[发明专利]一种ABCG2单克隆抗体及其用途

说明书

公开了兼具抗肿瘤及逆转肿瘤抗药性作用的ABCG2单克隆抗体及其在作为新型抗肿瘤药物中的用途。还公开了一种新的抗原序列，其用于诱导产生针对ABCG2的单克隆或者多克隆抗体的产生。另外，公开了产生兼具抗肿瘤及逆转肿瘤抗药性作用的ABCG2单克隆抗体的杂交瘤。

技术领域

本发明涉及分子生物学和肿瘤学领域，具体涉及一种ABCG2单克隆抗体及其用途，进一步地，本发明涉及兼具抗肿瘤及逆转肿瘤抗药性作用的ABCG2单克隆抗体及其在作为新型抗肿瘤药物中的用途。本发明还涉及一种新的抗原序列，其用于诱导产生针对ABCG2的单克隆或者多克隆抗体的产生。另外，本发明涉及产生兼具抗肿瘤及逆转肿瘤抗药性作用的ABCG2单克隆抗体的杂交瘤。

背景技术

多药耐药性(multidrug resistance，MDR)是指对一种药物具有耐药性的同时，对其他结构不同，作用靶点不同的抗肿瘤药物也具有耐药性。其产生可以存在于化疗之前(即固有性耐药)，也可以在化疗之中产生(即获得性耐药)。迄今，对于耐药的发生机制的了解仍然十分有限，通过细胞膜上的ATP-结合域(ATP-binding cassette，ABC)转运超家族增加抗癌药物从肿瘤细胞的流出率是最主要的机制之一。ABC家族是一组跨膜蛋白，具有ATP结合区域的单向底物转运泵，以主动转运方式完成多种分子的跨膜转运。其中的三个家族成员ABCB1/p-gp(p-glycoprotein，P-gp)、ABCC1/MRP1(Multidrug Resistance-associatedProtein 1，MRP)和ABCG2/BCRP(breast cancer resistance protein，BCRP)在肿瘤发生耐药时高表达(图1-1)，这些跨膜蛋白通过降低抗肿瘤药物在细胞内的浓度，或在细胞内重新分布抗肿瘤药物，导致肿瘤细胞的耐药产生。

ABCG2/BCRP/MXR ABCG2属于ABC转运体蛋白家族中的G亚家族，有655个氨基酸残基，分子量为72kD，定位于细胞膜上，在1-400位残基有一个ABC家族特征性的亲水性的基序，具有独特的结构特征：①由1个ATP结合域和6个α螺旋跨膜结构的疏水性的羧基端跨膜区组成，属于半转运蛋白[McDevitt CA，Collins RF，Conway M，et al.Purification and3D structural analysis of oligomeric human multidrug transporterABCG2.Structure，2006，14(11)：1623-1632]；②虽属半转运子，却定位于细胞膜；③ABCG2的ATP结合结构域位于N端，而跨膜结构域位于C端，在结构上与其他亚族的转运蛋白如P-gp、MRP1也存在明显差异(图1-2)；④一个功能性的ABCG2转运蛋白需要两个或者两个以上的核苷酸结合结构域和跨膜结构域，才能形成一个底物转移通道[cheffer GL，MaliepaardM，Pijnenborg AC，et al.Breast cancer resistance protein is localized at theplasma membrane in mitoxantrone-and topotecan-resistant cell lines.CancerRes，2000，60(10)：2589-2593]。因此，ABCG2作为半转运蛋白很有可能是形成同源二聚体或低聚物而发挥功能。由于ABCG2结构的特异性，决定其所介导的耐药与p-gp和MRP1不同。