[发明专利]新型抗体分子、其制备方法及其用途

权利要求书

1.一种抗体分子，其包含(i)单结构域抗原结合位点；(ii)结合抗原的Fab片段；其中所述(i)位于所述(ii)的免疫球蛋白CH1结构域的C端，且所述(i)和(ii)分别结合不同的抗原，所述(i)和(ii)之间具有或者不具有连接肽；以及位于所述(i)和(ii)的C端的(iii)免疫球蛋白Fc结构域；

其中所述抗体分子是包含四条多肽链的抗体分子，其中第一多肽链和第三多肽链中的每一多肽链包含免疫球蛋白轻链；第二多肽链和第四多肽链中的每一多肽链从N端至C端包含免疫球蛋白重链可变区、免疫球蛋白CH1结构域、单结构域抗原结合位点、免疫球蛋白CH2、CH3和任选地CH4结构域；

所述抗体分子是抗OX40/PD-L1双特异性抗体，其中(i)单结构域抗原结合位点特异性结合PD-L1分子，且包含SEQ ID NO:3所示的CDR1、SEQ ID NO:4所示的CDR2和SEQ ID NO:5所示的CDR3；(ii)结合抗原的Fab片段特异性结合OX40分子，且包含衍生自抗OX40抗体的SEQ ID NO:11/7所示的成对重链可变区序列/轻链可变区序列。

2.根据权利要求1所述的抗体分子，其中所述免疫球蛋白是IgG1、IgG2或IgG4免疫球蛋白。

3.根据权利要求2所述的抗体分子，其中所述免疫球蛋白是人IgG1免疫球蛋白。

4.根据权利要求2所述的抗体分子，其中所述免疫球蛋白的轻链型别是κ型或λ型。

5.根据权利要求1所述的抗体分子，其中所述抗体分子的重链彼此通过铰链区处的二硫键稳定缔合。

6.根据权利要求5所述的抗体分子，其中所述抗体分子的重链在Fc结构域中包含具有“CPPC”氨基酸残基的铰链区，从而所述重链彼此通过所述铰链区处氨基酸残基之间形成的二硫键稳定缔合。

7.根据权利要求5所述的抗体分子，其中所述抗体分子的重链在各自的Fc结构域中还分别包含根据Kabat的“EU编号”的Y349C和S354C或者S354C和Y349C，从而所述抗体分子的重链彼此在Fc区进一步形成链间二硫键。

8.根据权利要求1所述的抗体分子，其中所述Fc结构域中还包含影响抗体效应子功能的突变。

9.根据权利要求8所述的抗体分子，其中所述Fc结构域中还包含LALA突变。

10.根据权利要求1所述的抗体分子，其中所述抗体分子的重链在各自的Fc结构域中分别包含凸起或空穴，并且一条重链Fc结构域中的所述凸起或空穴可分别置于另一条重链Fc结构域中的所述空穴或凸起中，由此所述抗体分子的重链彼此形成“结入扣”的稳定缔合。

11.根据权利要求1－10中任一项所述的抗体分子，其中所述免疫球蛋白CH1结构域和轻链恒定结构域CL中分别包含凸起或空穴，并且CH1结构域中的所述凸起或空穴可分别置于CL结构域中的所述空穴或凸起中，由此所述抗体分子的重链和轻链彼此形成“结入扣”的稳定缔合。

12.根据权利要求1所述的抗体分子，其中所述连接肽是单独或组合使用的甘氨酸和/或丝氨酸残基。

13.根据权利要求12所述的抗体分子，其中所述连接肽包含氨基酸序列(Gly₄Ser)n，其中n是等于或大于1的正整数。

14.根据权利要求13所述的抗体分子，其中所述连接肽包含氨基酸序列(Gly₄Ser)n，其中n是1－7中的正整数。

15.根据权利要求14所述的抗体分子，其中所述连接肽包含氨基酸序列(Gly₄Ser)n，其中n是2。