[发明专利]一种发酵中药复合原料制备杀小菜蛾生物制剂的方法

说明书

本发明涉及一种发酵中药复合原料制备杀小菜蛾生物制剂的方法，属于生物发酵技术领域。为了解决现有的针对性差的问题，提供一种发酵中药复合原料制备杀小菜蛾生物制剂的方法，包括选取苦楝、苦参和百部中药原料清洗干净后，进行粉碎处理后，加入发酵罐内，再加水稀释成发酵底物；灭菌后，活化的地衣芽孢杆菌按照10⁸cfu/mL～10⁹cfu/mL的量接种到灭菌后的发酵底物，进行发酵处理，得到发酵液；滤除去沉淀物，得到杀小菜蛾生物制剂。本发明得到的生物制剂中能够同时含有川楝素、苦参碱和百部定碱及异百部定碱实现提高对小菜蛾的杀虫功能，且对疏菜植物本身具有促进生长的效果。

技术领域

本发明涉及一种发酵中药复合原料制备杀小菜蛾生物制剂的方法，属于生物发酵技术领域。

背景技术

小菜蛾(Plutel la xylostel la)为鳞翅目菜蛾科昆虫，别名小青虫、两头尖、方块蛾、吊尸虫等，属于世界性迁飞害虫。小菜蛾具有发生世代多，繁殖能力强、寄主范围广、抗药性水平高，难于防治等特点。主要为害甘蓝、紫甘蓝、青花菜、薹菜、芥菜、花椰菜、白菜、油菜、萝卜等十字花科植物，且每年全世界用于防治小菜蛾的费用高达10亿美元。目前，对于小菜蛾的危害主要使用化学农药对小菜蛾进行防治，不仅污染环境，还易造成植物药害，还容易引起人畜中毒。因此，生物性小菜蛾杀虫剂的研发受到关注。

一般采用化学农药进行杀虫是社会公认的灭虫方式，但是，采用化学农药均有一定的毒性，喷洒到植物上长期存在毒性残留的问题。在蔬菜种植的过程中，杀虫剂的使用是相当普度的，这就会因采用化学农药而导致的各种副作用，不利于人体的健康。随着人们生存环境和自然生态的保护意识日益增强对于化学农药这些高农药残留的杀虫剂受到的限制。因此，减少农药使用，以生物农药替代化学农药已成为目前杀虫剂的发展趋势。

目前，发现的苦楝、苦参和百部等植物材料具体较好的杀虫效果，根据现有的研究情况，发展了苦楝具有杀虫的效果，其中的川楝素对菜青虫等具有很强的胃毒作用，可以破坏中肠组织，阻断神经传导而导致害虫麻痹、昏迷、死亡。而苦参含有许多次生代谢产物，苦参醚提物及醇提物对金黄色葡萄球菌有较强的抑菌作用；苦参水浸剂对堇色毛癣菌、同心性毛癣菌、许兰毛癣菌、奥杜盎小芽孢癣菌等有抑制作用。苦参碱可麻痹神经中枢，使虫体蛋白质凝固，封闭虫体气孔，使害虫窒息而死；百部含百部碱、百部定碱、异百部定碱、原百部碱、百部宁碱、华百部碱对叶百部碱、霍多林碱、直立百部碱等多种次生代谢产物，对蚊蝇幼虫、头虱、阴虱、衣虱及臭虫等均有杀灭作用，高浓度百部在体外有杀死鼠蛲虫的作用。因此，目前也有研究表明通过采用发酵的方式来制取生物制剂的杀虫剂。如中国专利申请(公开号：CN106867947A)公开了一种以苦楝为原料经微生物发酵制备杀虫剂的方法，该方法包括将解淀粉芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、苏云金杆菌分别接种于种子培养基中进行培养成活按比例配成混合菌，再将苦楝经过乙醇和水处理后，粉碎加水、灭菌后放入发酵罐中，将上述混合菌接种，并在37℃培养3-12天后，得到相应的发酵液，过滤后，得到的发酵液即可杀虫剂。虽然，其通过生物发酵的方式能够在一定程度上避免失活和有机溶剂污染的问题，但是，其采用多种生物菌共存的方式进行发酵，存在成本高，多种菌共存的条件复杂等问题，且其仅是针对单一植物的发酵培养。

发明内容

本发明针对以上现有技术中存在的缺陷，提供一种发酵中药复合原料制备杀小菜蛾生物制剂的方法，解决的问题是如何实现兼具改善植物生长和高活性的杀小菜蛾虫性能。

本发明的目的是通过以下技术方案得以实现的，一种发酵中药复合原料制备杀小菜蛾生物制剂的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

A、选取苦楝、苦参和百部中药原料清洗干净后，进行粉碎处理后，加入发酵罐内，再加水稀释成发酵底物；

B、将得到的发酵底物进行灭菌处理后，再将经活化的地衣芽孢杆菌按照10⁸cfu/mL～10⁹cfu/mL的量接种到灭菌后的发酵底物，使发酵温度在25℃～35℃的条件下进行发酵处理，得到发酵液；