[发明专利]一种利用基因芯片检测结核分枝杆菌的方法在审
| 申请号： | 201710593266.5 | 申请日： | 2017-07-20 |
| 公开（公告）号： | CN107267633A | 公开（公告）日： | 2017-10-20 |
| 发明（设计）人： | 董秋月 | 申请（专利权）人： | 杭州更蓝生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/32 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 310052 浙江省杭州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 基因芯片 检测 结核 分枝杆菌 方法 | ||
1.一种利用基因芯片检测结核分枝杆菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、基因芯片制备；
步骤二、基因样品制备；
步骤三、基因芯片与基因样品杂交；
步骤四、检测杂交结果。
2.根据权利要求1所述的利用基因芯片检测结核分枝杆菌的方法，其特征在于，步骤一中的基因芯片通过以下步骤制备：首先，用芯片点样仪将稀释好的DNA分子探针印点到固相载体上，然后，将基片放入紫外仪中进行交联至500mJ/cm2，最后用0.5％SDS清洗液清洗5-10min，纯净水清洗5-7min，低速离心或吹干后备用。
3.根据权利要求2所述的利用基因芯片检测结核分枝杆菌的方法，其特征在于，步骤一采用原位合成和微矩阵的方法将寡核苷酸片段或cDNA作为探针按顺序排列在固相载体上。
4.根据权利要求2或3所述的利用基因芯片检测结核分枝杆菌的方法，其特征在于，所述固相载体选自玻璃片、尼龙膜或者硝酸纤维素中的一种。
5.根据权利要求1所述的利用基因芯片检测结核分枝杆菌的方法，其特征在于，所述步骤二中的基因样品通过以下步骤制备：将待测生物样品进行DNA提取、PCR扩增，获取其中的蛋白质或DNA、RNA，然后用荧光标记。
6.根据权利要求5所述的利用基因芯片检测结核分枝杆菌的方法，其特征在于，步骤三中将带有荧光标记的基因样品与杂交液按1:5混合均匀后，滴加在芯片上60℃杂交1.5h；其中，杂交液由5×Deharndt，2×SSC，50％去离子甲酰胺，0.2％SDS的溶液组成。
7.根据权利要求1所述的利用基因芯片检测结核分枝杆菌的方法，其特征在于，步骤四中采用芯片扫描仪在激光波长543nm，发射波长570nm下对芯片进行扫描，将荧光转换成数据。
8.根据权利要求1所述的利用基因芯片检测结核分枝杆菌的方法，其特征在于，从基因样品制备、基因芯片与基因样品杂交到检测杂交结果的整个分析过程为集成化操作。
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