[发明专利]赤霉酸的制备方法

说明书

本发明提供了一种赤霉酸的制备方法，包括：S1)制备赤霉酸的种子液；S2)将赤霉酸的种子液转入发酵罐中进行发酵，得到赤霉酸发酵液；S3)将所述赤霉酸发酵液经膜过滤浓缩后，得到浓缩液；S4)将所述浓缩液精制后，得到赤霉酸。与现有技术相比，本发明在发酵过程中采用糖油混补，提高了产酸量，同时以玉米蛋白粉作为有机氮源，其蛋白质含量较高，达50％以上，能够实现赤霉素高密度发酵，且能够避免如花生饼粉产生黄曲霉的隐患，保证菌体的合成与代谢，使其能够快速稳定的发酵；再者，添加植物油不仅能够为发酵提供碳源，还可有效减少发酵气泡逃液等情况的发生，避免了物料损失、染菌等潜在风险。

技术领域

本发明属于发酵技术领域，尤其涉及一种赤霉酸的制备方法。

背景技术

赤霉酸是通过一种赤霉菌发酵培养代谢得到的一类次级代谢产物，被分离、鉴定和命名的一种有116种，其中在农业中应用最广泛的就是GA₃，在我国农业生产中发挥着巨大的作用。

GA₃具有非常高的植物调节活性，对各种农作物的生长和发育都有很明显的调节作用。在北方，GA₃主要应用于葡萄、红枣、山楂、油桃等经济作物上，在花期喷洒一定浓度赤霉酸溶液可以有效提高果树的坐果率，促进果实生长发育，果树产量提高20％～30％左右。在南方，赤霉酸主要应用于杂交水稻制种上，调节水稻父母本在同一时间开花，使母本授粉率大幅提高，进一步提高了杂交水稻种子的产量，降低了种子的生产成本，为农民减轻了负担。

现有赤霉酸的制备通常采用液体深层发酵法，在发酵过程中采用分批/流加豆油或葡萄糖等方式，得到的发酵产酸较高水平为2800～3000ppm，但其仍有待提高。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种赤霉酸的制备方法，该制备方法产量较高且稳定。

本发明提供了一种赤霉酸的制备方法，包括：

S1)制备赤霉酸的种子液；

S2)将赤霉酸的种子液转入发酵罐中进行发酵，得到赤霉酸发酵液；所述发酵罐中的发酵培养基，包括：玉米蛋白粉10～40g/L；磷酸二氢钾1～10g/L；小分子有机碳源5～30g/L；植物油0.5～5g/L；硫酸镁0.5～2g/L；硫酸铵0.5～2g/L；微量元素0.1～1g/L；在发酵过程中当溶氧高于20％～30％时，补加葡萄糖与植物油；

S3)将所述赤霉酸发酵液经膜过滤浓缩后，得到浓缩液；

S4)将所述浓缩液精制后，得到赤霉酸。

优选的，所述步骤S1)具体为：

A1)将冷冻保藏的GA₃菌种接入至种子培养基中进行摇瓶培养，得到悬浮液；所述种子培养基包括5～15g/L第一有机氮源、5～15g/L第一小分子有机碳源、1～5g/L磷酸二氢钾、0.1～1g/L硫酸镁与0.1～1g/L聚丙二醇；

A2)将所述悬浮液转入种子罐中进行发酵培养，得到种子液；所述种子罐的培养基包括5～15g/L第二有机氮源、5～15g/L第二小分子有机碳源、1～5g/L磷酸二氢钾、0.1～1g/L硫酸镁与0.1～1g/L聚丙二醇。

优选的，所述步骤A2)还包括：

发酵培养后，转入二级种子罐中继续发酵培养，得到种子液；所述二级种子罐的培养基包括5～15g/L第三有机氮源、5～15g/L第三小分子有机碳源、1～5g/L磷酸二氢钾、0.1～1g/L硫酸镁与0.1～1g/L聚丙二醇。

优选的，所述第一有机氮源、第二有机氮源与第三有机氮源各自独立地选自大豆蛋白、花生饼粉、棉籽饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉与鱼粉中的一种或多种；