[发明专利]一种抗体的抗原结合片段-海兔毒素偶联物及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201711195434.1 | 申请日： | 2017-11-24 |
| 公开（公告）号： | CN108084267B | 公开（公告）日： | 2021-03-30 |
| 发明（设计）人： | 刘文慧;赵文彬;陈枢青 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;A61K47/68;A61K38/07;A61P35/00 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈自军 |
| 地址： | 310013 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 抗体 抗原 结合 片段 海兔 毒素 偶联物 及其 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种抗体的抗原结合片段-海兔毒素偶联物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）提供C端具有LPXTG序列的抗CD20单抗的抗原结合片段、具有寡甘氨酸接头的海兔毒素；
（2）在Sortase A 酶催化下，LPXTG 序列与寡甘氨酸接头发生转肽反应，使所述抗原结合片段与具有寡甘氨酸接头的海兔毒素进行偶联；
（3）反应完成后，分离纯化得到所述抗原结合片段-海兔毒素偶联物，
所述抗原结合片段的重链C端连接有LPXTG序列，
所述抗原结合片段的重链LPXTG序列后还连接有组氨酸纯化标签，
所述抗原结合片段的重链氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，轻链氨基酸序列如SEQ IDNo.2所示，所述抗原结合片段由重链和轻链组装成Fab结构，
所述寡甘氨酸接头为GGG序列，所述寡甘氨酸接头与海兔毒素之间设有缬氨酸-瓜氨酸二肽接头。
2.如权利要求1所述制备方法制备的抗原结合片段-海兔毒素偶联物。
3.如权利要求2所述的抗原结合片段-海兔毒素偶联物在制备抗肿瘤药物中的应用。
4.一种抗肿瘤药物，包括如权利要求2所述的抗原结合片段-海兔毒素偶联物。
5.如权利要求4所述的抗肿瘤药物，其特征在于，所述肿瘤为CD20阳性的B细胞淋巴瘤。
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