[发明专利]一种具有强催化活性的多巴脱羧酶同源物及其制备与应用有效

专利信息
申请号: 201811031570.1 申请日: 2018-09-05
公开(公告)号: CN109182320B 公开(公告)日: 2020-10-20
发明(设计)人: 杜志强;沈秀丽;任乾;王凯 申请(专利权)人: 内蒙古科技大学
主分类号: C12N9/88 分类号: C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12P13/00;A23K20/189;A61K38/51;A61P31/00;A61P25/16;A61P25/22;A61P25/24
代理公司: 武汉华强专利代理事务所(普通合伙) 42237 代理人: 温珊姗
地址: 014010 内蒙古*** 国省代码: 内蒙古;15
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摘要:
搜索关键词: 一种 具有 催化 活性 脱羧酶 同源 及其 制备 应用
【权利要求书】:

1.一种多巴脱羧酶同源物,其特征在于:氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.编码权利要求1所述的多巴脱羧酶同源物的基因,其特征在于:所述的基因的开放阅读框的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.权利要求1所述的多巴脱羧酶同源物的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:

(1)以提取的克氏原螯总RNA作为模板,以5’-CTACTGCAAAAGCGGGAG-3’作为反转录引物进行反转录PCR得到cDNA;

(2)以cDNA作为模板进行PCR扩增获得含权利要求1所述多巴脱羧酶同源物编码序列的核苷酸片段,PCR扩增引物如下:

F:5′-NnATGGACGCCGATCAGTTCAG-3′,

R:5′-NnCTACTGCAAAAGCGGGAG-3′,

其中,Nn由保护碱基和限制性内切酶酶切位点组成;

(3)步骤(2)的扩增产物与原核表达载体通过酶切、连接、转化,构建可表达重组多巴脱羧酶同源物的大肠杆菌工程菌;

(4)步骤(3)构建的大肠杆菌工程菌通过诱导培养,表达出重组多巴脱羧酶同源物。

4.权利要求1所述的多巴脱羧酶同源物在制药中的应用,其特征在于:在制备催化左旋多巴转化成多巴胺的药物中的应用;在制备增强克氏原螯虾血细胞包囊能力的药物中的应用;在制备增强克氏原螯虾体机体抗氧化能力的药物中的应用;在制备细菌抑菌剂中的应用。

5.一种药物,其特征在于:包含权利要求1所述的多巴脱羧酶同源物,所述药物为下述药物中的任一种:催化左旋多巴转化成多巴胺的药物;增强克氏原螯虾血细胞包囊能力的药物;增强克氏原螯虾体机体抗氧化能力的药物;细菌抑菌剂。

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