[发明专利]一种金露梅中提取的α-葡萄糖苷酶抑制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种α-葡萄糖苷酶抑制剂的制备方法，其特征在于所述α-葡萄糖苷酶抑制剂包括：槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸、没食子酸和3，4，6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖，且三者的质量比为3:1:3、3:2:2或2:1:2中的一种；所述槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸、没食子酸和3，4，6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的制备方法包括如下步骤：

(1)提取：称取阴干的金露梅叶500g，过40目筛，1:20g/mL的料液比，用70％乙醇，在80℃下回流提取3次，每次提取2小时，合并提取液，经浓缩得到粗提物0.6L；

(2)分离：将粗提物上大孔吸附树脂AB-8，依次用10L体积的质量浓度为0、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％的甲醇洗脱，浓缩收集的洗脱液，旋蒸干燥，利用高效液相色谱仪，柱子型号：Welch Ultimate MB-C18，柱温为30℃，流动相：99％超纯水，甲醇，检测条件：5-30％甲醇，60min，检测波长254nm、280nm和360nm，经大孔吸附树脂洗脱的洗脱液过0.25μm有机滤膜进行制样，进样量为10μL，槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸、没食子酸、3,4,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖对照品母液进样量为各5μL，经上述检测确定其中20％的甲醇洗脱部分为含有目标成分的洗脱液、将含有目标成分的洗脱液在80℃水中浓缩至恒重，即得到含有目标成分的富集物；

(3)制备：将含有目标成分的富集物通过制备液相色谱仪，采用的色谱柱为DAC-HB50，流动相甲醇，柱温30℃，流动相甲醇A和-2％冰乙酸B，甲醇的质量浓度为45％，等度洗脱，流动相流速为50mL/min，检测波长为254nm和280nm，进样量为3mL，采用重复进样方式，进样间隔为50min，收集制备液，检测方法同(2)即得到槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸单体质量为1.6877g、纯度为97.6516％；

将收集目标成分的富集物除去槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸的组分，通过快速纯化系统，采用制备型色谱柱：江阴汉邦Dubhe C18，柱温30℃，流动相为甲醇、1％冰乙酸，20％甲醇等度洗脱，流动相流速为50mL/min，检测波长为254nm和280nm，进样量为1.5mL，采用重复进样方式，进样间隔为30min，浓缩收集的各峰制备液，利用高效液相色谱仪检测，柱子型号：Platisil ODS，C18柱4.6×250mm，5μm，柱温为30℃，流动相：1％冰乙酸，乙腈，流动相流速为1mL/min，检测条件为：20-35％乙腈，30min，检测波长254nm、280nm和360nm，经大孔吸附树脂洗脱的洗脱液过0.25μm有机滤膜进行制样，进样量为10μL，得到没食子酸质量18.6mg、纯度为95.7021％，3,4,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖质量为253.8mg、纯度为96.1672％。