[发明专利]一种确定细胞培养基中主要酸性物质的方法有效
申请号: | 201711407811.3 | 申请日: | 2017-12-22 |
公开(公告)号: | CN108051550B | 公开(公告)日: | 2020-07-24 |
发明(设计)人: | 朱长动;陈宏;李莉;蒋晓梅;张天舒;冯玉强;王玉红;刘金伟;曾晓敏;吴琼;于盼盼;谷亮;王仁君;王博;赵博;崔凯 | 申请(专利权)人: | 吉林冠界生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/00 | 分类号: | G01N33/00;G01N21/80 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 李进 |
地址: | 134000 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 确定 细胞 培养基 主要 酸性 物质 方法 | ||
1.一种确定细胞培养基中主要酸性物质的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)、培养开始前,测定所述细胞培养基的pH值,记为A值;
(2)、在培养过程中,从培养细胞的生物反应器中取培养基,测定所述培养基的pH值,记为B值;
(3)、摇动所述细胞培养基,使其中的气体溢出,待气体溢出后,测定所述培养基的pH值,记为C值;
(4)、比较A值、B值和C值之间的大小,确定所述细胞培养基中酸性物质的主要种类:
如果C值-B值>0.2,且A值-C值>0.2,则二氧化碳和乳酸为细胞培养基中的主要酸性物质;
如果C值-B值>0.2,且A值-C值≤0.2,则二氧化碳为细胞培养基中的主要酸性物质;
若C值-B值≤0.2,且A值-C值>0.2,则乳酸为细胞培养基中的主要酸性物质;
(5)、根据步骤(4)的分析结果,采取不同措施调整细胞培养基中的pH值:
当所述细胞培养基中的主要酸性物质为二氧化碳时,向所述细胞培养基中通入压缩空气,以脱除细胞培养基中的二氧化碳;
当所述细胞培养基中主要酸性物质为乳酸时,向所述生物反应器中添加碱性物质,中和所述乳酸;
当所述细胞培养基中主要酸性物质为二氧化碳和乳酸时,向所述生物反应器中通入压缩空气,添加碱性物质,中和乳酸;
所述压缩空气从所述细胞培养基的底层通入和所述压缩空气还从细胞培养基的表层通入;
从底层通入的压缩空气和从表层通入的压缩空气的压力为 0.015~0.02 MPa。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述表层持续通入压缩空气,所述底层根据步骤(4)的分析结果启动或停止通入压缩空气。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法在通入压缩空气和/或添加碱性物质的同时,重复所述步骤(2)~(4),直至C值-B值≤0.2和/或A值-C值≤0.2。
4.根据权利要求1~3任一项所述的方法,其特征在于,所述方法还包括以下步骤:
(6)、对所述生物反应器的气压进行监测并及时排除气体从而将所述生物反应器的气压维持在固定值;
所述监测为自动化监测;所述自动化监测为实时监测;
所述气体通过排气阀排出,所述排气阀为自动排气阀;所述自动排气阀的开度大小可调节;
所述生物反应器的固定气压值为0.005~0.01 MPa。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述方法还包括在排出气体之前对气体进行冷凝的步骤。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,其特征在于,所述方法还包括对排出的气体进行废气处理的步骤。
7.根据权利要求1~3,5~6任一项所述的方法,其特征在于,所述生物反应器为大型生物反应器,所述大型生物反应器的体积为3000~6000L。
8.根据权利1~3,5~6任一项所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)、所述步骤(2)和/或步骤(3)中的pH值通过pH计或pH试纸的方式加以测定。
9.根据权利要求1~3,5~6任一项所述的方法,其特征在于,所述细胞为植物细胞或动物细胞;所述动物细胞为用于生产抗原或病毒的细胞。
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