[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒S1D片段蛋白的编码基因及其应用在审
| 申请号： | 202110363023.9 | 申请日： | 2021-04-02 |
| 公开（公告）号： | CN113337525A | 公开（公告）日： | 2021-09-03 |
| 发明（设计）人： | 郭霄峰;李洁森;莫炜钰;邝燕齐;莫梅君 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/50 | 分类号： | C12N15/50;C12N15/70;C12N1/21;C07K14/165;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K16/10;G01N33/569;C12R1/19 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 段卉 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种猪 流行性 腹泻 病毒 s1d 片段 蛋白 编码 基因 及其 应用 | ||
1.一种猪流行性腹泻病毒S1D片段蛋白的编码基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQID NO:1所示。
2.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体为连接有权利要求1所述的编码基因的载体。
3.一种工程菌，其特征在于，含有权利要求2所述的重组载体的菌株。
4.一种大量表达猪流行性腹泻病毒S1D片段蛋白的制备方法，其特征在于，利用含有携带权利要求1所述的编码基因的重组质粒的工程菌进行诱导表达；取菌体、破碎菌体，固液分离取沉淀，得到包涵体粗品；洗涤包涵体粗品、溶解、透析复性，即得。
5.根据权利4所述的制备方法，其特征在于，当菌液OD600值至0.6～1.0时，添加终浓度为0.1～1.5mmol/L的IPTG，16～42℃，诱导表达2～6小时。
6.根据权利4所述的制备方法，其特征在于，依次使用包涵体洗涤液和Tris-HCl洗涤包涵体粗品，其中包涵体洗涤液含有Tris－HCl、NaCl，尿素、和Triton X-100；使用包涵体变性溶解液溶解，其中包涵体变性溶解液含有Tris－HCl、NaCl、尿素、Triton X-100、和DTT。
7.根据权利4所述的制备方法，其特征在于，依次使用含有浓度递减的尿素TGE缓冲液透析。
8.权利要求1所述的编码基因、权利要求2所述的重组载体和/或权利要求3所述的工程菌在制备猪流行性腹泻病毒S1D片段蛋白的应用。
9.权利要求4到7任一所述的制备方法制备得到的猪流行性腹泻病毒S1D片段蛋白。
10.权利要求9所述的猪流行性腹泻病毒S1D片段蛋白在制备猪流行性腹泻病毒检测试剂盒和/或抗猪流行性腹泻病毒抗体中的应用。
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