[发明专利]血卟啉骈合维拉帕米片段的血卟啉衍生物的制备及应用

说明书

本发明涉及药物化学领域，具体涉及血卟啉骈合维拉帕米片段的血卟啉衍生物的制备及其在增敏肿瘤药物中的应用。研究证明，本发明所涉及的血卟啉衍生物可显著逆转肿瘤多药耐药性，使细胞恢复对抗癌药物的敏感性。通过将血卟啉衍生物与抗癌药物合用，可以恢复抗性细胞对抗癌药物的敏感性，达到抗肿瘤的治疗与控制效果。

技术领域

本发明属于药物化学技术领域，尤其涉及血卟啉骈合维拉帕米片段的血卟啉衍生物的制备及在增敏肿瘤药物中的应用。

技术背景

肿瘤多药耐药性(MDR)是肿瘤细胞对一种化疗药物产生耐药现象后对同类或非同类结构，以及细胞靶点和作用机制相同或不同的其它抗肿瘤药物均产生的交叉耐药。维拉帕米(Verapamil,VER)是一种广泛用于心脏疾患的临床钙离子通道阻滞剂，实验研究表明，VER可以明显提高恶性肿瘤细胞对化学药物的敏感性，早在1982年，就有研究证实了维拉帕米对肿瘤细胞MDR表型的逆转作用。从而逆转肿瘤细胞MDR。然而，维拉帕米有效逆转肿瘤耐药的浓度是6.0-10.0μmol/L，但是维拉帕米的静脉安全浓度是1.0-2.0μmoL/L，超过安全浓度会导致窦性心动过缓、房室传导阻滞等严重的心血管毒副作用，这成为限制维拉帕米作为肿瘤耐药逆转剂在临床中广泛应用的主要原因。

血卟啉是由血红蛋白酸水解后产生的内源卟啉，它是一种光敏物质，在体内能选择性被恶性肿瘤吸收并潴留于肿瘤内。在630nm波长的光照下，产生光动力化学反应，杀伤肿瘤细胞。血卟啉分子的生物特性主要表现为特异性聚集，它能被肿瘤细胞吸收和滞留。因为肿瘤细胞对血卟啉的亲和力比正常细胞大10倍，血卟啉在肿瘤细胞中的浓度远大于正常组织。且滞留时间比较长，经过48-72小时之后，正常组织中的血卟啉已完全清除，而血卟啉全部滞留在肿瘤细胞内。其易溶于有机溶剂而难溶于水，因此不能直接通过静脉给药，从而极大的限制了其在临床中的应用。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种血卟啉骈合维拉帕米片段的血卟啉衍生物，该衍生物将维拉帕米功能性片段骈合到血卟啉母体上，改善血卟啉理化性质，同时通过血卟啉的肿瘤组织富集作用实现维拉帕米功能性片段在肿瘤组织的富集。

所述血卟啉衍生物具有A2或B2中任一种结构，或同时含有A2和B2 两种结构，A2和B2两种结构分别表示如下：

本发明同时提供了血卟啉衍生物A2和B2的制备方法，其中，血卟啉衍生物A2是由血卟啉与维拉帕米第一片段在苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐即BOP的催化下，通过酰胺缩合反应合成；

所述维拉帕米第一片段的结构如下：

具体步骤为：

S81、将0.5mmol血卟啉溶于盛有30mL二甲基甲酰胺(DMF)的反应容器中，并加入0.5-2mmol 3,4-二甲氧基苯乙胺即维拉帕米第一片段和0.5mmol苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐(BOP)，室温搅拌3小时，等待反应结束；

S82、反应结束后，向反应容器中加入100mL水，并将反应容器放于冰上等待析出固体；

S83、抽滤所述析出固体并干燥，即得到粗产物；

S84、将粗产物溶于乙酸乙酯中，加入相当于粗产物三倍质量的硅胶，真空旋转蒸发乙酸乙酯；

S85、在硅胶柱层析中以二氯甲烷：甲醇体积比50:1为洗脱剂，将血卟啉衍生物A2与杂质分离，得到深棕色血卟啉衍生物A2固体纯品。

该合成反应的流程表示如下：

优选的，所述血卟啉、维拉帕米第一片段、BOP的比例为1：1：1。