[发明专利]一种多花兰的组培快繁方法

权利要求书

1.一种多花兰的组培快繁方法，包括外植体的消毒、诱导培养、继代培养及壮苗培养，其特征在于具体步骤为：

(1)外植体的消毒：采集多花兰的茎尖作为外植体，外植体长2cm-4cm，首先用流水冲洗，再用体积浓度为75％的酒精浸泡1min后剥去表面部分叶片，接着在植物消毒液中浸泡8min-15min后继续剥去部分叶片，随后在所述植物消毒液中继续浸泡5-10min，用无菌水冲洗2-4次，最后移入超净工作台内，在解剖镜下剥去剩下的叶片，露出生长点，用解剖刀切取2-5mm大小的茎尖分生组织；所述植物消毒液由以下重量份的原料混合制成：乙酰紫草素0.05-0.08份，芦荟汁5-8份，夹竹桃叶提取物0.1-0.2份，吐温-602-4份，水95-100份；

(2)诱导培养：将所述茎尖分生组织接种在诱导培养基内，在温度为25±1℃，光照为2000LX，每天光照10-14h的条件下培养48-52天，得多花兰园球茎；所述诱导培养基的组成为：花宝1号3g/L+活性炭1g/L+赤霉素1mg/L-2mg/L+琼脂5.0g/L-8.0g/L+蔗糖2.0g/L-4.0g/L+辣木叶汁5.0g/L-8.0g/L+枸杞叶汁3.0g/L-5.0g/L；

(3)继代培养：将步骤(2)中生长得到的多花兰园球茎转接入继代培养基内，在温度为25±1℃，光照为2000LX，每天光照10-14h的条件下培养，随着园球茎的生长不断更换培养基，继代培养75-85天后，得到长根长叶的多花兰幼株；

(4)壮苗培养：将多花兰幼株转接到壮苗培养基中，培养至根数为3-5条，叶片3-4片，苗高4-8cm，即得到可以移栽的多花兰幼苗。

2.根据权利要求1所述的多花兰的组培快繁方法，其特征在于：所述继代培养基的组成为：花宝1号3g/L+活性炭1g/L+萘乙酸2mg/L-3mg/L+琼脂5.0g/L-8.0g/L+辣木叶汁5.0g/L-8.0g/L+枸杞叶汁3.0g/L-5.0g/L+蔗糖2.0g/L-4.0g/L。

3.根据权利要求1所述的多花兰的组培快繁方法，其特征在于：所述壮苗培养基的组成为：1/2MS+活性炭1g/L+吲哚丁酸0.4mg/L-0.6mg/L+琼脂5.0g/L-8.0g/L+辣木叶汁5.0g/L-8.0g/L+枸杞叶汁3.0g/L-5.0g/L+蔗糖2.0g/L-4.0g/L。

4.根据权利要求1所述的多花兰的组培快繁方法，其特征在于：所述夹竹桃提取物的提取方法为：将新鲜夹竹桃叶捣碎成浆，用体积浓度为70％-75％的乙醇回流提取2-6次，乙醇与所述夹竹桃叶的液料比为5-8：1；合并滤液，浓缩、干燥得夹竹桃叶醇提物；以丙酮∶正丁醇体积比为3-4：1的混合液为提取剂，向所述夹竹桃叶醇提物中加入提取剂，提取2-5次，合并提取液，回收所述提取剂得到夹竹桃叶抑菌成分提取物。

5.根据权利要求1所述的多花兰的组培快繁方法，其特征在于：所述辣木叶汁和枸杞叶汁的制备方法是：先洗净叶片然后充分捣碎，再用纱布过滤，所述滤液即为相应的汁。

6.根据权利要求1所述的多花兰的组培快繁方法，其特征在于：所述芦荟汁是将芦荟除去表皮后，用机器搅打成汁得到的。