[发明专利]一种快速鉴定罂粟的SSR试剂盒有效
申请号: | 201910362343.5 | 申请日: | 2019-04-30 |
公开(公告)号: | CN110004247B | 公开(公告)日: | 2022-04-26 |
发明(设计)人: | 梁琼;杨路路;张燕君;袁芳 | 申请(专利权)人: | 中国科学院武汉植物园 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所(普通合伙) 42001 | 代理人: | 黄瑞棠 |
地址: | 430074 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 鉴定 罂粟 ssr 试剂盒 | ||
本发明公开了一种快速鉴定罂粟的SSR试剂盒,涉及分子鉴定技术领域。本SSR试剂盒包括一套用于检测罂粟及其近缘物种的分子标记、PCR扩增试剂和毛细管电泳检测试剂。所述的一套用于检测罂粟及其近缘物种的分子标记,包括M13公共荧光引物及3个特异性引物组;所述的PCR扩增试剂包括2×Taq PCR Master Mix、ddH2O;所述的毛细管电泳检测试剂包括HI‑DI FORMAMIDE BOTTLE和LIZ500。利用试剂盒对罂粟同种、同属、同科及其他物种植物进行鉴定。与现有技术相比,本发明在鉴别罂粟与其近缘种植物方面具有更高的种属特异性和更强的准确率。
技术领域
本发明涉及分子鉴定技术领域,尤其涉及一种快速鉴定罂粟的SSR试剂盒。
背景技术
罂粟(Papaver somniferum L.)为罂粟科(Papaveraceae)罂粟属(Papaver L.)一年生草本植物,是制取鸦片的主要原料,其提取物是吗啡、蒂巴因、可待因、罂粟碱和那可丁等多种镇静剂的来源。罂粟与大麻、古柯一同被联合国禁毒公约列为世界三大毒品原植物。罂粟属约100种,主产于中欧、南欧至亚洲温带,少数种产于美洲、大洋洲和非洲南部。我国有7种3变种和3变型,分别是罂粟(P.somniferum L.)、鬼罂粟(Papaver orientale L.)、虞美人(Papaver rhoeas L.)、黑环罂粟(Papaver pavoninum Fisch.et Mey.)、野罂粟(Papaver nudicaule L.)、灰毛罂粟(Papavercanescens A.Tolm.)、长白山罂粟(Papaverradicatum Rottb.)、光果野罂粟(Papaver nudicaule var.aquilegioides)、白花黑环罂粟(Papaver pavoninum f.album X.J.)、毛果野罂粟(Papaver nudicaule f.seticarpum(P.Y.Fu)H.)和黑水罂粟(Papaver nudicaule f.amurense(Busch)H.)。其主要分布于我国东北及西北部地区。罂粟属植物花型丰富,花色艳丽,常作为栽培观赏植物。苗期罂粟与多种近缘物种都较相似,极难分辨。成苗后,其花型与虞美人和鬼罂粟的花型最为相似。近缘物种间表型的相似性为罂粟的鉴定及相关案件的侦破带来困难。
简单重复序列SSR(Simple Sequence Repeats)标记是由1-8bp的核心序列串联重复多次组成的寡核苷酸序列,是发展比较成熟的一种以特异引物PCR为基础的分子标记技术。基于NCBI中罂粟EST序列及二代测序技术,罂粟基因组中SSR位点得到了大量的开发,为SSR标记在罂粟属研究中的应用奠定了基础。罂粟种内及品种间的遗传多样性研究表明罂粟种内存在丰富的遗传变异,同时其表型上丰富的花色、花型及果荚数的变异也印证了这一点。罂粟的鉴定既要表现其种间的差异性又要兼顾其种内的保守性。与其它分子标记相比,SSR标记具有多态性丰富、位点广泛覆盖基因组、片段简单、扩增容易且稳定、检测自动化等优点,非常适合物种的鉴定,其目前已被广泛应用到法庭科学实践中进行个体识别和亲子鉴定。
发明内容:
本发明的目的是提供一种快速鉴定罂粟的SSR试剂盒。
本发明的目的是这样实现的:
使用M13公共荧光引物及3个特异性引物组来检测罂粟,并找到罂粟特有的扩增片段组合作为罂粟与其他近缘植物的差异片段,由此特异性片段组合来区分罂粟及其近缘物种。此发明提高罂粟种属鉴别的准确性,避免近缘物种的干扰,是一种准确、快速和可靠鉴别罂粟及其近缘物种的方法。
具体地说:
一、快速鉴定罂粟的SSR试剂盒
快速鉴定罂粟的SSR试剂盒包括一套用于检测罂粟及其近缘物种的分子标记、PCR扩增试剂和毛细管电泳检测试剂。
1、一套用于检测罂粟及其近缘物种的分子标记
包括M13公共荧光引物及3个特异性引物组,其引物序列为:
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院武汉植物园,未经中国科学院武汉植物园许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910362343.5/2.html,转载请声明来源钻瓜专利网。