[发明专利]一种确定细胞培养基中主要酸性物质的方法

说明书

本发明涉及一种确定细胞培养基中主要酸性物质的方法，所述方法包括以下步骤：培养开始前，测定所述细胞培养基的pH值，记为A值；从培养细胞的生物反应器中取培养基，测定所述培养基的pH值，记为B值；摇动所述细胞培养基，使其中的气体溢出，待气体溢出后，测定所述培养基的pH值，记为C值；比较A值、B值和C值之间的大小，确定所述细胞培养基中酸性物质的主要种类。本发明所述方法能够快速、准确地确定培养基中主要酸性物质的种类，有利于后续有针对性地脱除或中和培养基中的酸性产物，提高效率和性价比。

技术领域

本发明涉及细胞培养领域，具体而言，涉及一种确定细胞培养基中主要酸性物质的方法。

背景技术

细胞培养开始于本世纪初，到1962年规模开始扩大，发展至今已成为在生物、医学研究和应用中广泛采用的技术，利用细胞培养生产具有重要医学价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等，已经成为医药生物技术产业的重要部分。

细胞环境中代谢废物的积累是抑制细胞生长的主要因素，这些代谢废物包括二氧化碳、乳酸和氨。其中，二氧化碳和乳酸是培养基中最主要的酸性代谢废物，随着细胞培养规模和密度的增大，二氧化碳和乳酸在细胞培养基中逐渐累积，对细胞的正常生理功能产生抑制甚至毒害作用。而氨的积累使细胞内UDP氨基己糖增加，影响细胞的生长和蛋白质的糖基化过程，抑制Gln的代谢，使Asp和Glu消耗增加。

因此，对细胞培养基中二氧化碳、乳酸和氨等进行较为准确地检测以及有效脱除或中和，对优化细胞培养和提高产量而言具有重要意义。

目前，单独检测细胞培养基中二氧化碳和乳酸含量的方法较为复杂，例如滴定法、吸光度法等，因此，现有技术一般通过一次性测定培养基pH值的方法对其中二氧化碳和乳酸含量进行估算。该方法只能大致知晓培养基中二氧化碳和乳酸的总含量，无法获知其中酸性物质主要是二氧化碳还是主要是乳酸，难以有针对性地将实际的酸性物质脱除。

另外，目前现有技术也缺少能够行之有效地将二氧化碳和氨脱除的方法。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种确定细胞培养基中主要酸性物质的方法，所述方法能够简单、快速地测定培养基中酸性物质的类型，对酸性物质进行定性分析，便于后续做出有针对性地应对，提高酸性废物的脱除或中和效率。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种确定细胞培养基中主要酸性物质的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)培养开始前，测定所述细胞培养基的pH值，记为A值；

(2)在培养过程中，从培养细胞的生物反应器中取培养基，测定所述培养基的pH值，记为B值；

(3)摇动所述细胞培养基，使其中的气体溢出，待气体溢出后，测定所述培养基的pH值，记为C值；

(4)比较A值、B值和C值之间的大小，确定所述细胞培养基中酸性物质的主要种类：

如果C值－B值＞0.2，且A值－C值＞0.2，则二氧化碳和乳酸为细胞培养基中的主要酸性物质；

如果C值－B值＞0.2，且A值－C值≤0.2，则二氧化碳为细胞培养基中的主要酸性物质；

若C值－B值≤0.2，且A值－C值＞0.2，则乳酸为细胞培养基中的主要酸性物质。

具体实施方式

一种确定细胞培养基中的主要酸性物质的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)、培养开始前，测定所述细胞培养基的pH值，记为A值；

(2)、在培养过程中，从培养细胞的生物反应器中取培养基，测定所述培养基的pH值，记为B值；