[发明专利]一种检测化妆品中环磷酸腺苷的方法

说明书

本发明建立一种测定化妆品中环磷酸腺苷的高效液相色谱法。化妆品试样以乙腈水（1:9体积比）为提取液，涡旋混匀，35℃超声提取25 min，水饱和的正己烷除去脂肪，6000 r/min 4℃离心5 min。选择色谱柱Atlantis T3柱（250×4.6 mm（i.d.），5μm），流动相乙腈+0.1%甲酸水（5:95体积比）等度洗脱，检测波长为257 nm，柱温35℃，进样量：10μL，流速1.0 mL/min进行分离检测。结果表明：环磷酸腺苷的线性回归方程相关系数R在0.9999；回收率在86.3%～110.3%之间。精密度在0.92％～7.35之间。该方法简便快速、灵敏可靠、重现性好，适用于化妆品中环磷酸腺苷的分析检测。

技术领域

本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种检测化妆品中环磷酸腺苷的方法。

背景技术

目前种类繁多的功能性化妆品引起广大消费者的关注，为维护消费者权益，许多国家已对各功效成分提出功能评价要求，并对这些成分进行检测。GB 5296.3-2008 《消费品使用说明 化妆品通用标签》标准要求，在化妆品销售包装的可视面上应真实地标注化妆品全部成分的名称。因此，对化妆品中的功效成分的存在与否以及含量迫切需要相应的检测方法和标准。

环磷酸腺苷为《国际化妆品原料标准中文名称目录（2015年版）》及《国家食品药品监督管理总局关于发布已使用化妆品原料名称目录的通告（2014年第11号）》中允许使用的原料。是一种核苷酸衍生物，因具有抗过敏、消炎祛痘作用，能有效调节毛细血管血液循环，及时消退皮肤浮肿，预防和修整斑痕痘印，可作为皮肤调理剂用于祛斑、祛痘类化妆品中。市面上销售的多款化妆品产品明确标注添加了环磷酸腺苷作为其功效成分。

目前环磷酸腺苷检测方法主要包括纸色谱法、薄层色谱法、蛋白结合分析法、放射免疫分析法、高效液相色谱-串联质谱法和ELISA检测试剂盒等。其中，纸色谱法、薄层色谱法、蛋白结合分析法、放射免疫分析法等方法操作繁琐且时间长、灵敏度低；高效液相色谱-串联质谱法则易受基质干扰且设备昂贵。因此，开发一种快速、灵敏度高的液相色谱分析方法，对于化妆品中环磷酸腺苷的检测分析具有十分重要的意义。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种检测化妆品中环磷酸腺苷的高效液相色谱法。主要通过对化妆品的提取，净化，色谱条件的等优化处理，提供了一种方便快捷高效的测定方法。

本发明的技术方案如下：

一种检测化妆品中环磷酸腺苷的方法，包括以下步骤：

（1）向待测化妆品中加入乙腈-水溶液，超声提取；

（2）加入水饱和的正己烷，涡旋混匀；

（3）静止，离心，除去正己烷层至澄清；

（4）高效液相检测：色谱柱：Atlantis T3 柱；流动相：乙腈（色谱纯）+0.1%甲酸水溶液（5+95）；检测波长：257nm；柱温：35℃；流速：1.0 mL/min；进样量：10 μL。

（5）高效液相标准工作曲线制作；待测液检测。

所述步骤（1）的乙腈-水溶液中乙腈与水的体积比为1:9。

所述步骤（4）的流动相的乙腈与甲酸水溶液的体积比为1:19。

本发明采用乙腈-水溶液超声提取，将化妆品中待测物溶出；同时通过水饱和的正己烷进行样品净化，去除化妆品中的脂肪等杂质，采用本发明的方法适用面广，适用于各种类型的化妆品，如液体类、乳、膏、霜类化妆品等。

本发明的有益效果：

1. 分离简单，准确度高，适应性良好

本发明提供的方法，能够简单、快速、准确、高灵敏的测定化妆品中环磷酸腺苷。方法分离度好，检测灵敏度高，适应性良好。

2. 适用面广