[发明专利]毛囊干细胞提取物冻干粉的制备方法及应用

权利要求书

1.一种毛囊干细胞提取物冻干粉的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)采集人的毛发，进行提取和分离后得到毛囊干细胞；

(2)对所述毛囊干细胞进行传代培养，分离得到毛囊干细胞提取物；

(3)将所述毛囊干细胞提取物与冻干保护剂混合后，冷冻干燥得到毛囊干细胞提取物冻干粉。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，在无菌条件下，剪取头发毛囊根部，用含有双抗的磷酸盐缓冲溶液冲洗后，接种于含有双抗的无血清培养基中进行培养，待细胞密度为80％～90％时，即得到原代毛囊干细胞。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述双抗为青霉素和链霉素，所述磷酸盐缓冲液为PBS缓冲液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，对所述毛囊干细胞进行传代培养，收集第3～18代的细胞培养上清液，即为毛囊干细胞提取物。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，将所述毛囊干细胞提取物与冻干保护剂混合均匀后，用孔径为0.22μm的无菌过滤器过滤除菌，然后冷冻干燥，得到毛囊干细胞提取物冻干粉。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述冻干保护剂为海藻糖和/或牛血清白蛋白，其在所述毛囊干细胞提取物冻干粉中的质量百分含量为5％～10％。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述冻干保护剂中，海藻糖与牛血清白蛋白的质量比为(5～10)：1。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述冷冻干燥的操作过程为：在-80℃下预冻10～15h，然后在-30℃下保温1～2h，接着在-5℃，真空度为1.0×10^-2～1.5×10^-2mbar条件下冻干10～15h。

9.一种毛囊干细胞提取物冻干粉，其特征在于，所述冻干粉通过权利要求1至8任一项所述方法制备得到。

10.权利要求9所述冻干粉的应用，其特征在于，所述冻干粉用于创伤修复、皮肤再生和头发再生。