[发明专利]低免疫原性低ADCC/CDC功能的抗C5人源化单抗及其应用在审

专利信息
申请号: 202010652906.7 申请日: 2020-07-08
公开(公告)号: CN112210005A 公开(公告)日: 2021-01-12
发明(设计)人: 孙乐;李茂华;任文林 申请(专利权)人: 京天成生物技术(北京)有限公司
主分类号: C07K16/18 分类号: C07K16/18;C12N15/13;G01N33/574;G01N33/577;G01N33/68;A61K39/395;A61P13/12;A61P13/00;A61P35/00
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 陈征
地址: 101111 北京市大兴区经济*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 免疫原性 adcc cdc 功能 c5 人源化单抗 及其 应用
【说明书】:

本发明提供了一种低免疫原性低ADCC/CDC功能的抗C5人源化单抗及其应用。通过对Eculizumab单抗框架区氨基酸序列进行改造,降低免疫原性,同时将抗体由IgG2亚型更换为IgG1亚型,并在IgG1抗体重链CDR3与CH2区之间插入一段柔性氨基酸序列,达到降低ADCC/CDC功能的目的,提高抗体的稳定性,延长其半衰期。本发明的单抗与人C5结合的亲和力和原始Eculizumab抗体相近,可特异性地阻断C5补体溶血活性和C5a产生,可用于制备针对以C5为靶标的阵发性睡眠性血红蛋白尿及非典型溶血尿毒综合症的治疗药物,具有优异的临床治疗价值。

本申请要求申请日为2019年7月11日,申请号为201910623477.8,发明名称为“低免疫原性低ADCC/CDC功能的抗C5人源化单抗及其应用”的中国专利申请的优先权。

技术领域

本发明涉及治疗用工程抗体的制备及应用,主要是涉及针对人C5靶点的低免疫原性低ADCC/CDC功能的单抗及其应用。

背景技术

Eculizumab能特异性地键合到人末端补体蛋白C5,通过抑制人补体C5向C5a和C5b的裂解以阻断炎症因子C5a的释放及C5b-9的形成。C5是在炎症反应中起重要作用的一种补体组分,在先天免疫防御中起重要作用,但是过分激活补体会导致严重的组织伤害。C5a是补体激活的重要产物之一,参与败血症、脓血症、急性肺损伤、过敏症及哮喘等许多炎症及自身免疫类疾病的发生与发展。使用C5a单抗阻断信号通路,可有效减轻炎症反应,为治疗炎症及自身免疫类疾病提供了新的思路。前体蛋白C5在C5转化酶的作用下裂解为C5a和C5b两个片段,补体系统活化产物C5a是一种过敏毒素,是炎症反应的重要介质和趋化因子;C5b则参与形成膜攻击复合物。C5a单抗具有三大适用范围:一是抑制机体急性反应,急性炎症,如急性肺损伤,;二是慢性的自身免疫性疾病,如治疗HS(化脓性汗腺炎)。“药物”阿达木,2017年销售了182亿美元,其有效性是10%,而C5a单抗的有效性超过80%;三是与PD-1联合使用,能够治疗肿瘤。

Eculizumab单抗在宿主体内免疫原性较强,高达23%以上的患者使用该单抗会发生免疫反应,所述免疫反应可能引起免疫复合物介导的抗体或片段从循环中清除,并使反复投药不适用于治疗,从而降低对患者的治疗效益且限制抗体的再投予。基于此,若能够在不影响抗体亲和力和特异性的前提下,通过将抗体中高免疫原性的非抗原结合位点替换成低免疫原性的同源序列来降低抗体药的免疫原性,则一方面可使单抗的安全性得到提高;另一方面可增加药物半衰期,在减少其用剂量同时也能起到提高疗效的作用。同时,受限于其免疫原性的问题,Eculizumab单抗采用的是静脉注射的给药方式,药物通过静脉注射方式给药往往半衰期较短。因此,通过对免疫原性的改造可将给药方式转变为更加简易便捷的皮下注射,实现在患者在家中自助给药,并有效提升药物在体内的半衰期。目前未见低免疫原性C5抗体的报道。

抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(antibody-dependent cell-mediatedcytotoxicity,ADCC)是指表达IgG Fc受体的NK细胞、巨噬细胞和中性粒细胞等,通过与已结合在靶细胞表面的IgG抗体的Fc段结合,而杀伤这些靶细胞的作用。IgG抗体可介导这些细胞发挥ADCC作用,其中NK细胞是能发挥ADCC作用的主要细胞。在抗体介导的ADCC作用的发生过程中,抗体只能与靶细胞上的相应抗原表位特异性结合,而NK细胞等效应细胞可杀伤任何已与抗体结合的靶细胞,故抗体与靶细胞上的抗原结合是特异性的,NK细胞等对靶细胞的杀伤作用是非特异性的。

CDC指补体系统被激活后,在靶细胞表面形成MAC,导致靶细胞溶解,这种效应称为补体依赖的细胞毒作用。补体能导致多种细菌和其他病原生物细胞的溶解,是机体抵抗病原生物感染的重要防御机制。尤其是对防止革兰阴性菌的感染有重要作用。在某些病例情况下,补体系统可引起机体组织或细胞损伤,参与超敏反应和自身免疫病的致病过程。

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