[发明专利]检测绿原酸类化合物的方法及其应用

说明书

本发明公开了检测绿原酸类化合物的方法及其应用，其中，检测绿原酸类化合物的方法包括：将待测样本进行提取处理，以便得到提取液；以及将所述提取液进行超高效液相色谱‑串联三重四级杆质谱检测，以便获得所述绿原酸类化合物的定性和/或定量检测结果。该方法利用超高效液相色谱‑串联三重四级杆质谱进行检测，分析速度快，灵敏度高，可用于山银花和金银花的种属鉴别和质量评价。

技术领域

本发明涉及分析化学领域，具体地，涉及检测绿原酸类化合物的方法及其应用。

背景技术

山银花为忍冬科植物灰毡毛忍冬(L.macranthoides Hand.-Mazz.)、黄褐毛忍冬(L.fulvotomentosa Hsu et S.C.Cheng)、红腺忍冬(L.hypoglauca Miq.)或华南忍冬(L.confusa DC.)的干燥花蕾或带初开的花；金银花为忍冬科植物忍冬(LoniceraJaponica Thunb.)的干燥花蕾或带初开的花，两者均具有清热解毒，疏散风热的功效[1]，作为大宗药食同源产品在中药方制剂、饮料食品产业、保健品产业和化妆品产业中广泛使用[2-4]。《中国药典》2005年版之前，规定金银花与山银花通称为金银花，但2005年版药典对此进行了修订，将灰毡毛忍冬、黄褐毛忍冬，红腺忍冬、华南忍冬并入山银花类别下，而将忍冬作为金银花药材的唯一来源，与山银花分开。目前研究表明。金银花与山银花由于物种、产地等的差异，其活性成分含量、功效和市场价格上均存在着一定的差异性，但目前在保健品市场和中药加工上，经常有人把山银花混入金银花进行销售，此外，对于金银花和山银花活性成分的差异，目前了解的也不是很充分。活性成分是山银花和金银花发挥药效的基础。目前山银花和金银花中主要药效成分包含绿原酸、黄酮、及其皂苷等多种化合物，但针对这些化合物，还缺乏可靠的同时分析方法。

由此，检测绿原酸类化合物的方法有待改进。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种绿原酸类化合物的方法，该方法分析速度快，灵敏度高，可用于山银花和金银花的种属鉴别和质量评价。

需要说明的是，本发明是基于发明人的下列工作而完成的：

研究表明，山银花和金银花中主要活性成分包含绿原酸类、黄酮类、皂苷类等多种化合物。对于这些化合物的检测，在2020版的《中国药典》中，使用的是液相色谱的分析方法，通过使用紫外检测器或是蒸发光散射检测器对这3类化合物进行分别检测。此外，文献中还有一些使用气相色谱法、气相色谱-串联质谱法、液相色谱法、液相色谱-串联质谱法等分析方法，但大多也是对绿原酸类、黄酮类或是皂苷类化合物进行单一类别的分析，对山银花和金银花中的绿原酸类、黄酮类、皂苷类等多种化合物进行同时分析的方法尚未见文献报道。

发明人发现，采用超高效液相色谱-串联质谱能同时检测山银花和金银花中主要的活性成分(8种绿原酸类化合物(1-咖啡酰奎尼酸、3-咖啡酰奎尼酸、4-咖啡酰奎尼酸、5-咖啡酰奎尼酸、3，4-二咖啡酰奎尼酸、3，5-二咖啡酰奎尼酸、4，5-二咖啡酰奎尼酸、1，5-二咖啡酰奎尼酸)、2种黄酮类(木犀草素、木犀草苷)，以及3种皂苷类化合物(川续断皂苷乙、灰毡毛忍冬皂苷乙、獐牙菜苦苷))

因而，根据本发明的一个方面，本发明提供了一种检测绿原酸类化合物的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：将待测样本进行提取处理，以便得到提取液；以及将所述提取液进行超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱检测，以便获得所述绿原酸类化合物的定性和/或定量检测结果。

根据本发明实施例的检测绿原酸类化合物的方法，利用超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱进行检测，分析速度快，灵敏度高，可用于山银花和金银花的种属鉴别和质量评价。

另外，根据本发明上述实施例的检测绿原酸类化合物的方法，还可以具有如下附加的技术特征：

根据本发明的实施例，利用50％甲醇溶液进行所述提取处理。