[发明专利]非洲猪瘟病毒化学发光试剂盒

权利要求书

1.非洲猪瘟病毒化学发光试剂盒，包括微流控芯片(1)、稀释液、10×洗涤液、酶标抗体、化学发光底物、阳性对照血清以及阴性对照血清，其特征在于：微流控芯片(1)包括依次连通的进样区(11)、样本处理区(12)、检测区(13)和出样区(14)；进样区(11)上设有定量环(15)，进样区(11)通过定量环(15)与样本处理区(12)连通；检测区(13)包括阳性对照区(131)、阴性对照区(133)、空白对照区(132)和反应区(134)，阳性对照区(131)内包被有鼠抗猪IgG抗体，空白对照区(132)内包被有pH＝7.8的PBS缓冲液，阴性对照区(133)内包被有非洲猪瘟病毒重组抗原，反应区(134)内包被有非洲猪瘟病毒重组抗原，样本处理区(12)分别与阳性对照区(131)、阴性对照区(133)、空白对照区(132)和反应区(134)连通，样本处理区(12)与出样区(14)连通，出样区(14)上设有排空阀(16)；进样区(11)的数量为3个，出样区(14)的数量为1个，检测区(13)中的阳性对照区(131)、阴性对照区(133)和空白对照区(132)的数量分别为1个，反应区(134)的数量至少为2个，阳性对照区(131)和阴性对照区(133)分别使用一个进样区(11)，空白对照区(132)和反应区(134)共用进样区(11)和出样区(14)；微流控芯片(1)还包括缓冲溶液池(17)和洗涤液池(18)以及加药池(19)，缓冲溶液池(17)内设有用于处理样本的稀释液，洗涤液池(18)内设有用于处理样本的10×洗涤液，缓冲溶液池(17)和洗涤液池(18)分别与样本处理区(12)连通，加药池(19)与检测区(13)连通；阳性对照血清为重组蛋白VP73和p54分别免疫猪获得的血清，阴性对照血清为非免疫健康猪血清，酶标抗体为辣根过氧化物酶标记的鼠抗猪IgG抗体，化学发光底物为鲁米诺。

2.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒化学发光试剂盒，其特征在于：稀释液为含5％(v/v)的细胞裂解液的PBS缓冲液，pH＝7.8。

3.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒化学发光试剂盒，其特征在于：10×洗涤液为含0.5％(v/v)Tween-20的PBS缓冲液，pH＝7.8。

4.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒化学发光试剂盒，其特征在于：重组蛋白VP73血清的获得方式为：将非洲猪瘟病毒的VP73基因插入到原核载体pET-30a(+)，转化大肠杆菌BL21，用IPTG诱导重组蛋白表达。

5.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒化学发光试剂盒，其特征在于：重组蛋白p54血清的获得方式为：将非洲猪瘟病毒的p54基因插入到原核载体pET-30a(+)，转化大肠杆菌BL21，用IPTG诱导重组蛋白表达。