[发明专利]一种核酸蛋白纳米复合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种核酸蛋白纳米复合物，其特征在于，所述核酸蛋白纳米复合物包括核酸纳米结构、功能性蛋白和偶联试剂，所述功能性蛋白和偶联试剂相偶联后与核酸链连接，所述核酸纳米结构与捕获链连接，所述核酸链与捕获链通过碱基互补配对相连接；

其中，所述功能性蛋白为核糖核酸酶A，所述核酸链的序列为TTTTTTTTTTTTTTTACGC，所述捕获链的序列为GCGTAAAAAAAAAAAAAAA。

2.根据权利要求1所述的核酸蛋白纳米复合物，其特征在于，所述核酸纳米结构为通过DNA折纸术制备的二维和/或三维结构。

3.根据权利要求2所述的核酸蛋白纳米复合物，其特征在于，所述核酸纳米结构的形状为长方形、三角形或纳米管形中的任意一种。

4.根据权利要求3所述的核酸蛋白纳米复合物，其特征在于，所述核酸纳米结构的形状为长方形。

5.根据权利要求1所述的核酸蛋白纳米复合物，其特征在于，所述偶联试剂为4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐。

6.根据权利要求1所述的核酸蛋白纳米复合物，其特征在于，所述核酸链包括荧光基团。

7.根据权利要求6所述的核酸蛋白纳米复合物，其特征在于，所述荧光基团包括Cy5、Cy5.5、Cy3、Cy3.5、Cy2、异硫氰酸荧光素、羧基荧光素、四氯-6-羧基荧光素、六氯-6-甲基荧光素或2,7-二甲基-4,5-二氯-6-羧基荧光素中的任意一种。

8.根据权利要求7所述的核酸蛋白纳米复合物，其特征在于，所述荧光基团为Cy5。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的核酸蛋白纳米复合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：将功能性蛋白与偶联剂进行共价偶联，将偶联后的产物修饰上核酸链，将核酸纳米结构修饰上捕获链，然后将得到的连接有核酸链的功能性蛋白偶联产物与连接有捕获链的核酸纳米结构进行组装得到所述核酸蛋白纳米复合物。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体包括以下步骤：

(1)将捕获链修饰于核酸纳米结构，进行组装和纯化，得到捕获链修饰的核酸纳米结构；

(2)将功能性蛋白与偶联剂反应得到偶联剂修饰的功能性蛋白，将二硫键修饰的核酸链进行还原得到巯基修饰的核酸链，而后将偶联剂修饰的功能性蛋白与巯基修饰的核酸链反应得到核酸链功能性蛋白偶联产物；

(3)将步骤(1)得到的捕获链修饰的核酸纳米结构与步骤(2)得到的核酸链功能性蛋白偶联产物进行共组装，得到所述核酸蛋白纳米复合物。

11.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述核酸纳米结构以长脚手架链、短订书钉链和捕获链碱基互补配对得到。

12.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述长脚手架链、短订书钉链和捕获链的摩尔比为1:(5-10):(5-10)。

13.根据权利要求12所述的制备方法，其特征在于，所述长脚手架链、短订书钉链和捕获链的摩尔比为1:10:10。

14.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述功能性蛋白与偶联剂的摩尔比为1:10-50。

15.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述功能性蛋白与二硫键修饰的核酸链的摩尔比为1:2-10。