[发明专利]一种仿皮质骨修复材料的制备方法

说明书

本发明公开了一种仿皮质骨修复材料的制备方法，包括以下步骤，将洁净后的异种骨骨材经充分去除软组织、骨髓和软骨后清洗，再经过进行脱脂、脱钙，将骨块浸泡于戊二醛溶液进行交联处理，将其放入胃蛋白酶的蛋白水解酶中浸泡经脱蛋白处理，将异种骨骨材与纳米银明胶溶液进行复合，最后经冷冻干燥后制得皮质骨植骨材料。通过对异种骨脱脂、脱钙、冷冻干燥协助降低抗原性，保留了成骨活性，提高异种骨的成骨活性，通过胃蛋白酶进行脱蛋白处理，可减少对植骨材料中的胶原蛋白和成骨因子的破坏，采用的纳米银微粉作为抗菌成份，可对多种致病微生物都有强烈的抑制和杀灭作用，使植骨材料形成缓释膜，同时能进一步提高异种骨植骨材料的抗感染效力。

技术领域

本发明涉及骨组织再造技术领域，尤其涉及一种仿皮质骨修复材料的制备方法。

背景技术

由于创伤、骨病等造成骨缺损，骨缺损的修复一直是骨科治疗的一个难题。自体骨存在着来源受限，影响供区功能，增加手术创伤及感染等缺点；同种异体骨来源也受到限制，且有感染艾滋病病毒、肝炎病毒等疾病的危险。

异种骨作为一种生物组织，具有来源广泛，且易于大量获取等优点，具备天然的多孔网状结构和较好的生物力学强度，比人工合成骨材料更易于吸收、替代。异种骨包括牛骨、猪骨、鹿骨,羊骨等,因其尺寸和力学强度更符合骨移植材料的要求。作为异种骨具有较强的抗原性，植入人体后能够诱发免疫排斥反应,因此必须通过各种处理方式来减弱其抗原性。

目前用于实验和临床的异种骨植骨材料是通过高温煅烧、冷冻和冻干、物理化学等处理,植骨后效果多不理想。煅烧骨是将异种骨经高温煅烧除去骨中有机质而成,虽能彻底消除抗原性,但对材料的力学性能和降解性能有影响，且破坏了骨中的天然活性诱导成分。如何对异种骨进行加工处理，使其在降低抗原性的同时也能很大程度地保留成骨诱导活性和适当的生物力学强度，这对本领域技术人员开发出新型的植骨材料具有重要的意义。

对于开放性骨折和严重的骨缺损的治疗，一直成为医学界难以解决的问题。难度在于手术植骨存在发生感染的可能，所以常规解决方法是在骨折后的感染、慢性骨髓炎遗留的大骨缺损伤口愈合至少十个月后才进行手术植骨，尽管如此，骨移植还常常因为感染的复发而失败。

发明内容

本发明的目的是针对以上问题提供一种仿皮质骨修复材料的制备方法，以提高异种骨的成骨活性和骨的抗感染能力。

为达到上述目的，本发明公开了一种仿皮质骨修复材料的制备方法，包括以下步骤，将洁净后的异种骨骨材经充分去除软组织、骨髓和软骨后清洗，再经过进行脱脂、脱钙，将骨块浸泡于戊二醛溶液进行交联处理，然后将其放入胃蛋白酶的蛋白水解酶中浸泡经脱蛋白处理，将异种骨骨材与纳米银明胶溶液进行复合，最后经冷冻干燥后制得皮质骨植骨材料。

所述去除软组织、骨髓和软骨过程是将异种骨骨材置入蒸馏水洗涤去除表面杂物，并对骨块做超声洗涤，去除表面及骨孔内的杂物，最后将处理好的骨块做超声洗涤，去除表面及骨孔内的杂物且进行干燥处理。

所述脱脂过程主要是指将洁净后的异种骨骨材放入氯仿-甲醇混合溶液中浸泡脱脂，不断更换新的氯仿-甲醇混合溶液直至其颜色不再变浑浊，所述氯仿-甲醇混合溶液是由体积比为2∶1的氯仿和甲醇配制而成，异种骨骨材与氯仿-甲醇混合溶液的体积比控制在1∶2。

所述脱钙过程主要是指将异种骨骨材放入盐酸中浸泡脱钙，浸泡时间为24～30小时，所述盐酸的浓度为0.7～0.8mol/L，在盐酸中浸泡时的温度控制在4℃。

所述交联处理为用0.03％～0.05％戊二醛在4℃环境下浸泡异种骨骨材8～10小时。

所述脱蛋白处理主要是指将异种骨骨材浸泡于胃蛋白酶溶液中进行脱蛋白，每克异种骨骨材需要400～800U/mg胃蛋白酶进行处理， 所述胃蛋白酶溶液的pH值控制在6.0～7.0，异种骨骨材与胃蛋白酶液的体积比控制在 1∶(3～5)。