[发明专利]一种复方三维右旋泛酸钙糖浆中5种维生素的UHILIC-MS/MS检测方法

说明书

本发明公开了一种复方三维右旋泛酸钙糖浆中5种维生素的UHILIC‑MS/MS检测方法，包括以下步骤：取样品滤液，按样品滤液：内标溶液体积比为10:990的比例加入内标溶液后得到供试品溶液；将上述操作得到的供试品溶液注入快速液相色谱串联质谱仪按如下条件进行检测后，用于复方三维右旋泛酸钙糖浆中5种维生素的定性和/或定量分析：流动相条件：流动相A：含甲酸的90％乙腈溶液，流动相B：含甲酸和甲酸铵水溶液。本发明方法为复方三维右旋泛酸钙糖浆的开发利用和质量评价提供了可靠的实验依据。

技术领域

本发明涉及糖浆剂质量检测方法领域，具体涉及一种复方三维右旋泛酸钙糖浆中5种维生素的UHILIC-MS/MS检测方法。

背景技术

复方三维右旋泛酸钙糖浆，又称为维他肥儿膏、维力膏，由维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆、烟酰胺、泛酸钙(也可称为维生素B₅)这5种西药成分和另外10种中药(党参、白术、茯苓、薏苡仁、芡实、山药、山楂、焦麦芽、莲子、白扁豆)浸膏及饴糖等组成的，用于营养不良及维生素缺乏症，具有治疗儿童厌食症的作用。在中国药典中，对5种维生素测定采用紫外-可见分光光度法、滴定法或色谱法，操作繁琐、消耗样品量大，且不能实现同时测定的目的。

查阅现有技术中的文献发现，对5种维生素的质量控制研究文献报道均主要采用HPLC法，陈彩云等于2017年5月在《食品安全质量检测学报》上发表了一篇名称为《高效液相色谱法同时测定保健食品中泛酸、烟酰胺、维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆的含量》，该文献中公开了一种以庚烷磺酸钠作为水相可以同时对5种维生素进行含量测定的方法，该方法的分析时间需要长达20min。复方三维右旋泛酸钙糖浆由于成分较为复杂，目前，针对复方三维右旋泛酸钙糖浆的质量控制方面的文献报道并不多，仅翁水旺于2004年在《药物分析杂志》第6期中发表了一篇名称为《RP-HPLC法测定复方三维右旋泛酸钙糖浆中维生素B₁和维生素B₆的含量》，该报道中采用HPLC法同时测定了该糖浆中的维生素B₁、B₆，并进一步的优选了烟酰胺的含量测定方法，然而该方法分析时间较长(25min-40min)，且水相的配制极为复杂。

由于待测定成分极性大，在普通色谱柱中难以保留，常规C18色谱柱往往难以实现同时测定的目的，现有方法分析时间长，普通反相色谱难以保留，需要采用高载碳色谱柱，且流动相中采用的大多离子对试剂(如庚烷磺酸钠、己烷磺酸钠等)对色谱柱均有较大损害。随着分析技术的发展，超亲水作用色谱(Ultra Hydrophilic InteractionChromatography，UHILIC)应运而生，与传统反相色谱柱相比，其填料上没有十八烷基键合相，其分离机制不同于普通C18色谱柱，非反相色谱；而且其色谱过程用的流动相为亲水体系，非正相溶剂，如石油醚、乙酸乙酯、氯仿等，因此色谱行为也非正相色谱。因此，亲水作用色谱是一类独特的色谱，通过对硅胶硅醇基在亲水体系中(甲醇-水、乙腈-水)表现对亲水性物质有较强的吸附作用而产生独特的保留机制，特别适合于强极性物质的色谱保留，因此，非常有利于类似维生素这种极性化合物，另外该色谱柱的流动相采用的是高比例有机相/低比例水相，这样的结合有利于提高电喷雾离子化质谱(Mass Spectrometry，MS)的灵敏度，进一步提高了分析专属性、灵敏度及缩短分析时间。现有技术中，不仅尚未有关于复方三维右旋泛酸钙糖浆中5种西药成分同时测定的报道，更没有将亲水作用色谱应用于检测复方三维右旋泛酸钙糖浆中5种西药成分的报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种复方三维右旋泛酸钙糖浆中5种维生素的超亲水作用色谱-串联质谱(Ultra Hydrophilic Interaction Chromatography-massspectrometry/mass spectrometry，UHILIC-MS/MS)检测方法，该方法能够快速、准确的实现复方三维右旋泛酸钙糖浆中五种维生素的检测。