[发明专利]一种加速物种突变的新育种方法

权利要求书

1.一种加速物种突变的新育种方法，其特征在于，通过基因工程手段，对真核生物中负责DNA复制和/或遗传稳定性的基因进行定点突变，使得该基因功能缺失或减弱，从而提高育种对象在生长和发育过程中的突变率，并从中筛选出具备所需性状的突变体；再通过基因工程手段，将突变体中相应的负责DNA复制和/或遗传稳定性，且发生功能缺失或减弱的基因进行定点突变，使得该基因的功能重新恢复，即获得具备所需性状的新品种；

所述育种对象包括植物的体细胞、愈伤组织、花药和原生质体；

供筛选的突变体包括整株植物或植物的器官、组织、芽、胚、愈伤组织、花药和原生质体；

所述负责DNA复制和/或遗传稳定性的基因包括以下几类：涉及DNA复制中起校对功能的基因；涉及DNA修复的基因，包括错配修复基因、核苷酸切除修复基因、碱基切除修复基因；涉及细胞活性氧平衡的基因；涉及细胞周期的关卡基因；

其中，所述涉及DNA复制中起校对功能的基因，包括真核生物DNA聚合酶基因Pol α、Polβ、Pol γ、Pol I、Pol δ、Pol ε、Pol σ、Pol ζ、Pol λ、Pol μ、Pol ι、Pol κ、Pol η；

所述错配修复基因包括真核生物的MSH及其同源基因、MLH及其同源基因、PMS及其同源基因；

所述碱基切除修复基因包括DNA糖基化酶基因、AP内切核酸酶基因；

所述核苷酸切除修复基因包括真核生物的GC-NER和TC-NER基因、CSA、CSB、RPA、RAD、ERCC、XPA-XPG基因；

所述涉及细胞活性氧平衡的基因包括超氧化物歧化酶基因、过氧化氢酶基因、谷胱甘肽过氧化物酶基因；

所述涉及细胞周期的关卡基因包括ATM丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因，ATR丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因，p53基因。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述基因工程手段包括CRISPR/Cas基因编辑技术、锌指核酸酶基因编辑技术、转录激活因子样效应物核酸酶基因编辑技术。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在筛选突变体的过程中辅以低剂量的诱变措施。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述DNA糖基化酶基因包括Uracil-DNA糖基化酶基因家族、Nth家族、Fgp家族；所述AP内切核酸酶基因包括Xth家族、Nfo家族、PALF家族。