[发明专利]一种模拟移动床色谱法分离纯化朝鲜蓟中洋蓟酸和绿原酸的方法

说明书

本发明公开了一种模拟移动床色谱法分离纯化朝鲜蓟中洋蓟酸和绿原酸的方法，SMBC分离技术能够连续进料，分离度高，处理量大，可以提高填料与流动相的利用率，降低纯化成本，属于绿色环保分离纯化过程。本发明利用十八烷基硅烷键合硅胶作为固定相实现了对朝鲜蓟中洋蓟酸及绿原酸的高精度分离，分离得到的产品经标准曲线计算其质量分数均达到75％以上，收率大于60％以上；SMBC分离洋蓟酸及绿原酸不但节约了大量溶剂，同时还提高了生产效率，实现了低碳环保的节约化生产；本发明同时结合乙醇回流提取法和大孔树脂柱层析除杂法，降低用水量，降低能耗，无需絮凝除杂，固定相无需专门再生，减少废水排放，工艺简单。

技术领域

本发明属于天然植物有效组份的提取纯化技术领域，具体涉及一种模拟移动床色谱法分离纯化朝鲜蓟中洋蓟酸和绿原酸的方法。

背景技术

朝鲜蓟Cynara scolymus L.，别名菊蓟、菜蓟、洋蓟、法国百合、荷花百合，为菊科菜蓟属多年生草本植物。朝鲜蓟原产地中海沿岸，是由菜蓟C.cardunculus L.演变而成。朝鲜蓟以意大利栽培最多，意大利的产量占全球的50％，其次为西班牙和阿根廷。朝鲜蓟具有很高的营养价值，是一种高档保健蔬菜，其叶含有洋蓟酸(Cynarin，1,5-二咖啡酰奎宁酸)、绿原酸等具有保肝、护肝、降低胆固醇作用的天然活性成分。现代中药研究趋势是有针对性地将活性成分单独提取出来用于临床，以期获得更为明确的疗效，这需要纯化各种不同的高纯度活性成分。色谱法是朝鲜蓟不同活性成分的有效分离手段，如大孔吸附树脂、聚酰胺、硅胶、葡聚糖凝胶、C18及混合树脂色谱法等均可用于从朝鲜蓟中提取洋蓟酸和绿原酸等，但是现有的色谱分离朝鲜蓟中不同活性成分的过程为间歇式批处理过程，处理量小，流动相耗量大，效率低。例如在现有的提取分离纯化洋蓟酸和绿原酸的工艺中，柱层析分离纯化为关键步骤，但树脂用量大，利用率低，再生周期长，产生大量废水，大多数为间歇式操作。

模拟移动床色谱(Simulated Moving Bed Chromatography，SMBC)技术将色谱技术与模拟移动床技术相结合，既保留了色谱的高分离度、低能耗、低物耗、常温运行等优点，又引进了模拟移动床技术的连续、逆流、精馏、回流等机制。与传统的制备色谱技术相比，SMBC作为连续色谱技术中的适于工业化大规模生产的一类，以其操作连续化、流动相耗量少、易于自动化操作、制备效率高、制备量大等优点受到了广泛重视。该技术在分离过程中连续进样，固定相和流动相能够反复使用，回收率高，而且分离度得到进一步提高，是精细化工领域的高端分离手段，尤其在同分异构体分离、手性对映体分离，以及高品质产品提纯中发挥重要作用。但目前关于利用模拟移动床色谱技术分离朝鲜蓟中不同活性成分的方法还未见报道。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了一种模拟移动床色谱法分离纯化朝鲜蓟中洋蓟酸和绿原酸的方法，结合乙醇回流提取、柱层析除杂，用模拟移动床色谱(SMBC)色谱分离纯化洋蓟酸和绿原酸，再经过浓缩结晶得到洋蓟酸和绿原酸产品，实现了对朝鲜蓟中洋蓟酸及绿原酸的同时高精度分离纯化，生产效率高，低碳环保。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种模拟移动床色谱法分离纯化朝鲜蓟中洋蓟酸和绿原酸的方法，包括：

1)朝鲜蓟叶用5～15倍量的60～95％乙醇回流提取2～3次，每次2～3h，合并提取液，浓缩，加水水沉，除去不溶物，得到朝鲜蓟叶提取液；

2)采用大孔树脂柱层析法处理步骤1)得到的朝鲜蓟叶提取液：以1～2BV/h的体积流量上样；用1～3BV的含0.5～1.5wt％NaOH的水溶液洗脱杂质，用2～3.5BV的水洗至中性，用2～5BV的50～75％乙醇洗脱洋蓟酸和绿原酸，流动相流速为1～3BV/h；得到粗提液，粗提液中乙醇的体积含量不低于85％；

3)粗提液在40～60℃浓缩并回收乙醇，得到浓缩粗提液；

4)用模拟移动床色谱分离步骤3)得到的浓缩粗提液中的洋蓟酸和绿原酸，SMBC工作条件如下：