[发明专利]一种载药靶向磁性纳米复合粒子的制备方法

说明书

本发明属于纳米生物医药技术领域，具体涉及一种载药靶向磁性纳米复合粒子的制备方法，先制得OTPBA和Fe₃O₄纳米粒子，再制得OTPBA‑SPIONs后制备载铂类药物的纳米粒子CMDP/OTPBA‑SPIONs；制备ICG标记的靶向多肽ANG‑ICG；最后通过氨基与羧基的偶联，将ANG‑ICG修饰到CMDP/OTPBA‑SPIONs上，得到一种多功能荧光靶向载药磁性纳米粒子。旨在通过靶向多肽增加药物通过血脑屏障的能力，通过MRI成像和近红外荧光成像对脑部肿瘤部位进行精准定位，同时实现脑部肿瘤诊断和治疗。

技术领域

本发明属于纳米生物医药技术领域，涉及一种载药靶向磁性纳米复合粒子的制备方法，具体涉及一种具有偶联近红外染料、靶向多肽和铂类抗肿瘤药物的磁性纳米粒子的制备方法，得到一种多功能荧光靶向载药磁性纳米粒子，旨在通过靶向多肽可以增加药物通过血脑屏障的能力，通过MRI成像和近红外荧光成像对脑部肿瘤部位进行精准定位，同时实现脑部肿瘤诊断和治疗。

背景技术

血脑屏障是一种保护大脑抵抗有机物和外来物种入侵的一种障碍，95％以上的药物是不能穿过血脑屏障进入大脑的。研究发现纳米载体能够通过内吞作用进入内皮细胞，然后通过跨细胞转移进入大脑，这一研究发现对脑部肿瘤疾病的治疗是个很大的鼓舞。

氧化铁纳米粒子是纳米家族中应用广泛的纳米粒子，其独特的磁学性质可以应用于催化、数据储存、生物分离和MRI引起众多研究者的兴趣。超顺磁性的氧化铁纳米由于其优越的生物兼容性，可以用于MRI指导药物传输，也可以在外磁场的干扰下实现靶向传输，因此在生物医药领域得到广泛的应用。但是一种影像都有自己的优点和不足，获得疾病位置精确和可靠的信息就非常难。弥补他们各自的不足可以通过联合影像工具获得精确且可靠的疾病信息，这样就需要联合的影像试剂。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对传统铂类抗癌药物均为化学小分子药物，靶向性能较弱，毒副作用显著，不能通过血脑屏障的应用缺点。设计、合成大小合适且生物相容的纳米颗粒使得药物小分子具有通过血脑屏障的能力；在此基础上，进一步对纳米材料的表面进行特异性标记，实现药物通过血脑屏障和对肿瘤细胞的特异性识别，同时对磁性纳米颗粒进行近红外荧光标记，可以在临床中实现核磁与荧光两种可视化研究和跟进。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

(一)OTPBA的制备；

在冰浴条件下将丁二酸酐加入到二氯甲烷中，进行强力磁性搅拌使其溶解，然后将含有3-氨丙基-三乙氧基硅烷的二氯甲烷溶液在1h内缓慢的滴加到上述溶液中，随后将反应转移至室温条件下进行，5h后停止反应。使用旋转蒸发仪除去溶剂得到OTPBA。

(二)Fe₃O₄纳米粒子制备及表面修饰得到OTPBA-SPIONs；

将六水合三氯化铁和氢氧化钠相继加入到乙二醇中，在磁力搅拌条件下加热至70℃，直至产生混合均匀的棕黄色溶液，再将这种混合均匀的溶液转移至聚四氟乙烯的反应釜中封死，在240℃条件下反应，5h后停止反应，将反应釜冷却至室温。黑色的固体产品(Fe₃O₄)通过磁分离收集，然后分别用水和乙醇洗以除去未反应的试剂，在室温下真空干燥。将Fe₃O₄纳米粒子超声分散到异丙醇(30mg/200mL)中，然后向其中加入水和氨水(质量分数30％)，随后将溶解在异丙醇中的4-氧-4-[3-(三乙氧基硅基)丙基]氨基-2-丁酸(OTPBA)缓慢滴加到上述反应体系中。整个反应在50℃、超声波条件下进行，3h后停止反应。包裹的磁性纳米粒子(OTPBA-SPIONs)通过磁分离收集，分别用水和乙醇洗除去未反应的OTPBA，样品在室温条件下真空干燥。

(三)制备载铂类药物(CMDP)的纳米粒子CMDP/OTPBA-SPIONs；