[发明专利]一种检测核因子-κB的试剂盒及其应用有效
申请号: | 202011034730.5 | 申请日: | 2020-09-27 |
公开(公告)号: | CN112114154B | 公开(公告)日: | 2023-04-25 |
发明(设计)人: | 徐栋;彭莹;张凯;徐希杰;唐婕;邹美芬;钦晓峰 | 申请(专利权)人: | 江苏省原子医学研究所 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/53;G01N21/64;C12Q1/6876;C12Q1/6804;C12N15/11 |
代理公司: | 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 | 代理人: | 王鑫 |
地址: | 214063*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 因子 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种检测核因子-κB的探针,其特征在于,所述探针为DNA双链探针;所述DNA双链探针由DNA-1和DNA-2反向互补形成;所述DNA-1的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,所述DNA-2的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
2.一种检测核因子-κB的试剂盒,其特征在于,包含权利要求1所述的检测核因子-κB的探针。
3.根据权利要求2所述的检测核因子-κB的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括独立包装的两个发夹式分子信标分别为MB-1和MB-2;所述MB-1的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示;所述MB-2为在SEQ ID No.4的5’末端标记荧光基团,第20位标记猝灭剂得到的。
4.根据权利要求3所述的检测核因子-κB的试剂盒,其特征在于,所述荧光基团为cy3,所述猝灭剂为BHQ-2;或所述荧光基团为cy5,所述猝灭剂为BHQ-2;所述荧光基团为6-FAM,所述猝灭剂为BHQ-1。
5.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括独立包装的核酸外切酶III。
6.根据权利要求2-5任一所述的试剂盒,其特征在于,所述DNA-1、DNA-2、MB-1和MB-2的摩尔比为1:1:1:2。
7.一种检测核因子-κB的方法,其特征在于,将权利要求1所述探针与待测样本在室温下共孵育30分钟以上,然后加入核酸外切酶III、MB-1和MB-2,于37℃共孵育1小时以上,如果与阴性对照相比,共孵育后待测样本的荧光强度升高、说明待测样本中含有核因子-κB;所述阴性对照为不含有核因子-κB的样本。
8.根据权利要求7所述的检测核因子-κB的方法,所述DNA-1、DNA-2、MB-1和MB-2的摩尔比为1:1:1:2。
9.权利要求1所述探针或权利要求2-6任一所述的试剂盒在检测核因子-κB中的应用。
10.根据权利要求1所述探针、或权利要求2-5任一所述的试剂盒、或权利要求7或8所述方法、或权利要求9所述应用,其特征在于,所述核因子-κB具体为NF-κB p65或NF-κB p50。
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