[发明专利]用于治疗基于肌营养不良蛋白的肌病的靶向外显子44的核酸和包含所述核酸的重组腺相关病毒

说明书

本公开涉及用于治疗肌营养不良症的基因疗法领域，所述肌营养不良症包括但不限于杜氏肌营养不良症(DMD)。更具体地，本公开提供了核酸，包括编码基于U7的小核核糖核酸(RNA)(snRNA)(基于U7的snRNA)的核酸，以及重组腺相关病毒(rAAV)，所述病毒包含所述核酸分子以递送编码基于U7的snRNA的核酸，以诱导外显子跳跃，以用于治疗由适合DMD基因的外显子44(DMD外显子44)跳跃的突变引起的肌营养不良症(包括但不限于DMD)，所述突变包括但不限于涉及、围绕或影响DMD外显子44的任何突变。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2018年8月2日提交的美国临时申请号62/882,216的优先权权益，其公开内容通过引用整体并入。

技术领域

本公开涉及用于治疗肌营养不良症的基因疗法领域。更具体地，本公开提供了核酸，包括编码基于U7的小核核糖核酸(RNA)(snRNA)(基于U7的snRNA)的核酸，以及重组腺相关病毒(rAAV)，其包含所述核酸分子以递送编码基于U7的snRNA的核酸，以诱导外显子跳跃，以用于治疗由适合DMD基因的外显子44(DMD外显子44)跳跃的突变引起的肌营养不良症，所述突变包括但不限于涉及、围绕或影响DMD外显子44的任何突变。

序列表通过引用并入

作为本公开的单独部分，本申请含有计算机可读形式的序列表(文件名：54313A_Seqlisting.txt；大小：22,771字节；创建于：2020年8月3日)，所述序列表通过引用整体并入本文。

背景技术

肌营养不良症(MD)是一组主要影响随意肌的遗传性退行性疾病。该组的特征在于控制运动的骨骼肌的进行性无力和退化。某些形式的MD在婴儿期或儿童期发展，而其它形式的MD直到中年或以后才可出现。病症在肌肉无力的分布和程度(某些形式的MD也影响心肌)、发病年龄、进展速度和遗传模式方面不同。

MD是一组没有可确定的治疗方法的疾病，严重影响个人、家庭和社区。代价是无法估量的。个人遭受与自尊丧失相关的情绪紧张和生活质量下降。由肢体功能丧失导致的极端身体挑战给日常生活活动带来困难。家庭动态受到经济损失和人际关系挑战的影响。受影响的兄弟姐妹感到疏远，并且配偶之间的冲突经常导致离婚，特别是在肌营养不良症的责任可以加在父母一方的身上时。寻找治愈方法的负担往往成为终生的、坚持不懈的努力，这削弱和挑战生活的方方面面。除了家庭之外，社区也承担经济负担，因为需要增加设施以适应肌营养不良症人群在特殊教育、特殊交通方面的障碍，以及治疗复发性呼吸道感染和心脏并发症的复发性住院费用。财政责任由州和联邦政府机构分担，这将责任延伸到纳税社区。

MD的一种形式是杜氏肌营养不良症(DMD)。它是肌营养不良症的最常见的严重儿童形式，每5000名新生男性中就有1人患病。DMD是由DMD基因的突变导致在骨骼肌和心肌以及胃肠道和视网膜中不存在肌营养不良蛋白(427KDa)引起的。肌营养不良蛋白不仅保护肌膜免于离心收缩，而且还锚定靠近肌膜的许多信号传导蛋白。MD的另一种形式是贝克型肌营养不良症(BMD)。与DMD一样，BMD是一种使身体的肌肉逐渐变得越来越弱和越来越小的遗传性病症。BMD影响臀部、骨盆、大腿和肩膀以及心脏的肌肉，但已知其引起的问题严重性低于DMD。