[发明专利]基因TPS2在检测金针菇源性成分中的应用

说明书

本发明公开一种基因TPS2在检测金针菇源性成分中的应用，基因TPS2的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；挑选TPS2基因作为金针菇的检测内标准基因；可快速、灵敏地检测食品中的金针菇源性成分，灵敏度高，特异性强，操作简单、成本低廉，反应结果易于观察，非常适用于现场实时检测，对金针菇及其深加工产品进行快速生物源检测具有良好的发展前景。

技术领域

本发明涉及生物物种鉴定和PCR检测技术领域，具体的说涉及一种基因TPS2在检测金针菇源性成分中的应用。

背景技术

金针菇（Flammulina velutipes）是中国最早进行人工栽培的食用菌之一，中国已近成为世界上金针菇产量和出口量最多的国家。目前金针菇的生产用菌种比较混乱，异名同种和异种同名的现象在生产栽培上非常普遍，这不仅对实际生产中的规范化菌种管理造成了严重影响，而且对金针菇的种性鉴定、品种审定与认定、良种选育等基础科研及相关产业技术体系建立产生了明显的制约作用。

随着金针菇进行深加工产品日益增多，掺伪造假现象也日趋严重。此外，由金针菇冒充其他昂贵野生菌的现象也时有发生。传统的依赖形态学的检测方法存在着一定的局限性，随着现代分子生物技术在食品领域的广泛应用，使用分子生物技术对金针菇及其深加工产品进行快速生物源检测具有良好的发展前景。

目前，内标准基因已被广泛地用于鉴别食品掺假，但如何筛选出合适的内标准基因显得尤为重要。rDNA-ITS (Internal Transcribed Spacers) 方法是目前采用较多的野生菌菌种鉴定方法。尽管DNA条形码技术在物种分类鉴定、真菌及植物种质资源研究中取得一定的成果，但是仍然存在缺点和局限性。相比之下，基于内标准基因的检测技术更加方便经济，目前，对于内标准基因的开发与研究主要集中在农作物上，比如小麦、油菜、大豆、棉花、玉米、水稻等，其内标准基因已被广泛应用于成分来源的鉴别和分析中。而金针菇的内标准基因尚未见到相关报道，为了建立高效便利检测金针菇的方法，有必要对金针菇的内标准基因进行开发。

发明内容

本发明目的是提供基因TPS2在检测金针菇源性成分中的应用，以基因TPS2作为内标基因，该内标基因TPS2在金针菇源性成分鉴定中的应用，基因TPS2的核苷酸序列如SEQID NO:1所示。

本发明还提供一种用于检测金针菇源性成分的试剂盒，以基因TPS2为靶基因建立的试剂盒，包括扩增基因TPS2的特异性引物，采用PCR方法检测内标基因TPS2，特异性引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示；试剂盒还包括扩增用常规试剂。

本发明确定的用于检测金针菇源成分的基因TPS2，设计了用于检测该基因的定性PCR和定量PCR的引物作为试剂盒，建立了检测金针菇源性成分的相应PCR方法，该方法费时少，特异性好，灵敏度高，操作简单，不需要专业人员操作，结果易于观察，非常适于基层食品监督检验使用。

附图说明