[发明专利]用于裸鲤棘头虫的检测鉴定方法

权利要求书

1.一种用于裸鲤棘头虫的检测鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：

A、根据形态特征，采集鱼类宿主中的裸鲤棘头虫；

B、提取虫体样本的DNA；

C、进行琼脂糖凝胶电泳以检测所提取DNA的质量，若质量合格，则建立反应体系，进行PCR扩增；

D、将测序结果进行序列比对，若一致性在99%以上，则判定该物种为裸鲤棘头虫。

2.根据权利要求1所述用于裸鲤棘头虫的检测鉴定方法，其特征在于，所述虫体样本的采集方法，刮取鱼类消化道的内容物和粘液，置于玻璃板中央，并用同样大小的玻璃板挤压，使内容物和粘液分散展开，采用便携式解剖镜观察虫体形态并采集疑似虫种。

3.根据权利要求2所述用于裸鲤棘头虫的检测鉴定方法，其特征在于，所述玻璃板的大小为10*10cm。

4.根据权利要求1所述用于裸鲤棘头虫的检测鉴定方法，其特征在于，体色鲜艳，以各种黄色居多，也有白色、暗红色，偶见黄色底色，体表带橙色环状花纹的个体，体壁较厚，吻端位，较长，呈圆柱形；吻钩13列，每列9个，第1个略小，2~6个等大且最大，后3个小于前面6个，后2个又小于倒数第3个，全部带有根部；吻鞘较深，呈棒状；吻腺短而粗，呈棒状，与吻鞘长度相近，雌虫体腔内可见椭圆形卵，分散排布，雄虫的2个睾丸相连，呈椭圆形，基本等大；黏液腺位于睾丸后侧，6个，呈倒梨形；雄虫交接囊可伸出体外，呈钟罩状。

5.根据权利要求1所述用于裸鲤棘头虫的检测鉴定方法，其特征在于，采用18S特异性引物和COX1特异性引物分别进行PCR扩增，得到的PCR产物经序列比对，一致性均达99%以上即可确认。

6.根据权利要求5所述用于裸鲤棘头虫的检测鉴定方法，其特征在于，所述18S特异性引物为：

上游引物： GTTCATCGTTGATGCACTTCAG 下游引物： GTAACGACAAACGATCGCTA。

7.根据权利要求5所述用于裸鲤棘头虫的检测鉴定方法，其特征在于，所述COX1特异性引物为：

上游引物：GTTGCTAGGTTTTGCGATAAG 下游引物：TGGAGACCCACCACCACAAG。

8.根据权利要求6所述新棘吻虫属棘头虫的检测鉴定方法，其特征在于，用于序列比对的核糖体基因18S的碱基序列为SEQID：NO.5。

9.根据权利要求7所述新棘吻虫属棘头虫的检测鉴定方法，其特征在于，用于序列比对的COX1的碱基序列为SEQID：NO.6。