或真菌孢子的小滤纸片的干燥条件为,在底部盛有干燥硅胶的干燥器中室温干燥5天,所述干燥器中的干燥硅胶的干燥条件为80℃干燥2小时。
2.根据权利要求1所述的真菌菌种保存方法,其特征在于:所述微量离心管为尖底微量离心管或圆底微量离心管。
3.根据权利要求1或2所述的真菌菌种保存方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)在无菌环境中,将真菌菌种移植到无菌固体培养基上,在移植点周围放置数片无菌小滤纸片;
2)培养,直至真菌菌丝和/或真菌孢子长满小滤纸片;
3)在无菌环境中,将长满真菌菌丝和/或真菌孢子的小滤纸片取出放在无菌培养皿中;
4)将步骤3)中的培养皿放在底部盛有干燥硅胶的干燥器中室温干燥5天,其中,所述干燥器中的干燥硅胶的干燥条件为80℃干燥2小时;
5)在无菌环境中,将干热灭菌并冷却后的无菌变色硅胶颗粒放入透明或半透明的无菌微量离心管或无菌指形管中,再将干燥的长满真菌菌丝和/或真菌孢子的小滤纸片放入微量离心管或指形管中,用PARAFILM封口膜将微量离心管或指形管封口,其中,所述变色硅胶颗粒的灭菌条件为160℃干热灭菌2小时;
6)将步骤5)中的微量离心管或指形管放入透明或半透明的微量离心管冷冻盒内,将冷冻盒放置于﹣20℃冰箱保存。
4.根据权利要求3所述的真菌菌种保存方法,其特征在于:步骤1)所述的固体培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基,具体为,取马铃薯200g的煮沸滤液加蒸馏水定容至1000ml,加入葡萄糖20g、琼脂20g,121℃湿热灭菌15min。
5.根据权利要求4所述的真菌菌种保存方法,其特征在于:步骤2)所述的培养的条件为,在恒温培养箱25℃黑暗培养。
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