[发明专利]干细胞分泌物及其制备方法、生物活性骨水泥及制备方法和应用

权利要求书

1.一种干细胞分泌物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：先将碘海醇与脐带干细胞共培养，再加入药物同时施加X射线辐照培养，然后弃去培养液并清洗后加入无血清培养基继续培养，最后收集细胞培养液，富集后得到干细胞分泌物。

2.根据权利要求1所述的干细胞分泌物的制备方法，其特征在于，X射线的强度为0.5-4Gy。

3.根据权利要求1所述的干细胞分泌物的制备方法，其特征在于，X射线的强度为0.5-2Gy。

4.根据权利要求1所述的干细胞分泌物的制备方法，其特征在于，

所述药物包括白藜芦醇、地塞米松、TN14003冻干粉、T140冻干粉或AMD3100冻干粉中的至少一种。

5.根据权利要求4所述的干细胞分泌物的制备方法，其特征在于，

所述药物选自20-60μM白藜芦醇、0.2-0.5μM地塞米松，0.2-2μM TN14003冻干粉，0.2-2μM T140冻干粉或0.2-1μM AMD3100冻干粉中的至少一种。

6.根据权利要求1所述的干细胞分泌物的制备方法，其特征在于，碘海醇的质量浓度为2-100μg/mL。

7.根据权利要求6所述的干细胞分泌物的制备方法，其特征在于，碘海醇的质量浓度为10-20μg/mL。

8.根据权利要求1所述的干细胞分泌物的制备方法，其特征在于，

碘海醇与脐带干细胞共培养1-2天后再加入药物。

9.根据权利要求1所述的干细胞分泌物的制备方法，其特征在于，

X射线辐照后培养的时间为1-4天。

10.根据权利要求1所述的干细胞分泌物的制备方法，其特征在于，

加入无血清培养基后培养的时间为1-4天。

11.一种干细胞分泌物，其特征在于，按照权利要求1-10任一项所述的干细胞分泌物的制备方法制备得到。

12.一种生物活性硫酸钙骨水泥，其特征在于，包括固相粉末和固化液，所述固相粉末包括微球和α-半水硫酸钙，所述微球中包含有生物活性物质，所述生物活性物质为权利要求11所述干细胞分泌物。

13.根据权利要求12所述的生物活性硫酸钙骨水泥，其特征在于，所述微球和α-半水硫酸钙的质量比为0.03-0.8:1。

14.根据权利要求12所述的生物活性硫酸钙骨水泥，其特征在于，所述微球的制备方法包括以下步骤：

(a)甲基化聚乙二醇-聚乙丙交酯溶于氯仿，得到油相；

(b)生物活性物质溶于PBS溶液，得到内水相；

(c)聚丙烯酸和/或聚乙烯醇溶于水，得到外水相；

(d)通过复乳法将油相、内水相和外水相制备成微球。

15.根据权利要求14所述的生物活性硫酸钙骨水泥，其特征在于，

甲基化聚乙二醇-聚乙丙交酯与生物活性物质的质量比为3-10:1。

16.根据权利要求14所述的生物活性硫酸钙骨水泥，其特征在于，

所述内水相中，生物活性物质的质量占比为0.5-2％。

17.根据权利要求12-16任一项所述的生物活性硫酸钙骨水泥，其特征在于，所述固化液为透明质酸的水溶液。

18.根据权利要求17所述的生物活性硫酸钙骨水泥，其特征在于，

所述固化液中，透明质酸的质量占比为0.2-3％。