[发明专利]毛囊干细胞提取物冻干粉的制备方法及应用

说明书

本发明涉及一种毛囊干细胞提取物冻干粉的制备方法，所述方法包括以下步骤：(1)采集人的毛发，进行提取和分离后得到毛囊干细胞；(2)对所述毛囊干细胞进行传代培养，分离得到毛囊干细胞提取物；(3)将所述毛囊干细胞提取物与冻干保护剂混合后，冷冻干燥得到毛囊干细胞提取物冻干粉。得到的冻干粉具有良好的外观性状。其溶解性较好，动物实验证明其刺激性小，安全性高，使用可靠，并具有较好的生物活性，可用于创伤修复、皮肤再生和头发再生。该制备方法操作简单有效，能够实现毛囊干细胞提取物冻干粉的产业化利用。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种毛囊干细胞提取物冻干粉的制备方法，以及该冻干粉的应用。

背景技术

干细胞(stemcell，SC)是指具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的原始细胞。根据分化能力可分为胚胎干细胞(embryonicstemcells，ESCs)和成体干细胞(adultstemcells，ASCs)。胚胎干细胞即全能型干细胞，在分化能力上最具研究价值。但其来源于胚胎，势必存在着伦理方面和安全性方面的问题，所以胚胎干细胞在应用上受到了限制。成体干细胞虽在分化能力上弱于胚胎干细胞，但其避开了伦理方面和安全性方面的问题，且自身成体干细胞移植还可解决免疫排斥问题，避免了长期应用免疫抑制剂所造成的伤害，所以在临床应用上，成体干细胞优于胚胎干细胞。

成体干细胞主要存在于能自我更新的组织和器官中，皮肤组织更新和再生能力强，而毛囊作为其附属器官，终身保持着周期性生长和自我更新的能力。研究表明，毛囊是目前为止存在于胚胎组织之外唯一的类胚胎组织，兼有胚胎干细胞和成体干细胞的优点。毛囊中存在着大量多潜能干细胞，可经体外诱导分化为平滑肌细胞、神经元细胞、神经胶质细胞和黑色素细胞等。所以毛囊干细胞(hairfolliclestemcells，HFSC)的研究越来越受到人们的关注。

毛囊属于皮肤的附属成分，是由表皮下陷形成的。由上皮性毛根鞘及结缔组织鞘所构成，位于毛发的下段并且包围着毛根。毛囊上附有立毛肌，并与皮脂腺相连，同时汗腺也开口于毛囊。上皮性毛根鞘的细胞起源于表皮，结缔组织鞘起源于真皮。上皮性毛根鞘是由皮肤的表皮层下凹深入真皮、皮下脂肪层而成，作为表皮的延续部分而包绕毛发，由内向外依次分为鞘小皮、内根鞘和外根鞘，外根鞘相当于表皮的基底层和棘细胞层。在毛干上部外毛根鞘细胞增殖，并且形成隆起，成为毛发上段的标记，目前被认为是毛囊干细胞存在的主要部位。毛囊干细胞可能是表皮细胞的祖细胞，对各种皮肤疾病的细胞代替治疗和基因治疗方面的研究有重要意义。

干细胞提取物一般是指干细胞培养液的上清液或细胞裂解液。其细胞培养液上清液含有大量的具有多种生物活性的蛋白质、多肽及细胞因子，它们参与细胞结构的维持运动信息交流以及组织修复与再生，具有较好的抗光老化、抗氧化、抗皱、美白肌肤、伤口愈合、细胞修复等功效。因此，随着干细胞提取物的应用价值越来越受到人们的关注，如何获得大量的，质量稳定可控的干细胞提取物成为人们致力研究的问题。目前已存在将胎盘干细胞制成冻干粉的报道，但关于毛囊干细胞的提取和研究还在起步中。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种毛囊干细胞提取物冻干粉的制备方法。

本发明的第二目的在于提供该冻干粉的应用。

为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

本发明涉及一种毛囊干细胞提取物冻干粉的制备方法，所述方法包括以下步骤：

(1)采集人的毛发，进行提取和分离后得到毛囊干细胞；

(2)对所述毛囊干细胞进行传代培养，分离得到毛囊干细胞提取物；

(3)将所述毛囊干细胞提取物与冻干保护剂混合后，冷冻干燥得到毛囊干细胞提取物冻干粉。