[发明专利]绿豆蛋白肽-锌螯合物的制备方法有效
| 申请号： | 201811404501.0 | 申请日： | 2018-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN109439715B | 公开（公告）日： | 2020-09-01 |
| 发明（设计）人： | 王长远;张舒;富天昕;冯玉超;李雪;盛亚男 | 申请（专利权）人： | 黑龙江八一农垦大学 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C07K1/34;A23L33/18 |
| 代理公司： | 大庆禹奥专利事务所 23208 | 代理人： | 朱士文;杨晓梅 |
| 地址： | 163000 黑龙江*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 绿豆 蛋白 锌螯合物 制备 方法 | ||
1.一种绿豆蛋白肽-锌螯合物的制备方法，其特征在于：是以绿豆蛋白为原料，经蛋白酶水解后获得绿豆蛋白肽水解液，绿豆蛋白肽水解液中的多肽冷冻干燥后，与锌螯合反应得到绿豆蛋白肽-锌螯合物，所述蛋白酶为碱性蛋白酶；还包括对绿豆蛋白肽水解液进行超滤分级，筛选出3-5ku肽段进行后续螯合反应，所述的螯合反应的条件为多肽与锌质量比3:1-7:1、pH4-8、温度30-70℃、反应时间40-120 min；该方法包括以下步骤：取50 g绿豆蛋白溶于1.25 L的去离子水中，先与90 ℃水浴锅中预处理15分钟，待温度降至55 ℃后用0.5mol/L NaOH调pH至9，加入4ml碱性蛋白酶，用0.5 mol/L的NaOH保持pH为9，水解4 h后沸水浴灭酶，将水解液冷却至室温，用1mol/L HCL调节pH值到7后于5000r/min 离心15 min，取上清液；将上清液在0.25 MPa压力下超滤，依次用透过分子质量为5，3ku的超滤膜超滤，得到分子质量为3-5ku 的绿豆蛋白肽滤出液，将分级后的肽段透过液冻干后备用；将6.08g绿豆蛋白肽溶于121.6 ml去离子水中配成底物浓度为5%的肽液，用1mol/L HCL调节pH至6.31，后加入1g ZnSO4•7H2O，涡旋混匀，进行螯合反应，反应温度为50.32 ℃，反应时间为80.99 min，反应结束后将溶液冷却至室温，用三倍无水乙醇醇沉，待沉淀析出，用10000r/min离心15min，收集沉淀，用无水乙醇洗涤至上清液加入锌指示剂不变色；烘箱先调温度到100℃烘1h，然后降到30℃烘螯合物至干，得到螯合率高的绿豆蛋白肽-锌螯合物。
2.根据权利要求1所述的绿豆蛋白肽-锌螯合物的制备方法，其特征在于：所述的螯合反应的条件为肽与锌质量比6.08:1、pH6.31、温度 50.32℃、反应时间80.99 min。
3.根据权利要求1所述的绿豆蛋白肽-锌螯合物的制备方法，其特征在于：所述的绿豆蛋白肽-锌螯合物在促进锌吸收中的应用。
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