[发明专利]里氏木霉突变株和蛋白质的制造方法

说明书

本发明是具有包含序列号2所示的氨基酸序列的多肽的功能缺损或降低了的突变的里氏木霉(Trichoderma reesei)的突变株，以及通过培养该突变株来高产蛋白质的方法。

技术领域

本发明涉及蛋白质制造能力提高的里氏木霉(Trichoderma reesei)的突变株和使用该突变株的蛋白质的制造方法。

背景技术

已知里氏木霉(Trichoderma reesei)具有高的蛋白质制造能力，到目前为止已经进行了使用相同丝状菌的蛋白质的制造的研究。里氏木霉(Trichoderma reesei)在蛋白质之中特别是制造被分类为糖化酶的纤维素酶的能力优异，例如为了进一步提高纤维素酶制造量，进行了控制纤维素酶制造的因子的过表达、缺损。

非专利文献1中，在里氏木霉(Trichoderma reesei)的控制纤维素酶的制造的因子之中，通过使作为抑制纤维素酶的制造的转录因子的Cre1的功能降低，获得了具有高的纤维素酶制造能力的里氏木霉(Trichoderma reesei)的突变株。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1:Juliano P，Single nucleotide polymorphism analysis of aTrichoderma reesei hyper-cellulolytic mutant developed in Japan，Bioscience，Biotechnology，and Biochemistry,Volume 77，2013，Issue 3，P534-543

发明内容

发明要解决的课题

如上所述，作为控制里氏木霉(Trichoderma reesei)的蛋白质制造的因子之一的转录因子已经被阐明，但考虑这不过是控制机制的一部分。因此本发明中，以探索控制里氏木霉(Trichoderma reesei)的蛋白质制造的新因子、获得蛋白质制造能力被进一步强化的里氏木霉(Trichoderma reesei)的突变株和提供使用该里氏木霉(Trichoderma reesei)的突变株的蛋白质的制造方法为课题。

用于解决课题的手段

本发明者考虑，如果能够阐明到目前为止未知的能够增加蛋白质的生产量的新控制因子，则能够进一步提高里氏木霉(Trichoderma reesei)的蛋白质的制造量，从而进行了深入研究，结果发现，通过培养包含序列号2所示的氨基酸序列的多肽的功能缺损或降低了的里氏木霉(Trichoderma reesei)的突变株，能够提高蛋白质制造能力，从而完成了本发明。

即，本发明由以下(1)～(6)构成。

(1)里氏木霉(Trichoderma reesei)的突变株，具有包含序列号2所示的氨基酸序列的多肽的功能缺损或降低的突变。

(2)根据(1)所述的突变株，所述突变是包含序列号2所示的氨基酸序列的多肽的糖基转移酶_GTP_型结构域缺损的突变。

(3)根据(2)所述的突变株，所述突变是序列号2所示的氨基酸序列的从N末端侧起第1523位的谷氨酸残基中的终止密码子突变。

(4)蛋白质的制造方法，包括：培养(1)～(3)的任一项所述的突变株的工序。

(5)纤维素酶的制造方法，包括：培养(1)～(3)的任一项所述的突变株的工序。

(6)糖的制造方法，包括：通过(5)所述的纤维素酶的制造方法来制造纤维素酶的工序，

和使用通过上述工序得到的纤维素酶对含纤维素的生物质进行糖化的工序。

发明的效果